焦磷酸测序法检测OCT4启动子在大鼠骨髓源性肝干细胞分化中的甲基化变化

骨髓间充质干细胞具有分化成为肝细胞的潜能已得到证实,但其分化的调控机理还不完全清楚。通过检测大鼠骨髓源性肝干细胞(rat bone marrow-derived liver stem cells,RBMLSCs)诱导分化为肝细胞过程中OCT4启动子甲基化的变化,来探讨启动子甲基化调控细胞分化的机制。RBMLSCs用25μg/L重组人肝细胞生长因子和0.1 nmol/L地塞米松进行诱导,在诱导之后不同时间点(0 d,7 d,14 d)提取细胞的DNA及RNA。用荧光定量PCR法检测白蛋白(albumin,Alb)和OCT4的m RNA表达水平,应用焦磷酸测序法定量检测OCT4基因的启动子中4个Cp G位点的甲基化变化。结果表明:在RBMLSCs分化过程中,Alb m RNA持续增高(P<0.05),但OCT4 m RNA表达在7 d及14 d明显减少(P<0.005);同时OCT4启动子上游的Cp G 1-2-3甲基化频率显著上升(P<0.001),但Cp G 4甲基化无明显变化。这些结果说明OCT4启动子高甲基化可能导致其m RNA表达减少,RBMLSCs多能性消失,但Cp G 4并不参与这一分化调控过程。

Laennec组织病理学分级与HYP含量、临床分期及肝功能的关系

目的探讨Lannec组织病理学分级与HYP含量、临床分期及肝功能的关系。方法对30例肝炎后肝硬化患者行肝活检术,检测肝组织内羟脯氨酸(HYP)含量,判断肝硬化程度,并进行Lannec组织病理学分级。比较Lannec组织病理学分级与临床分期、HYP含量及肝功能的相关性。结果 Laennec组织病理学分级与临床分级、MELD(model for end-stage liver disease)评分及HYP均具有良好的相关性(r=0.58,P<0.01;r=0.60,P<0.01;r=0.53,P<0.01)。结论 Laennec组织病理学分级系统可以一定程度地反映肝脏硬化程度、临床阶段以及肝功能情况,有望预测患者并发症的发生率。

基于负样本精简概念格规则的语义概念检测

为挖掘视频中丰富的语义信息,提出基于负样本精简概念格规则的语义概念检测方法。分析基于概念格的语义分析系统,考虑训练数据中负样本的信息,提出利用负样本精简的语义规则提取算法,将其应用于视频语义检测。先将视频镜头的低层特征映射到低层语义特征,再利用该算法生成语义分类规则,进行视频语义概念检测。实验结果表明,该方法是有效可行的。

大鼠CD90^+Lin^-骨髓细胞诱导分化为肝细胞过程中Klf4、Nanog基因的表达及启动子区甲基化观察

目的观察大鼠CD90^+Lin^-骨髓细胞诱导分化为肝细胞过程中Klf4、Nanog基因表达及启动子区CpG位点的甲基化变化。方法大鼠CD90^+Lin^-骨髓细胞在体外用25μg/L重组人肝细胞生长因子和0.1 nmol/L地塞米松诱导其分化,在诱导第0、7、14天分别提取细胞DNA和RNA。采用实时荧光定量PCR法检测Klf4、Nanog基因mRNA,甲基化特异性PCR法观察Klf4、Nanog基因启动子区CpG位点甲基化。结果与诱导第0天比较,第7、14天Klf4 mRNA相对表达量降低(P均<0.05);与诱导第0天比较,第7、14天Nanog mRNA相对表达量均降低(P均<0.05)。与诱导第0天比较,诱导第7天Klf4启动子区第1、2个CpG位点甲基化频率升高(P均<0.05);与诱导第7天比较,诱导第14天Klf4启动子区第1个CpG位点甲基化频率升高,第2、3个CpG位点甲基化频率降低,P均<0.05。与诱导第0天比较,诱导第7天Nanog启动子区第1个CpG位点甲基化频率降低,第2个CpG位点甲基化频率升高,P均<0.05;与诱导第7天比较,诱导第14天Nanog启动子区第1个CpG位点甲基化频率升高,第2个CpG位点甲基化频率降低,P均<0.05。结论大鼠CD90^+Lin^-骨髓细胞在体外诱导向肝细胞分化过程中,Klf4、Nanog基因表达随诱导时间增加呈现先下降后回升趋势,两者启动子区CpG位点甲基化程度随诱导时间增加出现不同程度变化;Klf4和Nanog基因启动子区CpG位点的甲基化变化不仅会影响Klf4、Nanog基因的表达,而且起到重要的调控作用。

如何提高电气工程施工的预算准确性

电力工业是整个国家能源安全战略的重要组成部分,也是国家发展生产以及人们提高生活水平的重要物质基础,因此,电力工程以及电力技术方案的技术经济问题是电力行业发展的重要环节,然而电气工程这样的高新技术产业由于电气工程的种类繁多常常会出现严重的技术与经济分离现象,导致电气工程预算成本增加,限制电力产业的发展。因此,为了满足电气工程的发展和人们的需要,做好电气工程施工的预算管理工作,提高电气工程的预算的正确性是非常重要的。

