氯化甲基汞激发程序性细胞死亡与胚胎神经系统发育的关系探讨

用ＴｄＴ介导脱氧核苷酸切口末端标记（ＴＵＮＥＬ）、尼罗兰活体染色、扫描和透射电镜及体内致畸试验等方法研究了氯化甲基汞（一次性腹腔注射剂量范围是０～３．２ｍｇ／ｋｇ）能否使神经胚形成期大鼠胚胎发生细胞凋亡亦称程序性细胞死亡（ＰＣＤ）及其ＰＣＤ对胚胎神经系统发育的影响。实验结果表明：随着甲基汞剂量的不断增高，胚胎脑组织ＰＣＤ检测阳性率亦显著增加，呈明显的剂量－反应关系；电镜下发现胚胎脑上皮细胞表面微绒毛数量减少和变短，细胞膜上出现大小不一的空洞样变，细胞器正常形态亦发生病理性改变，例如出现凋亡小体；甲基汞诱发脑发育异常的主要表现是神经管未闭。研究结果提示ＰＣＤ是甲基汞导致胚胎脑部畸形发生的重要机理之一。

东方田鼠的同工酶与异构蛋白生化基因位点

目的观察四类东方田鼠在10个同工酶与异构蛋白生化基因位点上的基因分布特征，以研究它们间的遗传关系。方法应用乙酸纤维素膜电泳对四类东方田鼠的同工酶与异构蛋白生化基因位点进行测定分析。结果与结论黑龙江小体型东方田鼠与其他三类东方田鼠的电泳结果差异较大，在6个位点上都存在其所特有的等位基因，并且在其中的3个位点上它的基因型与其他三类鼠完全不同；湖南、宁夏和黑龙江大体型东方田鼠三者间的遗传距离在0．0633-0．2107之间，而黑龙江小体型东方田鼠与其他三类鼠的遗传距离在0．7068～0．8953之间；UPGMA聚类分析显示，湖南、宁夏和黑龙江大体型东方田鼠聚为一类，亲缘关系较近，而黑龙江小体型东方田鼠单独为一类，与其他三种鼠的亲缘关系均相对较远。

国产15种抗生育药物的Ames试验

抗生育药物的应用对象是正常健康人。为了确保用药者及其后代的安全,对这类药物应当进行严格的安全性试验,特别是潜在性远期危害试验(致突变、致畸、致癌试验)。Ames试验是当今普遍选用来测试化学物质是否有致突变性的方法,具有简易、快速、敏感而经济等优点。我们采用此方法对国产一些常用及新合成的抗生育药物进行了测试,旨在评价它们是否具有致突变作用。

医用热硫化硅橡胶安全性评价

我们对制造国产S-117型避孕宫颈帽的医用热硫化硅橡胶材料进行了急性毒性、细胞毒性、刺激性、致热原、体外溶血、过敏、肌肉内埋植等生物相容性试验,以及致畸胎、Ames试验。结果证明该材料无明显毒性作用。

十五种国产抗生育药物的Ames试验

我们对15种国产常用或新合成的抗生育药物炔雌醇、已酸孕酮、炔雌醚、戊酸雌二醇、炔诺酮、复方炔诺酮片、甲地孕酮、复方甲地孕酮片、复方甲地孕酮避孕针、复方炔雌醚、18-甲基炔诺酮肟、AF-53、SIPPR-113、米非司酮、复方已酸孕酮注射液。进行了Ames试验。选用TA97、TA98、TA100、

不同地区东方田鼠染色体数及带型比较

目的 比较不同地区东方田鼠的染色体及核型。方法 对不同地区东方田鼠的染色体片用姬姆萨染色法进行分析。结果 湖南洞庭湖田鼠的核型为 2n =5 2 =14 (m .sm) +36 (st.t) +xy(m .t) ;宁夏地区田鼠核型为2n =5 2 =16 (m .sm) +34(st.t) +xy(m .t) ;东北田鼠染色体核型为 2n =4 2 =18(m .sm) +2 2 (st.t) +xy(t.t)。结论 东北田鼠染色体数目不同于湖南和宁夏两地 。

