红掌工厂化育苗关键技术研究(英文)

[目的]研究红掌工厂化育苗的关键技术。[方法]以红掌盆花和切花品种的叶片、叶柄、花苞片和花苞柱头为外植体,进行组培快速繁殖技术研究,探讨外植体的选择和消毒条件以及不同培养基对红掌愈伤组织的诱导、增殖和生根影响。[结果]叶柄为最佳外植体,愈伤诱导率最高,达78.3%;外植体采用0.1%HgCl2消毒8min的效果最好;粉冠军和MIDORI的最佳愈伤组织诱导培养基为1/2MS+6-BA1.50mg/L+KT1.00mg/L+2,4-D0.10mg/L;最佳愈伤组织继代培养基为MS+6-BA0.50mg/L+KT0.50mg/L+NAA0.10mg/L,添加10%的椰子汁或香蕉浆有利于增殖和丛芽生长,增殖率最高达2.83倍;最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.10mg/L+IAA0.10mg/L,生根率达100%。[结论]该结果为红掌工厂化育苗体系的建立奠定了基础,对确保红掌产业的发展具有重要意义。

天牛染色体核型研究及其核型快速检测在检疫中的应用(英文)

本文研究了天牛科3亚科9族20种的染色体核型。在所研究的20种天牛核型中,染色体以10对为主,其性染色体决定机制以Xyp为主。这种性别决定机制被认为是最原始的形式。Xyp,是大X染色体和小y染色体形成的降落伞状(parachute-like)的二价体。在细胞减数分裂中,雄性细胞呈现单倍体数目。研究发现,20种染色体中1/2种类其雄性单倍体数目为10,并且由Xyp型性染色体的性别决定机制。生物活细胞在24 h内均能制作成核型玻片。由于不同生物种类间的核型差异显著,本文对应用核型检测方法检测和鉴定有害生物的可行性进行探讨。

文心兰切花采后冷藏保鲜技术研究

以文心兰切花品种‘黄金3代’(Oncidium Gower Ramsey‘Gold 3’)鲜切花为研究材料,分析了其分别经7、9、11、13、15和17℃冷藏处理7 d后的鲜切花花苞冻伤率、花苞开放率、花朵老化率及瓶插寿命的影响,以期筛选出文心兰鲜切花最佳冷藏温度。在此基础上,探讨了文心兰鲜切花经最佳冷藏温度处理后的水分平衡值、可溶性总糖含量和MDA含量等一系列生理性状与瓶插寿命的关系。结果表明:11℃为文心兰鲜切花的最佳冷藏温度,经此温度处理7 d的冷藏期,花苞无冻害,花朵的老化率较低;而瓶插期的花苞开放率平均为30.92%;与常温对照相比,鲜切花的水分平衡值和可溶性总糖含量的下降相对缓慢,MDA含量的上升较慢,瓶插寿命延长6 d左右。文心兰鲜切花瓶插寿命与其水分平衡值、可溶性总糖含量和MDA含量密切相关。

红掌切花采后冷藏保鲜技术研究

以红掌品种"热情"(Tropical)为材料,研究采后鲜切花在7、9、11、13、15、17和19℃不同温度下冷藏处理7 d后对其瓶插寿命的影响。结果表明,在11℃以下冷藏处理7 d后其切花出现冻害症状;17℃为红掌鲜切花的最佳冷藏温度,经此温度冷藏处理的鲜切花瓶插寿命达15.1 d,比对照平均延长3.1 d。同时,测定了17℃冷藏处理后的红掌鲜切花的失水量、吸水量、水分平衡值、可溶性总糖含量和丙二醛(MDA)含量变化,分析其与红掌鲜切花寿命和品质的关系。研究结果可为建立红掌鲜切花采后冷藏配套技术提供科学依据。

红掌组培苗遗传变异的RAPD检测技术研究

为了对红掌的遗传变异做出检测,从红掌品种粉冠军继代6代后的组培苗中随机选取100株样品进行RAPD分析,从50条随机引物中挑选出7条稳定性较好的引物,共扩增出48条带,其中1株样品带型发生变化,红掌组培苗的样品变异率为1%。研究结果为红掌工厂化育苗提供了快速、经济和准确的遗传变异检测技术。

