实时荧光定量PCR和甲基化特异性PCR检测结直肠癌APC、MLH1基因甲基化状态

背景:启动子区甲基化致肿瘤抑制基因失活在结直肠癌的发生、发展中起重要作用,检测肿瘤相关基因的甲基化状态,可能为寻找新的结直肠癌诊断、预后相关标记物提供依据。目的:比较实时荧光定量PCR(FQ-PCR)与甲基化特异性PCR(MSP)检测基因甲基化状态的差异。方法:以FQ-PCR检测66例结直肠癌组织和20例癌旁组织中与结直肠癌的发生、发展相关的抑癌基因APC和错配修复基因MLH1的甲基化状态,同时以MSP检测结直肠癌组织中APC基因的甲基化状态。结果:根据FQ-PCR结果,结直肠癌组织中APC、MLH1基因甲基化阳性率显著高于癌旁组织(48.5%和54.5%对0%和0%,P=0.000)。FQ-PCR和MSP可检出的甲基化阳性对照DNA最低浓度分别为0.015 ng/μl和1.5 ng/μl,两者对APC基因甲基化状态的检测结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在DNA甲基化的检测手段中,FQ-PCR的敏感度优于MSP。

氟哌噻吨美利曲辛与埃索美拉唑联合治疗慢性萎缩性胃窦胃炎的临床分析

目的研究氟哌噻吨美利曲辛与埃索美拉唑联合治疗慢性萎缩性胃窦胃炎（CAG）。方法 2011年1月至2013年8月期间收集本院CAG 108例,随机分为观察组与对照组2组,观察组予氟哌噻吨美利曲辛与埃索美拉唑联合治疗,对照组予埃索美拉唑治疗,比较2组的治疗效果与不良反应。采用组间t检验,计数资料采用组间χ2检验。结果 2组治疗前腹痛、饱胀、嗳气3种症状积分分别相比较,差异无统计学意义。治疗后3种症状积分分别相比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）。观察组治疗有效率为96.4%（53/55）,对照组治疗有效率为83.0%（44/53）,两者相比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。2组治疗前进行焦虑抑郁评价,差异无统计学意义。治疗后再次进行焦虑抑郁评价,差异具有统计学意义（P〈0.05）。内镜病理评价方面,2组治疗前炎症程度评分、萎缩程度评分分别相比较,差异无统计学意义。治疗后2组患者与治疗前相比,炎症程度、萎缩程度评分差异均无统计学意义;治疗后观察组与对照组患者相比,观察组患者治疗后的炎症程度及萎缩程度评分较治疗前均无明显降低。2组患者均进行了至少6个月的随访,无1例患者失访,随访期限6~18个月。观察组患者复发率为9.1%（5/55）,对照组复发率为20.8%（11/53）,两者相比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）。复发的时间观察组与对照组比较,差异无统计学意义。结论 CAG患者存在的生活质量下降和精神心理异常进行氟哌噻吨美利曲辛联合治疗能够从精神心理因素进行干预,提高治疗效果,降低复发,有助于指导临床医师对CAG患者进行针对性的干预,值得进一步深入研究。

运脾柔肝方对便秘型肠易激综合征大鼠脑肠轴的影响探讨

研究运脾柔肝方对便秘型肠易激综合征(IBS-C)大鼠脑肠轴的影响。方法 采用冰水刺激法建立IBS-C模型,造模成功后,将大鼠随机分为IBS-C模型组、运脾柔肝方高、中、低剂量组(48.8g、24.4g、12.2g /kg·d)、莫沙必利组(1.35mg/ kg·d)。通过碳墨推进试验评估肠道蠕动状况,并采取酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化法 (IHC)测定结肠、脑组织、脊髓背角中脑肠肽因子SP、VIP、5-HT表达水平。结果 与空白组比较,IBS-C模型组大鼠进食量减少、粪便颗粒数和含水量明显降低(P<0.01),碳墨推进率明显降低(P<0.05),结肠、脑组织、脊髓背角中SP含量减低,VIP、5-HT含量增加。与IBS-C模型组比较,运脾柔肝方干预后,大鼠进食量增加、活跃度增加、毛发有光泽、粪便颗粒数和含水量明显增加(P<0.05,P<0.01),碳墨推进率明显升高(P<0.01),大鼠结肠、脑组织、脊髓背角中SP含量增加,VIP、5-HT含量降低。结论 运脾柔肝方可能通过改善大鼠脑肠肽因子的表达水平从而改善大鼠肠道推进率和粪便性状。