胆宁片对大鼠的毒性试验结果

为评价胆宁片的安全性，应用大鼠进行了３个月毒性试验、致畸胎试验及微生物回复突变试验。在所用剂量（２．０ｇ／ｋｇ体重）下，均未发现毒性反应，表明胆宁片是较为安全的。

棉顶狨某些血液生化指标的测定

为配合本中心。甲肝模型动物一狨猴的繁殖研究》的需要,进行了某些血液、生化指标的测定。材料和方法 1.动物:棉顶狨(Saguinus oedipus)10只。雄、雌性各 5只。年龄 2～7岁,体重432～687g。 2.实验方法:

湖南等三地区东方田鼠遗传特性的分析比较

用染色体G带核型分析、生化位点、随机扩增多态性DNA (RAPD)标记等方法 ,对湖南洞庭湖湖滨、宁夏青铜峡市农田和黑龙江伊春市金山屯草甸 3个地区的东方田鼠遗传特性进行了分析。结果表明 ,湖南和宁夏地区东方田鼠染色体数均为 2N =5 2 ,黑龙江东方田鼠染色体数则为 2N =42 ;生化位点结果显示 3个地区的东方田鼠均呈遗传非均一性 ;湖南、宁夏和黑龙江鼠的个体间RAPD遗传距离分别为 0 2 44 (0 143～ 0 3 5 3 )、 0 2 2 6(0 161～ 0 2 94)、 0 5 41(0 3 5 7～ 0 692 )。湖南和宁夏两地区鼠种群间的遗传距离为 0 3 67,湖南和宁夏鼠杂交一代与其亲代的RAPD遗传距离在 0 3 10以下 ;但黑龙江鼠与湖南和宁夏鼠种群间的遗传距离分别为 0 619和0 63 3。总的表明 ,3个地区的东方田鼠均呈遗传非均一性 ,但湖南与宁夏鼠在染色体、生化位点和RAPD标记等方面都具有相似性 ,并可杂交 ,而黑龙江鼠与其它两地的鼠不能杂交 ,且黑龙江鼠在遗传特性方面与前二地鼠有很大差异 ,因而后者的“种”

东方田鼠乳酸脱氢酶同工酶的研究

目的 研究乳酸脱氢同工酶在 3种东方田鼠不同器官的分布。方法 以大鼠和小鼠作对照 ,用聚丙烯酰胺凝胶电泳对 3个不同地区的东方田鼠 (Microtusfortis)血清、红细胞、肝脏、肾脏、肺中乳酸脱氢酶 (LDH)同工酶进行分析。结果 东方田鼠血浆中只有LDH5,血清中湖南洞庭湖地区、宁夏青铜峡地区的东方田鼠也只有LDH5,而东北地区的东方田鼠则含有LDH1 和LDH5,3个地区的东方田鼠肾脏和肺中都有 5种LDH同工酶 ,肝脏中除东北地区的东方田鼠含 5种LDH同工酶外 ,其余两种东方田鼠均以LDH5为主 (LDH5占 95 %以上 )。

接种溶脲脲原体对雄大鼠生育力的影响及其治疗

为观察溶脲脲原体对雄大鼠生育力的影响，在雄性ＳＤ大鼠（ｎ＝３０）膀胱内接种溶脲脲原体悬液（１０５ＣＣＵ）后再与雌鼠交配，结果，雌鼠的妊娠率显著低于对照雌鼠。另取２０只接种溶脲脲原体的雄大鼠，接种后３个月随机均分为２组，治疗组每日灌服美满霉素２０ｍｇ／ｋｇ，连给１４ｄ，对照组同法给生理盐水。停药后８周，与治疗组交配的雌鼠妊娠率极显著高于与对照组交配的雌鼠。结果提示：给大鼠人工接种溶脲脲原体可复制溶脲脲原体引起男性不育的模型。

荧光原位杂交(FISH)技术在转基因小鼠检测中的应用

制备转基因小鼠特有的 DIG标记探针 ,应用染色体荧光原位杂交 (FISH)技术 ,对转基因小鼠外周血细胞的遗传性状进行分析 ,检测其合子类型 ,以挑选纯合子小鼠用于保种。结果杂合型小鼠 61 %的细胞有一个荧光信号 ,而纯合型小鼠约2 4%的细胞有两个荧光信号 ,48%的细胞有一个荧光信号 ,野生型小鼠无荧光信号。