红掌工厂化育苗关键技术研究

[目的]研究红掌工厂化育苗的关键技术。[方法]以红掌盆花和切花品种的叶片、叶柄、花苞片和花苞柱头为外植体,进行组培养快速繁殖技术研究,探讨外植体的选择和消毒条件以及不同培养基对红掌愈伤组织的诱导、增殖和生根影响。[结果]叶柄为最佳外植体,愈伤诱导率最高,达78.3%;外植体采用0.1%HgCl2消毒8 min的效果最好;粉冠军和MIDORI的最佳愈伤组织诱导培养基分别为1/2MS+6-BA1.50 mg/L+2,4-D0.50 mg/L+NAA0.10 mg/L和1/2 MS+6-BA1.50 mg/L+KT1.00 mg/L+2,4-D0.10 mg/L;最佳愈伤组织继代培养基分别为MS+6-BA1.00 mg/L+NAA0.50 mg/L+2,4-D0.30 mg/L和MS+6-BA0.50 mg/L+KT0.50 mg/L+NAA0.10 mg/L,添加10%的椰子汁或香蕉浆有利于增殖和丛芽生长,增殖率最高达2.83倍;最佳生根培养基为1/2 MS+NAA0.10 mg/L+IAA0.10 mg/L,生根率达100%。[结论]该结果为红掌工厂化育苗体系的建立奠定了基础,对确保红掌产业的发展具有重要意义。

文心兰鲜切花最佳采收成熟度及其生理生化变化

以文心兰切花品种"黄金3代"(Oncidium Gower Ramse‘yGold 3’)为试验材料,研究和比较不同等级(A～D级)、不同采收成熟度(5～8分熟)的文心兰鲜切花瓶插寿命,以及去除花苞或花朵后的切花瓶插寿命影响。结果表明,在25℃和70%～80%相对湿度条件下用清水瓶插,文心兰鲜切花最佳采收成熟度为6分熟(A级)、7分熟(B级)和8分熟(C和D级)。文心兰鲜切花全部去除花朵后,与对照相比其花苞开放率略高,瓶插寿命延长2.3 d;而全部去除花苞后,其瓶插寿命比对照延长0.6 d,表明花苞与花朵之间存在营养竞争关系。同时,测定和分析了最佳采收成熟度的文心兰鲜切花在瓶插保鲜液条件下的生理生化性状变化。研究结果可为确定文心兰切花生产的最佳采收时间提供科学依据。

氨氯地平阿托伐他汀钙片治疗高血压合并冠心病护理观察

目的观察氨氯地平阿托伐他汀钙片治疗高血压合并冠心病患者的临床效果。方法选取2012年4月～2013年8月本院收治的冠心病合并高血压患者80例，随机分为实验组和对照组，每组40例，对两组患者进行综合护理干预。结果患者经用氨氯地平阿托伐他汀钙片治疗后总有效率为89．13％；阿托伐他汀治疗后总有效率为63．04％。结论两组患者治疗均有效果，氨氯地平阿托伐他汀钙片治疗冠心病合并高血压有较好的效果，实施针对性综合护理对提高患者依从性有较好帮助。

濒危兰科植物DNA的提取方法

濒危兰科植物组织富含多糖和多酚类物质,提取高质量的DNA较困难。为优化濒危兰科植物基因组DNA提取方法,采用改良CTAB法、改良SDS法和试剂盒法对多种濒危兰科植物基因组DNA进行提取,对获得的DNA质量、浓度和纯度进行比较。结果表明,用改良CTAB法和试剂盒法可有效去除多糖类和多酚类物质的干扰,DNA提取效果较理想,改良SDS法较差;CTAB法获得的DNA浓度高于试剂盒法,且后续PCR扩增效果也优于试剂盒法。