基于网络药理学和分子对接技术探讨经方黄芩汤治疗溃疡性结肠炎机制研究

目的基于网络药理学方法,探讨中医经典名方黄芩汤治疗溃疡性结肠炎的潜在分子作用机制,为其临床运用及研发提供一定的参考。方法基于TCMSP数据库检索获取黄芩汤的有效活性成分及其潜在的作用靶点,通过GeneCard、OMIM数据库检索溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)疾病相关靶点,将两者取交集获得黄芩汤治疗UC的潜在靶点93个,继而将获得的有效活性成分及潜在作用靶点导入Cytoscape软件,绘制“黄芩汤-活性化合物-UC作用靶点”的网络图,筛选关键活性成分;并将潜在靶点导入STRING数据库,构建PPI网络,筛选黄芩汤治疗UC的核心靶点;同时利用Metascape平台对核心靶点进行GO生物学过程富集分析和KEGG通路注释分析。结果黄芩汤治疗UC的主要活性成分为槲皮素(quercetin)、山柰酚(kaempferol)、汉黄芩素(wogonin)、黄芩素(baicalein)、β-胡萝卜素(β-carotene)等;可作用于AKT1、JUN、IL-6、VEGFA、STAT3、CASP3、EGFR等关键靶点,激活或抑制PI3K/Akt、MAPK、endocrine resistance、Th17 cell differentiation、NF-κB、AGE-RAGE、JAK-STATs等相关通路,涉及内毒素反应、调节小分子代谢、调节活性氧代谢、调控凋亡信号通路、负调控细胞增殖等生物过程。同时,通过Swissdock平台分子对接验证表明:黄芩汤的关键活性成分kaempferol、quercetin、wogonin与核心作用靶点AKT1结合能均小于-5.0 kJ/mol。结论研究初步揭示了黄芩汤治疗UC的多成分、多靶点、多通路的作用机制,为经方黄芩汤的临床开发以及应用提供科学依据。

伴焦虑抑郁的腹泻型肠易激综合征的中医药治疗进展

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是消化系统常见疾病之一,反复发作严重影响了患者的生活质量,造成其沉重的经济负担,从而产生焦虑、抑郁等负面情绪,与疾病本身相互作用,恶性循环。近年来,中医药干预治疗伴有焦虑抑郁的IBS-D取得了一定的进展,而IBS-D作为一种社会-心理关系密切的身心疾病,焦虑抑郁等不良情绪可参与IBS-D的发病,IBS-D的胃肠道症状也可刺激中枢神经系统,从而产生情绪的异常,但目前IBS-D与情绪相关的机制仍需进一步的研究证实。中医通过辨证施治、专方治疗及外治法取得较好的临床疗效,可有效缓解患者的临床症状,且具有复发率低,不良反应少等优势,但目前本病的发病机制尚未明确,辨证分型标准尚未统一,存在临床研究的样本量较小,疗效评价患者主观性影响较大等局限性,在今后的研究中需进一步完善。通过对近年的文献学习,对中医药干预的伴焦虑抑郁的腹泻型肠易激综合征患者的诊疗现状进行探讨。

伴有焦虑抑郁状态的功能性便秘中医药治疗进展

功能性便秘(FC)是一种功能性胃肠病,近年来研究发现FC发病率越来越高,且多伴有焦虑抑郁的心理障碍。本文简述了西医对伴有焦虑抑郁状态的FC的发病机制的研究进展,可能与结肠内5-羟色胺(5-HT)水平、肠道菌群变化及短链脂肪酸和胆汁酸含量改变相关,但目前西医多采用泻剂联合抗焦虑抑郁药物治疗,无较好的治疗手段,存在停药易反复的缺点。同时,本文从中医角度详述了七种不同证型便秘的病因病机、辨证论治及中医外治法的研究进展,为临床上治疗伴有焦虑抑郁状态的FC总结研究思路和方法。

