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电融合方法建立抗结核杆菌单克隆抗体细胞株 被引量:4
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作者 郭明霞 潘最 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期393-395,共3页
By using the electrofusion tecndque, the fusion of NSI myeloma cells with spleen cells of BALB / c mouse immunized with five species of mycobacteria was caaced cuL With the ophmal electrofUSion condihons, we obtained ... By using the electrofusion tecndque, the fusion of NSI myeloma cells with spleen cells of BALB / c mouse immunized with five species of mycobacteria was caaced cuL With the ophmal electrofUSion condihons, we obtained a high fuSion efficiency of l.75 hybrid cell clones per 105 spleen cells. ELISA was used for screening secrehng anhmycobacteria McAb hybrid cells. After cloning, 22 stable hybrid cells’lines were selected, and 8 of them had been studied. 展开更多
关键词 细胞电融合 单克隆抗体 分枝杆菌 ELISA
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高效电融合技术建立能分泌抗分枝杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞系
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作者 郭明霞 苏焯 +1 位作者 潘最 汪和睦 《天津医科大学学报》 1996年第2期23-26,共4页
用细胞电穿孔融合仪,摸索最佳电融合参数,对5种分枝杆菌超声粉碎菌体混合抗原免疫的1只BALB/C小鼠脾细胞和NSl骨髓瘤细胞进行了电融合。在最佳电融合参数下,获得1.75个杂交瘤细胞克隆/105个脾细胞的最佳融合率。... 用细胞电穿孔融合仪,摸索最佳电融合参数,对5种分枝杆菌超声粉碎菌体混合抗原免疫的1只BALB/C小鼠脾细胞和NSl骨髓瘤细胞进行了电融合。在最佳电融合参数下,获得1.75个杂交瘤细胞克隆/105个脾细胞的最佳融合率。采用间接ELISA法筛选,经克隆化,获22株分泌抗分枝杆菌单克隆抗体(McAb)的阳性杂交瘤细胞株。并对其中11株进行了初步研究。 展开更多
关键词 单克隆抗体 分枝杆菌 电融合 杂交瘤
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组合式数显直读光栅光谱仪
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作者 谭成章 顾立群 潘最 《物理实验》 1993年第4期169-170,共2页
常用光谱仪分为棱镜光谱仪、光栅光谱仪和傅立叶光谱仪。棱镜光谱仪自由光谱范围广,但角色散不大且非线性;傅氏光谱仪利用面光源,集光本领强,但完成傅氏变换需大量计算。光栅光谱为正弦光谱,谱线细,分辨本领高;配以滤波片,可扩大自由光... 常用光谱仪分为棱镜光谱仪、光栅光谱仪和傅立叶光谱仪。棱镜光谱仪自由光谱范围广,但角色散不大且非线性;傅氏光谱仪利用面光源,集光本领强,但完成傅氏变换需大量计算。光栅光谱为正弦光谱,谱线细,分辨本领高;配以滤波片,可扩大自由光谱范围,避免不同级次谱线重叠;改用闪耀光栅可提高光强利用率。目前教学科研多采用光栅作色散元件,但这些光谱仪结构复杂,均需通过繁琐计算或标准谱内插等方法读数。 展开更多
关键词 光谱仪 数学显示 光栅光谱仪
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LPC通过改变磷脂膜物理状态影响蛋白激酶C的活性 被引量:1
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作者 潘最 陈建文 《中国科学(C辑)》 CSCD 1999年第2期157-164,共8页
1 棕榈酰溶血磷脂酰胆碱 (C16∶0LPC)对甘油二油酸脂 (DOG)诱导的蛋白激酶C(PKC)有双向调控作用 ,低浓度时激活 ,高浓度时反而抑制 .利用差示扫描量热 (DSC)、荧光探针标记等方法 ,研究了磷脂样品浊度、热相变行为、磷脂分子酰链的堆积... 1 棕榈酰溶血磷脂酰胆碱 (C16∶0LPC)对甘油二油酸脂 (DOG)诱导的蛋白激酶C(PKC)有双向调控作用 ,低浓度时激活 ,高浓度时反而抑制 .利用差示扫描量热 (DSC)、荧光探针标记等方法 ,研究了磷脂样品浊度、热相变行为、磷脂分子酰链的堆积情况以及分子头部基团间空隙 .C16∶0LPC的加入使脂质体双层膜上磷脂分子堆积更加疏松 ,头部基团间空隙逐渐加大 ,DSC图显示膜上出现两不互溶的区域 :C16∶0LPC富集的DPPS/C16∶0LPC区和C16∶0LPC缺乏的DPPS区 .C16∶0LPC/DPPS摩尔比为 0 .2 3 4时 ,两区域有最大的共存交界范围 ,此时PKC的活性最大 ;C16∶0LPC/DPPS超过 0 .43 4后 ,DPPS的相变峰消失 ,脂质体遭到破坏 ,趋向于微团结构 ,PKC的活性被抑制 .DOG具有保持双层膜稳定的功能 ,在DPPS和DOG组成的体系中需要更高浓度的C16∶0LPC才能破坏脂质体的双层结构 .实验结果表明 ,C16∶0LPC通过改变磷脂脂质体的结构及膜的物理状态 ,影响了PKC的活性 . 展开更多
关键词 蛋白激酶C LPC 物理状态 活性 磷脂膜
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用非去污剂法从鼠肺中分离细胞质膜微囊 被引量:3
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作者 姜艳 潘最 +1 位作者 陈建文 黄芬 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第3期304-307,共4页