遮阳网大棚盆栽红掌产业化生产技术研究

为摸索海南省盆栽红掌(Anthurium andraeanum)产业化生产技术,开展了9个盆栽红掌品种的遮阳网大棚栽培技术的试验研究与生产实践,从品种选用、设施建造、栽培模式、基质选择、环境调控、肥水管理、病虫害防治以及包装运输等方面,建立了一整套经济实用、成效明显的遮阳网大棚盆栽红掌产业化配套栽培技术,为热带地区红掌生产企业及花农提供技术指导。

文心兰切花产业化栽培基质的筛选研究

选用4种基质材料,并根据4种基质优缺点和文心兰切花品种生理特性,设计9个基质配比处理和1个对照进行文心兰切花产业化栽培基质筛选研究,比较单种基质和不同配比混合基质对文心兰切花营养生长和生殖生长的生物性状各项指标的影响,观测原始数据通过统计学软件SPSS进行方差分析和主成分分析,筛选出适合文心兰切花产业化栽培的基质配方为蜂窝碎石+松树皮+椰子壳+木炭(2∶2∶1∶1)。

遮阳网大棚荷兰红掌切花新品种的筛选研究

以引进的荷兰安祖公司12个主流红掌切花新品种为试材,在遮阳网大棚栽培模式下进行品种的抗病性、抗逆性、生物学性状和园艺性状试验研究,以筛选出适宜当地种植和具有产业化推广价值的红掌切花新品种。结果表明:‘Cheers’、‘Spice’、‘Nunzia’和‘Tropical’周年死亡率最低,抗病性最强,品种间没有显著差异;‘Nunzia’、‘Spice’和‘Tropical’抗逆性最好;‘Tropical’、‘Cheers’、‘Nunzia’和‘Spice’的生物学性状和园艺性状等综合指标表现最好。综上,‘Cheers’、‘Tropical’、‘Nunzia’和‘Spice’综合性状和经济效益表现较优,可进一步大面积推广示范。

遮阳网大棚红掌切花离土栽培生产技术

以聚氨酯泡沫塑料梯型槽作为种植容器,以12个引种至海南的红掌切花品种为试材,在遮阳网大棚栽培模式下进行了离土栽培生产技术研究,建立了从品种选择、设施建造、环境调控、肥水管理、病虫害防治以及采后保鲜等关键技术,以期为热带地区红掌切花生产提供一套经济实用、成效明显的遮阳网大棚红掌切花产业化离土栽培技术。

Pichia pastoris表达系统的启动子研究进展

Pichia pastoris是近年迅速发展的一种真核表达宿主,具有高效和适于进行高密度发酵等优点,已广泛应用于生产重组蛋白。启动子是表达系统重要组成部分中表达载体的核心元件,它的特性直接影响着它所调控的外源基因的表达。本文简要介绍了P.pastoris表达系统启动子pAOX1,pFLD1,pGAP,pYPT1和pICL1研究进展。

用E.coli表达Canstatin-N及其表达条件优化

以重组质粒pET-CN为模板设计引物CASN1和CASN2,PCR方法扩增约267bp的人血管能抑素N端1～89氨基酸基因片段,用EcoR I和Sal I双酶切将其克隆进pET-22b(+)载体获得重组表达质粒pET-22b(+)-CN,转化E.coli BL21(DE3),用IPTG诱导表达Canstatin-N,产物以包涵体形式存在。本文在摇瓶发酵条件下研究了诱导剂浓度、诱导培养时间对目标蛋白表达的影响,结果表明IPTG的最佳诱导浓度为0.1mmol/L;37℃下诱导培养2h时产物表达量最高。纯化获得的融合his6的重组Canstatin-N具有免疫和抑制鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)新生血管生成活性。

