咖啡因对大鼠成骨细胞活性及DNA甲基化水平的影响

目的 观察不同浓度咖啡因对大鼠成骨细胞活性及DNA甲基化水平的影响。方法 胰酶-胶原酶消化法提取新生SD大鼠颅骨成骨细胞,碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色鉴定大鼠成骨细胞;分别以0.00、0.25、0.50、1.00、2.00 mmol/L的咖啡因处理成骨细胞48 h后,采用CCK-8法检测成骨细胞代谢活力,微量酶标法检测成骨细胞培养液中ALP活性,ELISA检测骨钙素(BGP)、5-甲基胞嘧啶(5-mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)的含量,Western blot检测DNA甲基化转移酶1 (DNMT1)和甲基胞嘧啶双加氧酶2 (TET2)蛋白表达的情况。结果 与0.00 mmol/L咖啡因组比较,0.25 mmol/L咖啡因组大鼠成骨细胞代谢活力增加,2.00 mmol/L咖啡因组成骨细胞代谢活力降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与0.00 mmol/L咖啡因组比较,0.50 mmol/L咖啡因组大鼠成骨细胞中ALP活性和BGP含量升高,2.00 mmol/L咖啡因组成骨细胞中ALP活性和BGP含量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与0.00 mmol/L咖啡因组比较,0.50 mmol/L的咖啡因组大鼠成骨细胞中DNMT1蛋白表达降低、TET2蛋白表达增加、差异均有统计学意义(P<0.05),2.00 mmol/L的咖啡因组成骨细胞中DNMT1蛋白表达增加、TET2蛋白的表达降低、差异均具有统计学意义(P<0.05);与0.00 mmol/L咖啡因组比较,0.25 mmol/L和0.50 mmol/L组大鼠成骨细胞DNA中5-mC含量降低、5-hmC含量增加、差异均有统计学意义(P<0.05),1.00 mmol/L和2.00 mmol/L组的5-mC含量增加、5-hmC含量降低、差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 低剂量咖啡因促进大鼠成骨细胞代谢活力,促进DNA羟甲基化降低整体DNA甲基化水平;高剂量咖啡因抑制大鼠成骨细胞代谢活力,抑制DNA羟甲基化,增加整体DNA甲基化水平。

p16基因突变及甲基化在砷致癌中的作用

目的了解抑癌基因p16在燃煤型砷中毒患者中突变及甲基化的情况和意义。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析和PCR产物克隆测序技术对60例砷中毒患者外周血中p16基因第2外显子突变情况进行检测,同时采用甲基化敏感的限制性内切酶方法对p16基因第1外显子甲基化情况进行分析。结果燃煤型砷中毒患者p16基因第2外显子未发现突变存在;第1外显子SmaⅠ位点甲基化分析显示:癌变组10例患者中有4例出现了甲基化,癌前组12例、一般病变组38例,均未发现甲基化存在。结论p16基因高度甲基化可能是导致砷性肿瘤中p16基因失活的主要方式,并可能在砷致癌过程中起着重要作用。

PCR-SSCP及克隆测序法研究燃煤型砷中毒患者p53基因突变与皮肤癌的关系

[目的 ]分析燃煤型砷中毒患者外周血中p5 3基因突变情况。 [方法 ]采用聚合酶链反应 单链构象多态性(PCR -SSCP)技术对 60例燃煤型砷中毒患者外周血中p5 3基因 5～ 8外显子的突变情况进行初筛 ,并进一步克隆测序 ,以确定突变位点及类型。 [结果 ]癌变组p5 3基因突变率为 3 0 % ( 3 /10 ) ;癌前组为 16.67% ( 2 /12 ) ;一般病变组未发现突变 ( 0 /3 8)。对筛查出来的 5例突变阳性者进行克隆测序 ,突变均为G :C→A :T的转换 ,分别位于密码子 14 3、14 6及 15 1。[结论 ]燃煤型砷中毒患者外周血中p5 3基因突变的检出 。

氨氯吡啶酸对小鼠骨髓细胞微核及CHL细胞染色体畸变的影响

目的:从体内和体外2个试验体系检测95%氨氯吡啶酸原药的致突变性,预测其遗传危害,为其安全使用提供科学依据。方法:采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变试验方法检测95%氨氯吡啶酸原药的致突变性。结果:95%氨氯吡啶酸原药各剂量组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);95%氨氯吡啶酸原药各剂量组CHL细胞染色体畸变率,在直接作用和代谢活化条件下,与溶剂对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在本试验条件下,95%氨氯吡啶酸原药无诱导小鼠骨髓细胞染色体损伤及致CHL细胞染色体畸变的作用。

