全反式维甲酸联合辛二酰苯胺异羟肟酸对人乳腺癌细胞MCF-7裸鼠移植瘤的影响

目的研究全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)联合辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoyl anilide hydroxamic acid,SAHA)对人乳腺癌细胞MCF-7裸鼠移植瘤生长的影响及作用机制。方法体外培养MCF-7细胞,利用CCK-8方法选取ATRA和SAHA联合的最佳配伍浓度。建立人乳腺癌细胞MCF-7裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组(PBS)、ATRA组(0.84 mg/kg ATRA)、SAHA组(0.42 mg/kg SAHA)和ATRA+SAHA组(0.84 mg/kg ATRA+0.42 mg/kg SAHA),每组5只裸鼠;待各组移植瘤长至100 mm3时,按照分组连续皮下给药2周后,取眼眶静脉血,断颈处死裸鼠后取肿瘤组织,称重并计算抑瘤率及脏器指数;用ELISA法检测裸鼠血清白细胞介素6受体(IL-6R)含量,HE染色观察肿瘤组织形态结构,免疫组化法和Western blot法检测肿瘤组织中肿瘤增殖和转移相关蛋白Caspase-3、MMP-9、MMP-2以及抑癌基因蛋白p53、EGFR的表达水平。结果CCK-8检测结果表明,0.40 mg/mL ATRA和0.15 mg/mL SAHA联合处理时MCF-7细胞活性最低,为SAHA和ATRA的最佳配伍浓度。与对照组及各单药组比较,ATRA+SAHA组裸鼠抑瘤率明显提高(均P<0.05),血清中IL-6R的含量降低(均P<0.05),肝脏指数均显著降低(均P<0.01);ATRA+SAHA组脾脏指数亦较ATRA组明显降低(P<0.05)。ATRA+SAHA组移植瘤肿瘤组织以重度坏死为主,肿瘤组织中MMP-9、MMP-2、EGFR的表达水平较对照组及各单药组明显下降(均P<0.05),p53、Caspase-3的表达水平则明显升高(均P<0.01)。结论ATRA与SAHA联合用药具有协同抑瘤作用。

SAHA对裸鼠人乳腺癌细胞MCF-7移植瘤的影响

目的:研究辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)是否可以调节RECK蛋白使MMP-2、MMP-9在动物体内表达发生改变,从而达到抑制乳腺癌细胞生长、增殖和转移,改善预后的作用,提供乳腺癌临床治疗新思路。方法:乳腺癌细胞MCF-7培养后,被移植到裸鼠皮下,制成动物模型。将裸鼠成瘤模型分为对照组(生理盐水0.4 mL/kg)和实验组(SAHA 0.42 mg/kg),成瘤模型建立后,ELISA方法检测裸鼠体内IL-6的含量。断颈法处死裸鼠,取肿瘤组织称重并计算脏器指数。取肿瘤组织做HE病理性染色。IHC、WB检测MMP-2、MMP-9、RECK在肿瘤组织中的表达。结果:与对照组相比,实验组IL-6含量、肿瘤重量及脏器指数降低(P<0.01)。肿瘤组织HE染色显示,实验组以中重度坏死为主,对照组中以轻中度坏死为主。IHC检测显示,与对照组相比,实验组RECK阳性表达较高,MMP-2、MMP-9阳性表达较低(P<0.05)。WB检测显示,与对照组相比,实验组RECK表达较高,MMP-2、MMP-9表达较低(P<0.01)。结论:SAHA可在动物体内通过提高RECK蛋白的表达来降低MMP-2、MMP-9的表达,从而抑制了人乳腺癌MCF-7细胞的侵袭和转移。