细胞质膜微囊 (Caveolae)是质膜上直径 5 0~ 1 0 0nm的烧瓶状的内陷微区 ,行使多种生物学功能 ,并且与细胞信号转导及疾病有关 .用非去污剂法首次从组织中分离出Caveolae ,电子显微镜下观察为单独或成串出现的脂双层结构的小囊泡 .电... 细胞质膜微囊 (Caveolae)是质膜上直径 5 0~ 1 0 0nm的烧瓶状的内陷微区 ,行使多种生物学功能 ,并且与细胞信号转导及疾病有关 .用非去污剂法首次从组织中分离出Caveolae ,电子显微镜下观察为单独或成串出现的脂双层结构的小囊泡 .电泳结果显示这种方法与Tri tonX 1 0 0法相比 ,能够更多地保留Caveolae上的蛋白成分 .免疫印迹实验验证 ,在Caveolae上存在特异蛋白Caveolin以及重要的参与信号传递的激酶PKC α. 展开更多
关键词 细胞质膜微囊 非去污剂法 信号转导 分离
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A mechanism underlying stimulation and inhibition of protein kinase C by lyso-PC: A role of membrane physical state
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作者 潘最 陈建文 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1998年第6期584-591,共8页
Lysophosphatidylcholine (lyso PC) biphasically regulates the diacylglycerol induced activation of protein kinase C (PKC). In common parlance, lyso PC stimulates PKC at low concentrations, but, conversely, inhibits it ... Lysophosphatidylcholine (lyso PC) biphasically regulates the diacylglycerol induced activation of protein kinase C (PKC). In common parlance, lyso PC stimulates PKC at low concentrations, but, conversely, inhibits it at high concentrations. The activity of purified PKC from rat brains was measured in the vesicles made up of dipalmitoylphosphatidylserine (DPPS), 1,2 sn diolein (DOG) and different molar ratios of 1 palmitoyl sn glycerol 3 phosphoryl choline (C16:0 lyso PC). The effect, i.e. stimulation or inhibition on PKC by C16:0 lyso PC, depends on DPPS and DOG concentrations as well as its own concentration. When the concentration of DOG is stable, this C16:0 lyso PC action depends on C16:0 lyso PC/DPPS molar ratio. Differential scanning calorimetry (DSC), two fluorescence probes and light scattering were used to analyze the physical characteristics of membrane, including thermotropic phase behavior, the turbidity, the lipid molecular acyl chains packing and the head group spacing. The more adulteration of C16:0 lyso PC in liposome bilayer membrane, the looser acyl chains pack, and the broader head group spacing. DSC results show that there are two immiscible lipid areas in the membrane: C16:0 lyso PC rich area and C16:0 lyso PC poor area. When C16:0 lyso PC/DPPS molar ratio was 0 234, the two areas had the broadest boundary and the activation of PKC was the highest. When the ratio was over 0 434, the phase transition of DPPS disappeared; micelle tended to substitute the structure of bilayer; the activity of PKC was inhibited completely. DOG can stabilize the bilayer structure of membrane, so the C16:0 lyso PC/DPPS molar ratios to inhibit PKC in lipid mixture with DOG are higher than that without DOG. The ability of C16:0 lyso PC to change the physical properties and the structure of membrane plays an important role in its effect on PKC activation. 展开更多
关键词 protein KINASES C LYSOPHOSPHATIDYLCHOLINE diolein differential scanning CALORIMETRY physical properties of membrane.
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