基于Web的新型发变组微机监录系统

为适应机组故障录波装置新标准的要求 ,满足其网络化的需要 ,提出了一种基于Web的新型发电机 -变压器组微机监录系统 ,该系统包括信息发布、装置管理、定值整定。

主变差动回路的TA二次接线方式探讨

通过研究锅顶山子站2号主变保护更换后送电过程中主变差动回路接线不正确的现象,分析了主变各侧TA极性和TA回路接线方式、开关和母排与变压器相别一致性等诸多因素对差动保护回路的影响,并对变压器保护的TA极性及其二次接线方式的统一、规范化进行了阐述。

浅析“1R”在断路器控制回路中的重要作用

通过分析配备电磁型保护的间隔,其信号继电器不能可靠掉牌的事故现象,详细阐述了易被人们忽视的电阻“1R”在断路器跳闸回路中所起的重要作用。

后发酵茶中短短芽孢杆菌产酶能力及其在茶叶渥堆过程酶活性分析

目的全面了解源自后发酵茶中短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis,Br.brevis)的产酶特性,揭示其对后发酵茶品质形成的作用。方法对短短芽孢杆菌进行全基因组测序和关键酶预测,结合预测结果对短短芽孢杆菌进行纯培养、接种茶叶渥堆,分析其纯培养和参与茶叶渥堆过程的产酶能力、酶活性及渥堆茶叶主要品质成分的动态变化。结果测序结果表明短短芽孢杆菌糖苷水解酶、糖基转移酶得到注释基因最多,分别占比39.22%和33.33%。在短短芽孢杆菌的纯培养和参与茶叶渥堆过程中,短短芽孢杆菌具有产生蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶、过氧化物酶和多酚氧化酶的能力,其中蛋白酶、淀粉酶和果胶酶活性较强,纯培养条件下蛋白酶酶活力最高可达到550.91 U/mL;相较于液体纯培养,在茶叶基质上培养有助于短短芽孢杆菌纤维素酶酶活力的提高,增幅达到691.02%;在短短芽孢杆菌参与的茶叶渥堆过程中,茶多酚、儿茶素、氨基酸和黄酮呈现下降趋势,茶多酚最大降幅为80.61%,咖啡碱检测含量显著增加,增幅最大为56.15%;相关性分析结果表明,渥堆过程短短芽孢杆菌产生的纤维素酶等与茶叶品质成分的变化表现出显著的正相关。结论短短芽孢杆菌在后发酵茶渥堆过程可以分泌多种胞外酶,通过酶促作用影响后发酵茶理化成分的改变。

基于双端故障信息的高压电缆-架空线混合线路故障测距方法

提出了一种基于双端故障信息的高压混合线路测距算法,利用输电线路首、末端电压、电流工频量分段递推,通过搜索两端线路沿线电压曲线的交点来确定故障点位置,并讨论了伪根的鉴别方法,进而针对双端数据不同步、不同采样频率、不同过渡电阻等各种情况进行了全面的仿真计算。仿真结果表明,该方法测距精度高,且不要求线路两端数据同步,不受线路两端系统阻抗和故障点过渡电阻的影响,具备较高的实用价值。

砷中毒患者皮肤组织中DNA修复基因的表达变化

目的检测DNA修复基因MGMT、XRCC1、hMSH2mRNA在燃煤型砷中毒患者皮肤组织中的表达变化,探讨其表达与砷性皮肤癌发生发展及临床病理特征之间的关系。方法应用原位杂交技术检测了61例砷中毒患者皮肤组织中MGMT、XRCC1、hMSH2mRNA的表达变化。结果随着砷中毒患者皮肤病变的发展,MGMT、XRCC1、hMSH2mRNA的表达逐渐降低,癌变组MGMT和XRCC1mRNA阳性表达率与一般病变组比较差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。结论MGMT、XRCC1、hMSH2作为DNA损伤修复基因,在砷性皮肤病变过程中起重要作用;砷可能通过抑制砷中毒患者皮肤组织中MGMT、XRCC1等DNA修复基因的表达,影响基因组DNA稳定性和DNA修复功能而导致对皮肤的致癌作用。

