毛霉发酵法制备豆渣可溶性膳食纤维的研究

以豆渣为原料,采用毛霉发酵方法制备可溶性膳食纤维。采用单因素试验、部分析因设计、中心组合设计及响应面分析的方法对影响豆渣可溶性膳食纤维制备工艺的因素:培养基含水量、起始pH值、发酵温度、发酵时间等发酵工艺进行分析,并对其进行优化,确定相对较合适的发酵工艺条件:每支250mL三角瓶装干豆渣10g,加水调节其含水量为56.7%,添加蛋白胨2.33%、KH2PO40.57%、CaCl20.2%、吐温-80 0.2%,调节培养基起始pH6.0,接种后置于25℃发酵80h。在优化的工艺条件下,豆渣可溶性膳食纤维的得率可达42.2%。结果表明,毛霉发酵可以显著提高豆渣中可溶性膳食纤维的含量,应用该方法制备豆渣可溶性膳食纤维具有可行性。

基于序贯设计的毛霉AS3.2778发酵产蛋白酶工艺优化

本研究主要就毛霉AS3.2778固体发酵的工艺条件进行了探讨,利用序贯设计这一数学工具对影响产酶的若干因素进行了优化,并最终确立了相对稳定的发酵工艺条件。结果表明,每250ml三角瓶装8g麸皮,其中添加1.23%麦芽糖,1.56%蛋白胨,0.74%KH2PO4,0.06% FeSO4·7H2O作为辅助营养物,培养基的起始含水量为每克麸皮添加0.79ml水,发酵温度24.1℃,时间48h。在优化的工艺条件下,每克干基可发酵产酶1541U,是起始发酵单位的202%。

雅致放射毛霉AS3.2778碱性蛋白酶的纯化及水解特性

毛霉蛋白酶可以高效地水解大豆蛋白,而且对蛋白水解物具有良好的脱苦效果.为了开发这一蛋白酶系,采用离子交换、疏水层析及凝胶层析等方法,从雅致放射毛霉AS3.2778的发酵麸曲中分离纯化出一蛋白酶组分,并对其水解特性进行了探讨.结果显示：纯化后的蛋白酶是一单体蛋白,其相对分子质量大约为32000;该蛋白酶在55℃、pH8.0-10.0的条件下对大豆蛋白显示出较强的水解能力,其水解效果明显优于商品化的蛋白酶（如木瓜蛋白酶、Alcalase及Protamex）,表明该蛋白酶比以上几种商品化蛋白酶具有更广泛的肽键选择性,对大豆蛋白亲和力更强,在大豆蛋白肽链上有相对较多的酶切位点.

响应面法优化牛蒡根总黄酮提取工艺

通过单因素实验、部分析因设计及中心组合设计的实验方法对牛蒡根总黄酮提取工艺进行了探讨,确定了牛蒡根总黄酮的最佳提取工艺条件:乙醇浓度为42.2%,浸提温度81.7℃,液料比40∶1(v∶m),浸提时间3.5h。在此条件下,牛蒡根总黄酮的提取得率可以达到21.98mg/g。

毛霉蛋白酶的组分特性及对大豆蛋白水解的研究

毛霉是腐乳酿造的主要微生物之一,其分泌的蛋白酶对大豆蛋白具有较高的水解效率以及对蛋白水解物良好的脱苦效果,因此在大豆蛋白水解加工方面显示出很好的应用前景。本研究采用多种蛋白纯化的方法从毛霉胞外分离纯化出三种不同的蛋白酶组分。在探讨了各组分蛋白酶性质的基础上,考察了各种蛋白酶组分对大豆蛋白的水解效果。结果显示,纯化得到的碱性蛋白酶组分Pb1对大豆蛋白具有相对较强的水解能力,而酸性蛋白酶对大豆蛋白水解能力较差,碱性蛋白酶与酸性蛋白酶之间具有良好的协同作用。

大豆多肽研究概况

大豆肽是大豆蛋白水解后 ,由 3～ 6个氨基酸残基组成的低肽混合物 ,分子量在 10 0 0Da左右。由于它具有很多优良的理化特性和生理活性 ,因此在很多领域得到了广泛的应用。简要综述了这方面的研究进展。