RT-PCR方法在小鼠肝炎病毒检测中的初步应用

采用4株小鼠肝炎病毒,MHV1、MHV3、A59和JHM的混合液人工感染SCID小鼠,接种病毒后1、2、5d分别取小鼠的全血、肝、肺、脑、脾和血清,用组织总RNA抽提试剂盒提取各组织的总RNA,然后用RTPCR方法检测小鼠肝炎病毒,并对各反应产物进行平均光密度测定。结果显示,接种后24h即可检测出血液中的小鼠肝炎病毒,病毒在小鼠体内各脏器出现的先后顺序为血、肝、脾、肺、脑,主要在肝脏进行复制。

非人灵长类隐孢球虫病的临床和寄生虫学观察

隐孢球虫属原虫类可使牛、绵羊、山羊及人类等发生肠炎。在非人类种属中,这种情况常出现在年幼动物身上,而人类常发生于免疫受抑制或与感染动物接触的人。家畜群感染时,常在年幼动物出现急性流行性腹泻。非人灵长类隐孢球虫病病例曾有过报道,主要是恒河猴(猕猴),其中包括仔猴(8例),青年猴(7例)及1例呈现猿猴获得性免疫缺陷综合征的病猴。大多数受感染的猴类都表现结肠炎或小肠结肠炎的症状。

砷对大鼠的致畸作用

目的进一步阐明砷对母体、胎儿、胚胎细胞的影响和验证体外致畸作用。方法用大鼠体内致畸法并结合扫描电镜、组织化学等技术深入探讨了砷的发育毒性和机制。结果Ａｓ２Ｏ３的各剂量组（０，１，４和１０ｍｇ／ｋｇ）均未见母鼠有明显的中毒症状和死亡；胎鼠死亡率分别为１０．２％，１７．４％，２４．８％和６１．１％；骨骼畸形率为１．８９％，３．１２％，１７．２８％和７８．５７％；染毒４８小时后的胚胎畸形率分别为３．１６％，５．３２％，１３．７９％和４０．４８％；扫描电镜观察可见多部位的胚胎表皮细胞受损，细胞表面和细胞连接处出现大小不一的空洞；胚胎畸形表现是神经管未闭、体位异常、肢芽小等；诱生型一氧化氮合成酶组化检查率先证明一氧化氮与胚胎发育异常关系密切，呈明显剂量－反应关系；活体染色表明砷能诱发肢芽细胞过度凋亡；从多角度分析了砷的致畸机理。结论大鼠体内试验证实，砷在胚胎生长发育过程中有致畸作用。

甲基汞对大鼠胚胎细胞毒性和相关基因表达的影响

目的从细胞和基因水平揭示甲基汞的发育毒性作用机理。方法应用体外／体内大鼠模型、原位杂交等方法观察甲基汞（体外染毒剂量依次为０、０．０５、０．１０、０．２０、０．４０、０．８０和１．６０ｍｇ／Ｌ；体内染毒剂量依次为０、０．２、０．４、０．８、１．６和３．２ｍｇ／ｋｇ）对９．５天龄大鼠胚胎细胞行为和基因表达的影响。结果甲基汞能通过卵黄囊胎盘，但高浓度可抑制胎盘发育和血管分化；甲基汞对胚胎的发育毒性与其浓度间存在剂量反应关系，胚胎畸形的主要表现是神经管未闭和体位异常。甲基汞能激发胚胎细胞过度凋亡，明显抑制细胞ＤＮＡ和ＲＮＡ的合成，损害胚胎细胞超微结构。甲基汞能诱发热休克蛋白７０基因大量表达，抑制纤维连接蛋白基因和ｐ１６基因的表达；热休克蛋白７０基因、Ｃａ２＋、细胞凋亡与畸形的发生之间具有相关性。结论胚胎细胞行为和相关基因表达异常在甲基汞的发育毒性作用机理中起重要作用。