一种高压电缆-架空线混合线路智能重合闸方案

提出了一种基于双端故障信息的高压混合线路智能重合闸方案,利用输电线路首末端电压、电流工频量分段递推,通过搜索两端线路沿线电压曲线交点来确定故障点位置,进而确定重合闸动作逻辑;讨论了架空线和电缆接头处发生故障的处理方法,提出了伪根问题的解决方案。仿真结果表明该方案精度高,不要求线路两端数据同步,不受故障点过渡电阻、伪根、混合线路多分段的影响,重合闸动作正确。

燃煤污染型砷中毒患者MGMT基因启动区甲基化及MGMT mRNA的表达

[目的]了解燃煤污染型砷中毒患者血中O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因(MGMT基因)启动区甲基化及患者皮肤组织中MGMT mRNA转录表达的情况,探讨两者间关系及其在砷中毒发生发展乃至癌变中的作用。[方法]采用甲基化特异性PCR法(MSP)检测99例砷中毒患者和103例正常对照MGMT基因启动区甲基化情况;同时采用原位杂交技术检测其中61例砷中毒患者皮肤组织中MGMTmRNA的表达情况。[结果]①砷中毒组MGMT基因启动区甲基化阳性率为40.4%,对照组为2.91%;随病情加重砷中毒患者甲基化阳性率逐渐升高,轻、中、重度砷中毒组甲基化阳性率分别为22.73%、39.02%和52.78%,非癌变组与癌变组甲基化阳性率分别为27.78%和65.00%,均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。②随着砷中毒患者皮肤病变的加重,MGMTmRNA阳性表达率逐渐降低,其表达率在非癌变组与癌变组分别为71.05%和30.43%,两组间差异有统计学意义(P<0.01)。③MGMT基因启动区甲基化阳性率升高与该基因mRNA表达降低有关联(r=0.456,P=0.01)。[结论]MGMT基因启动区高甲基化是砷中毒发生发展乃至癌变发生的早期事件;MGMT基因启动区高甲基化可导致MGMTmRNA转录水平下降并可能是进一步导致蛋白活性降低的重要原因之一。

三氧化二砷对大鼠血细胞参数影响的实验分析

目的:分析三氧化二砷(AS2O3)对实验大鼠血细胞15项参数的影响,为研究砷对血液系统的影响及其作用机制提供参考依据。方法:AS2O3经口染毒,建立砷中毒动物模型,采用F-820半自动血细胞分析仪测定实验动物血细胞参数的变化。结果:(1)红细胞参数:红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)显著降低,平均红细胞血红蛋白含量(MCH)显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)随剂量增加而升高,其中高剂量组差异具有统计学意义(P<0.05);(2)白细胞参数:低、中剂量组白细胞计数(WBC)显著增高,差异具有统计学意义(P<0.05),但随染砷剂量的增加而呈下降趋势,中剂量组淋巴细胞百分数(W-SCR)显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01);中性粒细胞百分数(W-LCR)出现低、中剂量组随剂量增加而显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01),但高剂量组有降低的现象;淋巴细胞绝对值(W-SCC)及中性粒细胞绝对值(W-LCC)出现低剂量显著升高而随染砷剂量的增加而逐渐降低的趋势;(3)血小板参数:各AS2O3组血小板(PLT)呈下降趋势,其中以中、高剂量组下降显著,差异具有统计学意义(P<0.05);而血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)指标呈升高趋势,其中低、中剂量组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:血液系统可能是砷毒性作用较为敏感的靶系统,AS2O3可对实验大鼠血液系统产生一定的损害作用,引起大鼠血液系统红细胞、白细胞、血小板等指标发生改变。

变电站微机故障录波与分析装置

变电站故障录波装置是电力系统暂态过程记录的主要设备,电力系统的发展对变电站故障录波装置提出了更高的要求。介绍了一种新型变电站微机录波与分析系统的硬、软件设计特点。运用突变量启动算法进行故障检测判断,使录波启动准确而稳定。采用了新的录波数据分段记录方式,在减少记录数据量的同时保证记录信息的完整性。利用序电压比值进行故障定位计算,仿真表明该算法对测量误差的敏感度低。