雅致放射毛霉AS3.2778碱性蛋白酶的纯化及性质研究(英文)

利用盐析、离子交换、疏水层析及凝胶过滤的方法从雅致放射毛霉AS3.2778的发酵麸曲中分离纯化出一碱性蛋白酶,其纯化提高了22.7倍,酶活回收率16.1%,最终比酶活可达到6094μ/mg。电泳分析发现,该蛋白酶是一单体蛋白,其分子量大约在32kDa。性质分析表明:该蛋白酶在60℃,pH8.5～10.5具有最大催化活性;在40℃以下,pH6.0 ～9.0的范围有很好的稳定性;1mmol/L的PMSF可以完全抑制其活性,显示该蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶家族。底物专一性的研究发现,该蛋白酶有相当广泛的肽键选择性,对绝大多数由疏水性氨基酸(尤其是亮氨酸)构成的肽键有很强的水解能力。

大豆多肽深层发酵过程中蛋白质变化的研究

在摇瓶发酵实验的基础上,我们将大豆多肽发酵工艺在5L发酵罐中进行了放大实验。利用各种分析技术对发酵过程中大豆蛋白的变化进行了检测分析,包括蛋白质水解度、多肽分子量分布以及氨基酸组成等。结果显示,大豆蛋白的水解在接种后6～8h后达到高峰期,24h后趋于平缓;发酵时间宜控制在24～36h内,发酵36h所得的多肽分子量主要分布在2000～3500Da范围内;而氨基酸分析的结果表明,发酵法制备的大豆多肽具有与大豆蛋白同样合理的氨基酸组成。

菌丝结团问题的探讨

菌丝结团问题是阻碍丝状真菌深层发酵的一个主要问题 ,该文以雅致放射毛霉AS 3 2 778为实验菌 ,研究了与菌丝形态相关的几个因素 ,如营养条件 。

固体发酵制备毛霉蛋白酶的研究

研究了毛霉M4产蛋白酶的若干影响因素,包括培养基的成分以及发酵条件等。结果表明,在麸皮与水的合适比例为1∶0.8;在基本培养基基础上添加一定浓度的碳源,氮源及无机盐有利于蛋白酶的合成;菌体较为合适的产酶条件为温度28℃,pH6.0,发酵时间36h。

毛霉蛋白酶的制备及催化特性的研究

该文研究了毛霉蛋白酶的催化特性以及影响其活力的一些因素,包括温度、pH值以及金属离子等。结果表明,毛霉蛋白酶有2个较为合适的作用pH值,分别为pH7.5和pH10.0,在60℃有最大催化活力;在pH6.0和40℃以下毛霉蛋白酶有很好的稳定性。SPI水解试验表明,毛霉蛋白酶是一种适于水解大豆蛋白的酶种,在大豆多肽制备方面有较好的前景。

腐乳毛霉AS3.2778产蛋白酶特性研究

研究了影响腐乳毛霉AS3.2778产蛋白酶的一些因素,包括培养基的组成、发酵温度、pH以及发酵时间等。结果表明,毛霉蛋白酶是一种诱导酶,较合适的发酵条件为温度28℃,pH5～6,发酵时间48h。

纳豆芽孢杆菌蛋白酶的制备及性质研究

纳豆芽孢杆菌是纳豆发酵生产的主要菌种,对其胞外蛋白酶催化特性的研究有助于了解纳豆的发酵生产过程,并有利于从中发掘有开发应用潜力的蛋白酶。实验从不同纳豆产品中分离筛选得到1株高产蛋白酶的纳豆芽孢杆菌,对其胞外蛋白酶的催化特性及活性影响因子进行了分析。结果显示,纳豆芽孢杆菌蛋白酶是一典型的金属蛋白酶,EDTA几乎可完全抑制其活性,Ca2+是其活性中心的辅基;该蛋白酶在60℃、pH 7.0有最大催化活性,在pH 6～9和低于45℃条件下具有很好的稳定性;50℃时,该蛋白酶会缓慢失活,其热失活规律符合一级指数衰减模型:a=0.124+0.887e(-0.45t);该蛋白酶对大豆蛋白有很强的水解能力,其水解效率与Alcalase蛋白酶相当,可以实现底物蛋白的深度水解,具有一定的开发应用价值。

