农抗万隆霉素的生物自显影检测技术研究

通过建立以硅胶板层析法为基础,以枯草杆菌作为指示菌的生物自显影法作为农抗万隆霉素活性组成的常规定性检测方法:用50mg/mL农抗万隆霉素粗提物点样0.5mL,用三元溶剂乙酸乙脂∶异丙醇∶正己烷=71.5∶16.8∶11.7展开,贴板10min,37℃培养10h即可得到清晰的抑菌斑色谱图。应用该方法可将万隆霉素粗提取物分离得到10个活性组分。

响应曲面法优化柔红霉素发酵培养基

目的优化培养基,提高柔红霉素发酵效价。方法采用Plackett-Burman法、最陡爬坡试验和Box-Behnken设计,用摇瓶发酵进行实验,利用SAS软件进行二次回归分析。结果 Plackett-Burman设计证明麸质粉(A)、FeSO4·7H2O(B)和NaCl(C)对产量影响较大,通过最陡爬坡试验和响应曲面法得到柔红霉素发酵培养基预测模型为:Y=-16.09+13.55A+231.49B+5.20C-3.59A2+130.00AB-30774B2-0.37AC+102.50BC-1.84C2,从中获得柔红霉素发酵的最优配方为:麸质粉2.0%,FeSO4·7H2O 0.01%,NaCl 1.51%。1500L发酵罐中试放大结果表明:柔红霉素效价提高24%。结论使用响应曲面法可以较大幅度地提高柔红霉素发酵效价。

均匀设计法优化柔红霉素发酵培养基

目的优化培养基,提高柔红霉素发酵效价。方法采用U1*0(108)均匀设计表进行均匀设计,用摇瓶发酵进行实验。结果使柔红霉素效价提高23%。结论使用均匀设计的方法可以较大幅度的提高柔红霉素发酵效价。

基因组改组构建柔红霉素高产菌株

目的:构建高产菌株,提高柔红霉素发酵效价。方法:使用基因组改组法,用摇瓶测试发酵效价。结果:使柔红霉素效价提高105%。结论:使用基因组改组的方法可以大幅度的提高柔红霉素发酵效价。

基因组重排构建柔红霉素高产菌株

目的构建柔红霉素的高产菌株,提高柔红霉素发酵水平。方法用基因组重排法构建菌株,用摇瓶发酵测定效价。结果使柔红霉素发酵效价提高50%。结论对于柔红霉素发酵效价的提高,基因组重排是一个可行的方法。