竹荪提取液对砷中毒大鼠血细胞参数的影响

目的:分析竹荪提取液对砷中毒大鼠血细胞15项参数的影响,为防治砷中毒及竹荪资源的开发利用提供依据。方法:As2O3经口染毒,建立砷中毒动物模型,竹荪提取液灌胃14d,采用F-820半自动血细胞分析仪测定实验动物血细胞参数。结果:(1)与正常对照组比较,砷中毒模型组红细胞计数(RBC)、红细胞压积(HCT)、淋巴细胞绝对值(W-SCC)、血小板(PLT)显著降低,P<0.05或P<0.01;红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)显著升高,P<0.05或P<0.01;(2)与砷中毒模型组比较,竹荪治疗组RBC、血红蛋白(HGB)、HCT呈现升高趋势,MCH呈降低趋势,MCHC随竹荪剂量升高而降低,高剂量组差异具有显著性(P<0.05),平均红细胞体积(MCV)、红细胞体积宽度(RDW-CV)呈升高趋势且高于正常对照组;白细胞(WBC)、W-SCC、中性粒细胞绝对值(W-LCC)呈上升趋势;淋巴细胞百分数(W-SCR)在竹荪低剂量组显著性降低(P<0.05),而后随剂量增加呈上升趋势;中性粒细胞百分数(W-LCR)在竹荪低剂量组显著性升高(P<0.05),而后随剂量增加呈下降趋势;PLT持续降低,血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)呈上升趋势,但差异无统计学意义。结论:AS2O3对实验大鼠血液系统有一定的损害作用,竹荪提取液对砷所致的大鼠血液系统红细胞、白细胞、血小板等指标具有一定的保护作用。

烯啶虫胺的致突变性试验

目的:研究烯啶虫胺的致突变性,为其安全生产和使用提供参考依据。方法:采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、Ames试验、中国地鼠肺细胞(CHL)染色体畸变试验和小鼠淋巴瘤细胞L5178YTK基因突变试验检测烯啶虫胺的致突变性。结果:烯啶虫胺未引起骨髓嗜多染红细胞微核率的异常增高(P>0.05);在直接作用或代谢活化条件下,鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102各剂量组回复突变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍;烯啶虫胺各剂量组的CHL细胞染色体畸变率和L5178Y细胞TK基因突变频率,与阴性对照组比较,其差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在本试验条件下,未发现烯啶虫胺有致突变性。

贵阳市蔬菜中有机氯农药残留现况调查

目的：了解贵州省贵阳市市售蔬菜中有机氯农药残留状况，为进一步保障居民健康提供依据。方法：采用气相色谱法测定50份蔬菜样品中15种有机氯的含量。结果：各类蔬菜样品中均检Ⅲ有机氯农药，各种有机氯的检出率达到8％～40％，有机氯类农药残留以α-硫丹、β-666、狄氏剂、γ-666为主；三类蔬菜之间有机农药的残留量依次为：根茎类、叶类、果实类。结论：贵州省贵阳市市售蔬菜中有机氯农药残留现状不容乐观；蔬菜中有机氯农药的残留来源于土壤。

基于Web的发变组远程监录系统

摘要:为满足监录系统网络化的要求,作者结合Web技术构建了一个具有Windows DNA结构、利用COM/COM+及ASP技术实现的发电机-变压器组远程监录系统。该系统具有易维护、易扩展等优点,能够方便快捷地实现录波数据的发布与共享、远程在线控制、设备调节与维护,其基于稳态数据记录的历史信息能为未来电厂的设备状态检修提供重要的依据。

95%二氯吡啶酸原药遗传毒性的初步探讨

目的:观察95%二氯吡啶酸原药对鼠伤寒沙门菌回复突变试验(Ames试验)菌株基因突变和中国地鼠肺(CHL)细胞染色体畸变的影响,初步探讨其遗传毒性,为该农药的毒理学安全性评价提供基础数据。方法:采用Ames试验及CHL细胞染色体畸变试验在直接作用或代谢活化条件下,分别设立试验剂量组和阴性、阳性对照组,37℃培养检测。结果:95%二氯吡啶酸原药在直接作用或代谢活化条件下,对鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100、TA102各剂量组回复突变菌落数均未超过阴性对照组回变菌落数的2倍;CHL细胞染色体畸变试验显示各剂量组与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在本试验条件下,95%二氯吡啶酸原药无诱发鼠伤寒沙门菌基因突变和CHL细胞染色体畸变作用。