毛霉亮氨酸氨肽酶的纯化及性质研究

采用硫酸铵盐析、离子交换层析、疏水层析、凝胶层析及超滤方法对毛霉胞外蛋白酶组分进行分离纯化,从毛霉的发酵麸曲中分离纯化得到氨肽酶组分,并对其性质进行探讨。结果表明:纯化的毛霉氨肽酶是亮氨酸氨肽酶,其对小肽N端的亮氨酸有非常强的水解活性;该氨肽酶在40℃、pH6.5有最大催化活性,在40℃以内,pH5.0～8.0有很好的稳定性;在所实验的几种蛋白酶抑制剂(PMSF、EDTA、E-64、Pepstatin A)中,仅EDTA可以完全抑制该氨肽酶的活性,由此说明,纯化的毛霉氨肽酶是一种金属蛋白酶;常见的金属离子中,Ca2+对该氨肽酶有激活作用,而Zn2+、Cu2+及Mn2+对其有强的抑制作用;该氨肽酶对大豆多肽的苦味有明显的去除效果,大豆多肽脱苦处理4h后其苦味基本消除。

脂质体及其应用研究进展

脂质体是一种人工制备的磷脂类生化物质,属携有双层包膜的脂质小囊.它作为药物载体具有许多优良的特性:可以保护药物,提高药效;减小药剂对机体的毒性;可将治疗药剂准确地命中病变部位、组织和细胞.近年来,国内外在这方面进行了大量的研究,并取得了一些进展.简要概述了这方面的一些研究进展.

纳豆芽孢杆菌发酵产蛋白酶工艺优化

纳豆芽孢杆菌是纳豆发酵生产的主要菌种,对其发酵产蛋白酶特性的探讨将有助于了解纳豆的发酵生产过程,为其提供理论指导。从不同纳豆产品中分离筛选得到一株高产蛋白酶的纳豆芽孢杆菌,采用响应面设计的方法对影响其发酵产酶的若干因素进行了分析,确定了相对较稳定的发酵培养基及工艺条件:可溶性淀粉3.41%,麸皮2%,黄豆粉2.26%,CaCl2 0.2%,K2HPO4 0.24%,Tween 80 0.2%,pH 8.0～8.5;发酵温度35～38℃,时间70 h。在优化的培养基及条件下,该菌种蛋白酶的发酵单位可以达到7 200 U/mL,较优化前提高了约2倍。

毛霉AS3.2778脯氨酸氨肽酶的部分纯化及性质研究

毛霉蛋白酶对大豆蛋白有较高的水解效率并对蛋白水解物有良好的脱苦效果,因此在大豆多肽的制备方面显示出很好的应用前景。为了开发这一蛋白酶系,实验中P采用硫酸铵盐析、离子交换层析、疏水层析及凝胶层析等方法对其进行了分离纯化,从雅致放射毛霉AS3.2778的发酵麸曲中部分纯化得到一氨肽酶组分,并对其性质进行了探讨。纯化的毛霉氨肽酶是一典型的脯氨酸氨肽酶,它对小肽N端的脯氨酸有非常强的水解能力;该氨肽酶在40～45℃、pH6.5有最大催化活性,在30℃以内,pH5.0～8.0有很好的稳定性;在所试验的几种蛋白酶抑制剂中,仅1 mmol/L的苯甲基磺酰氟(PMSF)对毛霉氨肽酶有抑制作用,由此说明纯化的毛霉氨肽酶可能是一种丝氨酸蛋白酶;常见金属离子对该氨肽酶活性的影响不明显;脱苦实验结果表明,纯化的毛霉氨肽酶对于大豆蛋白水解物的苦味有明显的去除效果。

固体发酵制备毛霉蛋白酶的研究

该文研究了毛霉M2产蛋白酶的若干影响因素,包括培养基的成分以及发酵条件等。结果表明:在麸皮与水的合适比例为1:0.8;在基本培养基上添加一定浓度的碳源、氮源及无机盐有利于蛋白酶的合成;菌体较为合适的产酶条件为温度28℃,pH6.0,发酵时间36h。