电针预处理对脂多糖诱导的认知障碍小鼠线粒体动力学的影响

目的观察电针预处理对脂多糖(LPS)诱导的认知障碍小鼠线粒体动力学的影响。方法将45只10~11周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠(体重25~27 g)按随机数字表法分为对照组、模型组和电针组,每组15只。模型组和电针组侧脑室注射LPS建立神经炎症诱导的认知障碍小鼠模型,对照组注射人工脑脊液。电针组于造模前对小鼠神庭、百会、足三里、内关行电针治疗,30 min/次,5次/周,连续2周。造模后6 h,每组随机选5只小鼠处死取材,采用酶联免疫吸附试验检测其海马组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平。造模后24 h,采用旷场实验观察各组剩余小鼠的自发活动和焦虑行为,Morris水迷宫空间探索测试评估认知功能,化学发光法检测各组海马组织腺苷三磷酸(ATP)水平,流式细胞术检测线粒体膜电位(MMP),蛋白质印迹法检测发动蛋白相关蛋白1(DRP1)和线粒体融合蛋白2(MFN2)的表达。结果模型组移动总路程、中央区停留时间和穿越中央区次数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。电针组移动总路程、中央区停留时间和穿越中央区次数与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组穿越原平台次数和目标象限停留时间百分比及海马组织MMP、ATP、MFN2水平均低于对照组,海马组织TNF-α、IL-1β、DRP1水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。电针组穿越原平台次数和目标象限停留时间百分比及海马组织MMP、ATP、MFN2水平均高于模型组,海马组织TNF-α、IL-1β、DRP1水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论电针预处理改善LPS诱导的小鼠认知功能障碍,降低神经炎症,其机制可能与抑制线粒体分裂,促进线粒体融合有关。

电针干预对糖尿病术后认知功能障碍小鼠线粒体分裂的影响

目的 观察电针干预对糖尿病术后认知功能障碍(POCD)小鼠线粒体分裂的影响。方法 39只体重(20±2)g的4~6周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠高脂高糖饮食16周后腹腔注射链脲佐菌素,1周后空腹血糖≥11.1 mmol/L,即为2型糖尿病实验动物(无小鼠死亡),随后采用随机数字表法将其分为对照组、模型组、电针组,每组13只。对照组除抓取与固定外不做其他干预;模型组与电针组行胫骨骨折髓内固定术建立POCD模型(无小鼠死亡);模型组与对照组比较,认知能力下降视为造模成功。电针组术前2周取神庭、百会、内关和足三里行电针干预,每次留针30 min,每周连续5 d。术后1 d进行旷场试验与恐惧条件测试评估小鼠认知功能;苏木精-伊红染色法观察海马CA1区病理情况;尼氏染色法观察神经元数量;化学发光法检测腺苷三磷酸(ATP)含量;流式细胞术检测线粒体膜电位(MMP);Western blot检测小鼠海马发动蛋白相关蛋白1(Drp1)、p-Drp1 Ser616、p-Drp1 Ser637的蛋白表达水平。结果 与对照组比较,模型组场景恐惧测试僵直时间缩短(P<0.05);与模型组比较,电针组场景恐惧测试僵直时间增加(P<0.05)。与对照组比较,模型组CA1区神经元损伤加重、神经元数量减少(P<0.05);与模型组比较,电针组CA1区神经元损伤减轻、神经元数量增加(P<0.05)。与对照组比较,模型组ATP含量减少,MMP降低(P<0.05);与模型组比较,电针组ATP含量增加,MMP升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组海马组织p-Drp1 Ser616蛋白表达水平升高,p-Drp1 Ser637蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,电针组海马组织p-Drp1 Ser616蛋白表达水平降低,p-Drp1 Ser637蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 电针干预可以提高糖尿病小鼠POCD的学习记忆能力,减轻神经元损伤,其机制可能与减少Drp1介导的线粒体过度分裂,改善海马线粒体功能有关。

电针预处理对呼吸机相关性肺损伤小鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体的影响

目的:探讨电针预处理对呼吸机相关性肺损伤(VILI)小鼠炎性反应及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响。方法:C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、电针组及非经非穴组,每组8只。采用高潮气量机械通气建立VILI小鼠模型。电针组和非经非穴组于机械通气前电针“足三里”“肺俞”或非经非穴点,每次30 min,每日1次,治疗5 d。采集动脉血行血气分析,采用BCA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白含量,采用ELISA法检测BALF中白细胞介素(IL)-1β和IL-18含量,计算肺组织湿干重比(W/D),HE染色观察肺组织病理情况并评定肺组织损伤评分,Western blot法检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸水解酶-1(Caspase-1)蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,模型组小鼠动脉血氧分压(PaO2)、氧合指数(OI)降低(P<0.05),BALF中总蛋白、IL-1β和IL-18含量升高(P<0.05),W/D及肺组织病理损伤评分升高(P<0.05),肺组织NLRP3、Caspase-1与ASC蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组相比,电针组PaO2、OI升高(P<0.05),BALF中总蛋白、IL-1β和IL-18含量降低(P<0.05),W/D及肺组织病理损伤评分降低(P<0.05),肺组织NLRP3、Caspase-1与ASC蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:电针预处理可以减轻高潮气量机械通气引起的肺组织结构破坏,改善肺组织氧合功能,减轻炎性反应,其机制可能与降低肺组织NLPR3炎性小体相关蛋白的表达,减少炎性小体活化,从而减轻炎性反应有关。