幽门螺旋杆菌感染与大肠息肉的相关性

目的:探讨幽门螺旋杆菌感染与大肠息肉发生的相关性。方法:选择南京中医药大学附属中西医结合医院消化科2017年1月至2018年12月期间同时进行电子肠镜及幽门螺旋杆菌检查的住院患者共341例,分为肠息肉组及对照组,比较两组一般资料、幽门螺旋杆菌感染率及大肠息肉的个数、位置、大小、性质等。结果:肠息肉组幽门螺旋杆菌感染阳性率为59.1%,对照组幽门螺旋杆菌感染阳性率22.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。肠息肉组中,大肠单发息肉患者幽门螺旋杆菌感染阳性率51.4%,多发息肉幽门螺旋杆菌感染阳性率69.8%,差异具有统计学意义(P<0.05)。幽门螺旋杆菌感染与患者年龄、性别及大肠息肉的位置、大小、性质无明显相关性(P>0.05)。结论:幽门螺旋杆菌感染可增加大肠息肉尤其是多发性大肠息肉的发病风险。

儿童误服复方苯乙哌啶中毒7例

目的分析总结复方苯乙哌啶的中毒原因、临床表现、实验室检查结果、救治要点,以汲取经验教训。方法采用回顾性调查方法,分析2012年8月至2015年8月共7例误服复方苯乙哌啶导致中毒的儿童的临床治疗。结果经综合治疗,7例患儿中,6例救治成功,自动出院1例,痊愈5例,好转1例,治愈率71.43%。出院1个月后随访的6例患儿,未见症状反复。结论过量服用复方苯乙哌啶可造成中毒,大剂量时可产生严重并发症,危及生命。一旦发现,及时就治,采取综合性治疗方法,一般预后良好。同时指导家长加强对儿童的管理及监护。

埃索美拉唑联合铝碳酸镁及莫沙必利治疗原发性胆汁反流性胃炎临床观察

目的探讨埃索美拉唑联合铝碳酸镁、莫沙必利治疗原发性胆汁反流性胃炎(PBRG)的临床疗效。方法选取医院消化内科门诊2016年1月至2018年1月收治的PBRG患者80例,随机分为对照组和观察组,各40例。对照组患者给予口服铝碳酸镁咀嚼片,每次2片,3次/天;莫沙必利5 mg,3次/天。观察组加用埃索美拉唑片40 mg,1次/天。治疗期间禁用其他胃炎相关药物。两组治疗时限均为4周。结果两组患者上腹痛、腹胀症状评分均低于本组治疗前,且治疗后观察组显著低于对照组(P<0.05);与对照组比较,观察组患者组患者的临床疗效和胃镜下疗效均显著升高(82.5%比95.0%,77.5%比92.5%,P<0.05)。结论埃索美拉唑联合铝碳酸镁和莫沙必利可明显减少PBRG患者胆汁反流,改善原发性胆汁性胃炎症状,促进胃黏膜修复。

熄风化湿方对腹泻型肠易激综合征大鼠内脏高敏感性的影响

目的探讨熄风化湿方(XFHS)对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠内脏高敏感性及SCF-Kit系统的影响。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组,模型组,XFHS低、中、高剂量组。采用"母婴分离+乙酸灌肠"法建立IBS-D大鼠模型,XFHS低、中、高剂量组分别给予低、中、高剂量(10.9、21.8、43.6 g/kg)的XFHS方灌胃,正常对照组和模型组给予等容积的蒸馏水灌胃,测定腹壁撤退反射评分(AWR),用Western blot和qPCR法测定结肠组织SCF、c-Kit蛋白和mRNA含量。结果模型组大鼠AWR评分,SCF、c-Kit蛋白和mRNA含量均显著高于正常对照组(P<0.05)。而XFHS组大鼠AWR评分、SCF、c-Kit蛋白和mRNA含量均低于模型组(P<0.05)。结论 XFHS方可改善IBS-D大鼠的内脏高敏感性,可能与降低SCF-Kit系统的过度表达有关。

结直肠息肉与血脂水平的相关性研究

目的探讨结直肠息肉与血脂水平的相关性。方法选取2018年1月1日-2018年12月31日在本院行结肠镜检查和血脂水平检查的170例患者,根据患者是否患有结直肠息肉分为对照组(104例)和息肉组(66例),对比两组血脂指标平均值,同时分别对比息肉组不同病理类型患者血脂水平。结果息肉组TG、TC和LDL-C指标水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。息肉组腺瘤性息肉患者TG、TC、LDL-C、HDL-C指标水平与炎性息肉和增生性息肉者存在一定差异,但是差异均不显著,无统计学意义(P>0.05)。结论结直肠息肉患者多伴有明显的血脂指标改变,可作为结直肠息肉疾病早期诊断与筛查的重要参考依据。

