血清伏立康唑候选参考方法的建立和性能评价

目的基于同位素稀释液相色谱-串联质谱(ID-LC-MS/MS)技术建立检测血清伏立康唑的候选参考方法。方法以甲醇为沉淀剂,采用蛋白沉淀法(PPT)对样本进行前处理。以伏立康唑-2H3为内标,建立基于ID-LC-MS/MS的血清伏立康唑候选参考方法。评估所建立方法的线性、定量限(LOQ)、检测限(LOD)、准确度、精密度、基质效应、稳定性。结果ID-LC-MS/MS测定血清伏立康唑的线性范围为0.2~16.0μg·mL^(-1),定量限为0.08μg·mL^(-1),检测限为0.016μg·mL^(-1)。加标回收率为97.26%~98.48%。批内变异系数(CV)<1%,批间CV<2%。相对基质效应为-1.87%~0.33%。样本分别经室温[(23±2)℃]放置4、8 h和-20℃反复冻融5次,经前处理后的样本在室温和自动进样器(8℃)分别放置4、8、12、24 h,回收率为95.63%~99.50%,检测结果稳定。相对扩展不确定度≤3.34%。结论建立了基于ID-LC-MS/MS的血清伏立康唑候选参考方法,可用于该项目的检测标准化。