Canstatin-N基因在Pichia pastoris中表达及产物活性分析

目的:应用P.pastoris的pAOX1表达系统胞内表达canstatin-N蛋白。方法:通过PCR DNA合成技术以及DNA的酶切和连接技术,除去pPIC9K分泌型表达载体的信号肽,并使其载体的多克隆位点的3′端融合his6纯化标签,获得新的载体pPIC9Ki。以含canstatin N端序列的pET-CTN质粒为模版,PCR法扩增1～89个氨基酸的267bp的canstatin的N端基因片段,将其连接于pPIC9Ki的多克隆位点,获得重组表达质粒pPIC9Ki-CTN-N,用电转法将pPIC9Ki-CTN-N转化P.pastorisGS115,通过G418抗性筛选获得工程菌GS115(pPIC9Ki-CTN-N)。通过摇瓶发酵甲醇诱导表达Canstatin-N蛋白。用蜗牛酶裂解P.pastoris细胞,SDS-PAGE分析蛋白表达情况,在鸡胚中进行活性分析。结果:在pAOX1的调控下,canstatin-N基因能在P.pastoris中经甲醇诱导表达,摇瓶发酵表达量为65mg/L,纯化的目的蛋白具有显著的抑制鸡胚尿囊膜血管生成的作用。结论:实现应用P.pastoris表达Canstatin-N蛋白,为Canstatin-N蛋白的规模化生产和进一步的药用研究奠定了基础。

红掌花叶病病原鉴定及检测方法的建立

以红掌为材料,利用RT-PCR方法鉴定出红掌花叶病的一种病原——芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,DMV),并建立了该病毒的RT-PCR检测方法。依据该方法,将从0.1 g染病组织中提取的总RNA稀释500倍,仍能从中检测出DMV的存在,说明该方法的灵敏度高。该检测方法的建立,为红掌栽培,尤其是工厂化生产红掌无毒种苗提供了技术支持。

冰袋预冷对红掌切花采后保鲜和生理变化的影响

在筛选优化冰袋数量及其预冷时间的基础上,以冰袋为冷源,研究了预冷处理和包装箱内冰袋冷藏对红掌鲜切花采后保鲜和生理变化的影响。结果显示,红掌鲜切花经冷库预冷6 h,放入以4个冰袋作冷源的包装箱内冷藏48 h后保鲜效果优于其他处理组,其鲜切花的瓶插寿命为12.1 d,比对照(CK)延长了1.3 d。同时,测定了处理后红掌切花的水分平衡值、可溶性总糖和丙二醛(MDA)含量,分析了在瓶插过程中生理指标的变化,研究结果将为红掌鲜切花采后保鲜和贮运提供理论依据。

切花文心兰花梗芽组培快繁技术研究

以切花文心兰南茜Oncidium Gower Ramsey为材料,对以花梗芽为外植体的切花文心兰组培快繁技术进行研究。结果表明,以成熟度2（外形呈笋状,花苞和分叉始露出花梗苞片,高约70 cm）和中部节位的花梗上的芽为最适宜外植体;用0.1%升汞消毒处理花梗芽的适宜时间为12 min;1/2MS＋6-BA 2.0 mg/L＋TDZ 1.0mg/L＋NAA 0.2 mg/L为花梗芽最佳初代诱导培养基;继代培养以6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.3 mg/L为最佳激素组合;以温度25℃和光照强度2 500 lx（光照时间10～12 h/d）的培养条件最为理想。

在文心兰不同开花阶段施用保鲜剂对切花衰老的影响

为了了解保鲜剂对不同开花阶段文心兰鲜切花的保鲜效果,利用乙烯作用剂硫代硫酸银(silver thiosulfate,STS)、1-甲基环丙烯或聪明鲜(1-methylcyclopropene,1-MCP)及乙烯释放剂乙烯利对不同开放阶段的鲜切花进行处理。结果表明:乙烯利处理在半开放期后可明显缩短文心兰切花的衰老进程,STS处理可延长盛开前期和盛开期的时间,而1-MCP处理可延长衰老初期和衰老期的时间。同时,对文心兰开花各个阶段乙烯释放和1-氨基环丙烷1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid,ACC)含量进行了测定,结果显示,蕊柱和花萼中ACC含量在绽口期和半开放期基本稳定,而半开放期之后开始增加,而乙烯释放量在盛开前期后上升。花瓣ACC含量在盛开前期后缓慢增加,在衰老初期达到峰值。表明文心兰花器官内源乙烯生物合成的启动对保鲜剂不同阶段的处理效果有一定的影响和相关性。