富血小板凝胶在经腹腹腔镜腹股沟疝修补术中的应用效果

目的探讨富血小板凝胶(PRP)在经腹腹腔镜腹股沟疝修补术(TAPP)中的临床疗效及应用前景。方法回顾性分析2018年1月至2020年6月于该院行TAPP的60例患者资料,采用随机数字表法分为治疗组(使用PRP)、对照组(使用医用胶),各30例。观察2组术后血清肿、慢性疼痛、补片感染的发生率和费用支出差异。结果2组患者均手术顺利,无中转开腹,术后均顺利出院。治疗组术后血清肿发生率(6.67%)与对照组(26.67%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组术后慢性疼痛发生率(0)与对照组(6.67%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后2组均未发生补片感染。治疗组术后平均费用支出[(12940±594)元]与对照组[(13350±606)元]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PRP具备安全可靠性,可提高腹腔镜腹股沟疝修补术的疗效,从而减少术后并发症的发生,并相应降低耗材费用。

蒙西电网110kV变电站通用造价应用分析

为完善蒙西电网110kV变电工程造价标准,控制工程投资,降低电网工程建设和运行成本,合理评价工程的技术经济指标水平,加快设计、评审进度,提高电网工程建设效率,为蒙西电网的建设创造有利条件,文章对蒙西电网110kV变电站的6个典型模块和11个子模块的通用造价进行研究,通过对典型方案及其子模块造价水平进行分析,得出蒙西电网110kV变电站工程通用造价各方案的造价指标。对比分析实例工程与通用造价典型方案及调整组合方案的差异性,结果表明通用造价对蒙西电网110kV变电站工程造价的确定和控制有很大的参考价值。

肝脏FibroScan测定和功能评分与肝硬化病理分级的相关性

目的探讨肝脏FibroScan测定和功能评分与肝硬化病理分级的相关性。方法回顾60例肝硬化患者的肝脏穿刺活检病理切片及临床资料,运用Laennec分级系统对病理切片进行组织学分级,分析肝脏FibroScan测定值和功能评分与肝硬化病理分级的相关性。结果病理分级为肝硬化轻度组27例(45%)、中度组21例(35%)、重度组12例(20%)。肝硬化轻、中、重度组的肝脏FibroScan测定值分别为(14.90±5.54)、(25.23±10.11)、(33.99±13.55)k Pa,三组间的差异具有统计学意义(P<0.05);肝脏FibroScan测定值用于判断中重度肝硬化和重度肝硬化的ROC曲线下面积分别为0.908、0.865。肝硬化轻、中、重度组的Child-Pugh评分分别为5.61±1.14、6.05±1.21、5.74±0.93,三组间的差异无统计学意义(P>0.05);肝硬化轻、中、重度组的M ELD评分分别为5.90±4.22、7.14±5.33、7.03±5.13,三组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 FibroScan在诊断肝硬化严重程度方面有一定的应用价值;肝硬化程度与肝脏功能评分无显著相关性。

H3K27me2在大鼠骨髓源性肝干细胞分化过程中的变化

目的研究大鼠骨髓源性肝干细胞(BMDLSC)向肝细胞诱导分化过程中H3K27二甲基化变化情况,初步探讨H3K27二甲基化与BMDLSC向肝细胞分化过程的关系。方法分离收集大鼠骨髓细胞,通过免疫磁珠分选获得BMDLSC,而后体外诱导其分化为肝细胞,RT-PCR动态检测其白蛋白(ALB)及甲胎蛋白(AFP)的mRNA表达水平,通过Western blotting及免疫荧光染色检测第0、7、14天核小体组蛋白H3K27二甲基化的水平。结果分离纯化的BMDLSC在体外诱导分化过程中ALB的表达水平逐渐升高,而AFP的表达水平则先升高后下降;新鲜分离的BMDLSC H3K27无明显甲基化,诱导分化后第7天H3K27二甲基化水平较前升高,第14天进一步升高。结论 BMDLSC经体外诱导后定向分化为肝细胞,在分化过程中H3K27二甲基化水平逐渐升高,H3K27二甲基化修饰变化可能参与BMDLSC细胞向肝细胞分化的调控。

农村初中劳动教育中农耕文化元素的引入与实践探究

本研究探讨了在农村初中劳动教育中引入农耕文化元素的作用与实践路径,通过对农耕文化的深入分析,发现其在增强学生文化认同感与民族自豪感、培养正确劳动观念与劳动习惯、促进人与自然的和谐共生等方面具有重要意义。本文提出了通过课程设置与教材开发、校园环境与文化氛围营造、劳动实践基地建设以及教学方法与手段创新等途径,将农耕文化融入农村初中劳动教育的具体策略。研究通过问卷调查和访谈等方式,对实施效果进行了评估。结果显示学生的文化认同感、劳动观念和环境保护意识均显著提升。研究也反思了实施过程中存在的问题与不足,并提出了相应的改进建议,旨在为农村初中劳动教育提供可行的实践路径,促进传统文化的传承与弘扬。