运脾柔肝方治疗肝郁气滞型便秘型肠易激综合征的效果观察

目的:观察运脾柔肝方治疗肝郁气滞型便秘型肠易激综合征(IBS-C)的临床效果。方法:选取2021年1月—12月南京中医药大学附属中西医结合医院消化科门诊收治的31例IBS-C患者,随机分成治疗组(n=15)与对照组(n=16)。治疗组患者给予运脾柔肝方中药汤剂口服治疗,对照组患者给予乳果糖口服治疗,疗程均为4周。比较两组患者治疗前后的临床疗效、症状体征积分、Zung焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)、IBS生活质量量表(IBS-QQL)、匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)和IBS症状严重程度量表(IBS-SSS)评分。结果:治疗组总有效率(93.33%)高于对照组总有效率(87.50%),但差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组症状体征积分、IBS-QQL和IBS-SSS评分均有效改善,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗组的SAS、SDS评分较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,对照组SAS、SDS和两组的PSQI评分与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,治疗组的症状体征积分、SAS、SDS和PSQI评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:运脾柔肝方可以有效缓解IBS-C患者的腹痛、腹胀、排便困难等临床症状,显著改善患者的焦虑和抑郁情绪,明显提高患者睡眠质量及生活质量。

氟哌噻吨美利曲辛联合埃索美拉唑治疗非糜烂性胃食管反流病的临床观察

目的:观察氟哌噻吨美利曲辛联合埃索美拉唑治疗非糜烂性胃食管反流病(NERD)的临床效果。方法:将2009年1月-2011年6月某院非糜烂性胃食管反流病患者84例,随机均分为观察组与对照组:观察组给予氟哌噻吨美利曲辛联合埃索美拉唑治疗,对照组给予埃索美拉唑治疗,治疗后比较两组的治疗效果与不良反应。结果:治疗后,两组烧心、胸痛、反酸症状积分比较,差异均有统计学意义(P<0.05),观察组优于对照组。观察组有效率为90.5%(38/42),对照组为54.8%(23/42),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者不良反应发生率为2.4%(1/42),对照组为11.9%(5/42),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者均进行了6～18个月随访,观察组患者复发率为9.5%(4/42),对照组为31.0%(13/42),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:氟哌噻吨美利曲辛联合埃索美拉唑治疗NERD能够从精神、心理因素上对患者生活质量和精神心理异常进行干预,提高治疗效果,降低复发率。

儿童幽门螺杆菌感染的临床药物治疗及疗效分析

儿童作为一个特殊的群体,由于其生理及心理尚未发育成熟,对外来致病因素的防御能力及防御意识不够,成为肠道疾病的易感群体。儿童消化道疾病与幽门螺杆菌（Hp）感染有关,并且其感染率有随着年龄增加的趋势。本研究对我院Hp感染的患儿所采用的两种不同治疗方案进行疗效分析,现报道如下。

Snai1 miRNA干扰质粒构建及胃癌细胞系稳定株筛选

目的:设计并构建针对Snai1的微小干扰核糖核酸(miRNA),最终鉴定出有效干扰质粒并筛选稳定转染的胃癌细胞株SGC-7901。方法:设计并构建4对Snai1的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR microRNA及1对无效对照microRNA干扰质粒。将干扰质粒用罗氏BD转染试剂转染胃癌细胞株SGC-7901,通过倒置荧光显微镜观察绿色荧光确定转染效率。分别用不同浓度l的杀稻瘟菌素作用于SGC-7901细胞,得到杀稻瘟菌素对SGC-7901细胞的筛选浓度。Westernblot检测4对干扰质粒、阴性对照质粒对snai1蛋白水平表达的影响。结果:测序表明,Snai1干扰序列及读码框完全正确,干扰质粒瞬时转染的SGC-7901细胞系在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光达85%以上。杀稻瘟菌素对于SGC-7901细胞的筛选浓度为5μg/ml。Westernblot结果显示,干扰序列Mi-1对Snai1有较强的干扰效果。结论:成功构建了Snai1干扰真核表达载体,同时筛选出有效干扰质粒及稳定转染株,为进一步研究Snai1在胃癌中的作用奠定了基础。