祛湿健骨方对MC3T3-E1细胞成骨分化能力的促进作用研究

目的探讨祛湿健骨方对MC3T3-E1细胞的作用机理。方法将祛湿健骨方配成不同浓度溶液(0.005、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4 mg/mL),用不同浓度祛湿健骨方对细胞进行干预,干预48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖率,筛选最佳药物浓度。将MC3T3-E1细胞制成细胞悬液,随机分为对照组、地塞米松组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,接种至六孔板。待细胞贴壁达到80%后进行造模(对照组不添加药物;地塞米松组使用地塞米松干预;低剂量组、中剂量组、高剂量组分别用相应浓度的祛湿健骨方+地塞米松进行干预)48 h后更换为成骨诱导培养基进行培养。诱导15 d后,测定各组细胞的碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)含量和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨细胞特异性转录因子(Osterix,OSX)蛋白的表达量。结果经CCK-8实验结果对比,药物筛选前3位存活率浓度为0.1 mg/mL(低浓度)、0.2 mg/mL(中浓度)、0.4 mg/mL(高浓度)。与对照组相比,地塞米松组、低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞ALP活性均降低差异有统计学意义(P<0.05);与地塞米松组相比,低剂量组、中剂量组差异无统计学意义(P>0.05),高剂量组细胞ALP活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,中剂量组、低剂量组、地塞米松组细胞的RUNX2、OSX蛋白表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05),高剂量组细胞OSX和RUNX2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与地塞米松组比较,高剂量组OSX和RUNX2蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论祛湿健骨方能够促进MC3T3-E1细胞的成骨分化能力,其可能是通过调节RUNX2、OSX等骨形成相关蛋白,以此纠正骨形成与骨吸收的平衡,达到治疗骨质疏松症的作用。

维药学课程 “故事思政”模式及第二课堂“兴趣小组”活动的实践与探索

以大思政为理念,课内课外相结合,探索并实践维药学课程“故事思政”教育模式及第二课堂“兴趣小组”创新实践活动。方法 将维医学2020级班为常规教育模式组、维医学2019级班为“故事思政”教育模式组,对2020级班采用实施课前5分钟课程思政教育模式。对2019级班采用“故事思政”教育模式。以院级“兴趣小组”创新实践活动为依托,制定创新实践活动主题,由老师指导,学生们自主开展第二课堂创新实践活动。通过问卷调查、课程总评成绩比较及课外活动参赛情况评价实施效果。结果 课堂教学效果的评价结果表明,“故事思政”教育模式均能提升学习兴趣、主动学习能力等。其中95.08%学生认为故事思政教学法对临床常用药物的学习非常有帮助。课程总评成绩比较分析表明,2019级班期末考试原始成绩与总评成绩比较,学术课程成绩大幅度提高,及格率由76.67%升到96.67%,提高30百分点;与2020级班比较,2019级班原始成绩与总评成绩均明显提高。学生对教学内容的满意度均较高,讲好药物化学成分、药理作用的拓展故事内容的满意度达90.16%。61名学生作为研究对象中有41名学生参加第二课堂创新实践活动,参与度较高。结论 “故事思政”教育模式及第二课堂“兴趣小组”活动对教师授课和学生学习起到了较明细的促进作用。需在进一步的教学过程中加强反馈并不断完善。

复合应激因素对应激性高血压大鼠肾脏的损伤作用及意义

目的在复合应激因素作用下,成功建立应激性高血压(stress-induced hypertention,SIH)大鼠模型,探讨SIH大鼠模型肾脏损伤的机制在SIH发生、发展过程中的作用,为应激性高血压肾脏损伤的防治提供实验依据。方法建立应激性高血压大鼠模型,记录左颈总动脉血压值,放射免疫法检测血浆皮质醇及内皮素含量的变化;光镜下观察肾脏的形态学变化以及Masson染色结果;采用速率散射比浊法测定尿微量蛋白水平;利用免疫散射比浊法检测尿蛋白水平。结果(1)成功建立应激性高血压大鼠模型,与正常对照组相比,SIH模型组大鼠收缩压和舒张压均明显升高(P<0.05),应激相关激素皮质醇及内皮素含量明显升高(P<0.05)。(2)光镜结果显示,SIH模型组大鼠肾脏组织肾小球固缩,肾小囊间隙增宽;Masson结果显示,SIH模型组大鼠肾间质,肾小管及肾小球可见大量染成蓝色的胶原纤维;(3)24 h尿蛋白与尿微量蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论本研究成功建立了应激性高血压大鼠模型,应激性高血压大鼠出现肾脏损伤的病理改变。

