结石CT值、中性粒细胞与淋巴细胞比率预测上尿路结石术后尿源性脓毒血症发生、发展的临床价值研究

目的探讨结石CT值、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)预测上尿路结石患者术后尿源性脓毒血症(US)发生、发展的临床价值。方法回顾性选取2020年3月至2022年3月在海南西部中心医院行上尿路结石术术后发生US未发生感染性休克的35例患者作为观察A组,上尿路结石术后US并发感染性休克的35例患者作为观察B组,同时选取同期未发生感染的上尿路结石患者70例作为对照组。比较3组患者的一般资料及结石CT值,NLR;采用多因素Logistic回归模型分析US及感染性休克发生的相关因素;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析结石CT值、NLR与US发生、发展的关系及预测价值。结果3组患者的结石大小、结石形态、合并糖尿病、结石CT值、NLR比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。经多因素Logistic回归模型分析,控制结石形态、合并糖尿病后,结石大小、结石CT值、NLR仍与US发生有关(P<0.05);控制结石大小后,结石CT值、NLR仍与US并发感染性休克有关(P<0.05);结石CT值、NLR联合预测US发生的ROC曲线下面积大于单一指标预测(P<0.05)。结论结石CT值、NLR与上尿路结石术后US发生、发展有关,二者联合检测可为临床预测完善相关预警机制提供参考。

结石大小及形态、穿刺通道、尿培养结果与经皮肾镜取石术患者并发尿源性脓毒血症的关系探究

目的 探讨结石大小及形态、穿刺通道、尿培养结果与经皮肾镜取石术(PCNL)患者并发尿源性脓毒血症的关系。方法 回顾性选取2019年4月至2022年2月海南西部中心医院接受PCNL的患者168例,其中并发尿源性脓毒血症的22例患者作为研究组,未并发尿源性脓毒血症的146例患者作为对照组。比较两组患者的一般资料,Logistic回归模型分析并发尿源性脓毒血症的危险因素,分析结石大小及形态、穿刺通道、尿培养结果联合预测并发尿源性脓毒血症的价值。结果 两组患者的性别构成比、年龄、体重指数、职业、合并高血压占比、合并脑血管疾病占比、结石部位、术中失血量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);研究组合并高血糖占比、结石大小>3 cm占比、结石形态为鹿角形或铸形的占比、穿刺通道为标准通道的占比、术前尿培养结果阳性占比、术前血清C反应蛋白水平、术前尿白细胞计数均高于对照组,手术时间长于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归模型校正手术时间后,结石大小、结石形态、穿刺通道大小、术前尿培养结果仍与并发尿源性脓毒血症相关(P<0.05)。结石大小及形态、穿刺通道、尿培养结果联合预测PCNL并发尿源性脓毒血症的特异度、准确度高于结石大小、结石形态、穿刺通道、尿培养单独预测,误诊率低于结石大小、结石形态、穿刺通道、尿培养单独预测(P<0.05)。结论 结石大小及形态、穿刺通道、尿培养结果是PCNL患者并发尿源性脓毒血症的主要相关因素,上述指标联合可为临床评估并发尿源性脓毒血症风险提供参考。

膀胱癌来源的外泌体通过促进髓系抑制性细胞的扩增介导毒性T细胞的免疫抑制

目的:探究膀胱癌细胞系MB49来源的外泌体(MB49-Exo)对髓系来源的抑制性细胞(MDSCs)的影响及后者对MB49抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫功能的调控。方法:试剂盒分离MB49-Exo,并应用透射电子显微镜(TEM)观察外泌体形态,纳米粒径颗粒跟踪分析仪(NTA)和Western blot进行鉴定;构建Balb/c小鼠MB49-Exo荷瘤模型,设置PBS作为阴性对照,MB49荷瘤小鼠为阳性对照,使用流式细胞术检测小鼠骨髓与脾脏中MDSCs的表达及分型和脾脏中CD8^(+)T淋巴细胞数量;分离培养小鼠原代骨髓细胞,流式细胞术检测PBS与MB49-Exo对其向MDSCs分化的影响,并将两组不同处理的MDSCs记为PBS-MDSCs组与MB49-Exo-MDSCs组;使用MB49特异性抗原诱导小鼠成熟树突状细胞(DCs),并利用其制备膀胱癌抗原特异性CTL,再使用PBS-MDSCs与MB49-Exo-MDSCs组的MDSCs进行刺激,ELISA检测不同处理条件下CTL对白介素-1(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平,羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂染色结合流式细胞术检测CTL的增殖水平,乳酸脱氢酶法检测CTL对MB49的杀伤活性,最后通过Western blot检测两组MDSCs中信号转导因子和转录激活因子3(STAT3)的磷酸化水平(p-STAT3/STAT3)。结果:成功分离获得MB49-Exo;与对照组相比,MB49-Exo不仅能够明显促进荷瘤小鼠骨髓与脾脏中以粒细胞型MDSCs类型为主MDSCs的形成(P<0.001),还能显著减少脾脏中CD8^(+)T淋巴细胞数量(P<0.001);在体外研究中,较PBS-MDSCs组比较,MB49-Exo-MDSCs组中MDSCs的扩增水平明显升高(P<0.001),且其处理的CTL对IL-2和IFN-γ的分泌水平,细胞增殖能力和对MB49的杀伤活性均明显降低(P<0.001);但MB49-Exo-MDSCs组中STAT3的磷酸化水平较PBS-MDSCs组明显升高(P<0.001)。结论:本研究发现来源于膀胱癌细胞的外泌体能通过促进MDSCs的形成来抑制肿瘤特异性CTL的免疫功能,从而协助肿瘤的免疫逃逸,而外泌体的上述作用可能通过促进MDSCs中激活STAT3信号通路发挥作用。

膀胱癌组织中TIPE通过调节VEGFR2表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和血管生成

目的:探究膀胱癌组织中TIPE通过调节血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和血管生成的机制。方法:收集膀胱癌组织及其对应的癌旁组织各34例,以人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1、人膀胱癌细胞株UMUC3和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为体外研究对象,免疫组织化学(IHC)检测组织中TIPE表达;RT-PCR检测细胞中TIPE mRNA表达;Western blot检测组织和细胞中TIPE、PDK1、p-PDK1和VEGFR2蛋白表达;CCK-8检测UMUC3细胞增殖能力;Transwell实验检测UMUC3细胞迁移能力;血管形成实验检测HUVECs血管形成能力。结果:与癌旁组织相比,膀胱癌组织中TIPE IHC评分和蛋白表达明显上调(P<0.05)。与SV-HUC-1组相比,UMUC3组中TIPE mRNA和蛋白表达水平明显上调(P<0.05)。与siRNA-NC组相比,siRNA-TIPE组UMUC3细胞增殖、迁移能力、HUVECs的管道交叉数明显降低(P<0.05),TIPE、p-PDK1和VEGFR2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。PDK1抑制剂GSK2334470(简称GSK)的使用浓度为4μmol/L。与Vector组相比,TIPE组UMUC3细胞TIPE、p-PDK1和VEGFR2蛋白表达水平及细胞增殖、迁移能力和HUVECs的管道交叉数明显升高(P<0.05),Vector+GSK组UMUC3细胞p-PDK1和VEGFR2蛋白表达水平及细胞增殖、迁移能力和HUVECs的管道交叉数明显降低(P<0.05),GSK可逆转TIPE对UMUC3和HUVECs细胞的作用。结论:TIPE通过磷酸化PDK1上调VEGFR2表达促进膀胱癌细胞增殖、迁移和血管生成。