应激性高血压大鼠血管组织内质网应激与血管紧张素Ⅱ受体1型的关系及其意义

目的初步探讨应激性高血压(Stress-induced hypertension,SIH)大鼠血管组织内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress,ERS)与血管紧张素Ⅱ受体1型(AngiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)的关系。方法通过复合应激建立SIH模型。对大鼠胸主动脉石蜡包埋组织进行HE染色,观察大鼠胸主动脉壁中层平滑肌层的形态学变化;用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法﹑免疫组织化学(IHC)方法及Western印迹(WB)对大鼠胸主动脉组织进行grp78和at1r基因mRNA表达水平以及GRP78和AT1R的蛋白表达水平的检测。结果与正常组相比,SIH模型组中膜肌层血管平滑肌细胞(vescular smooth muscle cell,VSMC)肥大、动脉血管壁增厚、细胞排列较紊乱、弹性膜弯曲及紊乱;SIH模型组大鼠胸主动脉血管组织中at1r基因mRNA表达水平较正常组显著升高(P<0.05);与正常组相比,GRP78和AT1R在SIH模型组大鼠胸主动脉组织中高表达(P<0.05)。结论SIH模型组大鼠血管组织中有ERS的发生,ERS下游信号分子通过激活转录因子诱导血管组织中ATIR的高表达,从而引起血压的升高。

口试考试改革的效果及满意度调查分析

目的:探讨口试考试改革的效果及学生对口试的满意度。方法:抽取由同一教师任教的维医2016-1 班,共52名学生,随机分为实验组与对照组;对照组为期中考试笔试,采用单纯笔试法考试;实验组为期末考试采用口试法考试,对两组学生的考试成绩差异采用SPSS16.0 进行t 检验,同时设计问卷调查学生对口试考试形式的满意度分析评价。结果:实验组学生的考试成绩明显高于对照组(P<0.05)。结论:学生对口试考试的评价满意度比较高,口试可提高学生成绩。

阿纳其根醇提物对D-半乳糖致衰老小鼠抗衰老作用的血清核磁共振代谢组学研究

目的利用核磁共振代谢组学方法研究阿纳其根提取物对D-半乳糖致衰老小鼠抗衰老作用机制。方法选取3月龄的昆明小鼠60只并将其随机分为正常组、模型组、阳性对照组和阿纳其根95%醇提物低、中、高剂量给药组,正常组以外的小鼠每天1次皮下注射D-半乳糖100mg/kg,同时对阿纳其根低、中、高剂量给药组分别灌胃相应浓度的阿纳其根95%醇提物(0.15、0.3、0.6g/kg),对阳性对照组灌胃盐酸多奈哌齐(0.92 mg/kg),模型组灌胃等体积的生理盐水,连续给药45 d,第45 d末次给药1 h后利用Morris水迷宫实验观察小鼠学习和记忆能力并收集各组小鼠血清,用1H-核磁共振氢谱法(hydrogen-nuclear magnetic resonance,1H-NMR)测定核磁共振氢谱,采用偏最小二乘回归分析法(partial least squares-discriminant analysis, PLS-DA)和正交偏最小二乘法判别分析法(orthogonalpartialleastsquares-discriminantanalysis,OPLS-DA)分析研究每组小鼠血清中代谢产物差异。结果行为学检测结果显示与模型组小鼠比较,阳性对照组和阿纳其根醇提物不同剂量组的逃避潜伏期逐渐缩短,差异有统计学意义(P<0.01);各组小鼠的空间探索实验显示与模型组相比,阿纳其根95%醇提物各剂量组小鼠经过有效区次数显著增加(P<0.05);且各组血清多种代谢物有显著性差异(P<0.05)。结论 D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的糖代谢代谢、氨基酸代谢发生紊乱,而阿纳其根醇提物对其紊乱有一定的改善作用从而发挥抗衰老作用。