四神聪电针预防急性睡眠剥夺大鼠海马神经元凋亡的机制及对焦虑行为的影响

【目的】探讨四神聪电针预防急性睡眠剥夺大鼠海马神经元凋亡的机制及对焦虑行为的影响。【方法】将SD大鼠随机分为Sham组(对照组)、sleep deprivation(SD,睡眠剥夺组)、EA+SD组(eletroacupuncture,电针干预组)。采用改良水平台法对SD组、EA+SD组进行连续4天的急性睡眠剥夺,电针组在睡眠剥夺期间于四神聪穴位进行电针治疗,连续4 d,每天20 min。采用旷场实验检测大鼠探索能力以评估大鼠焦虑程度,并通过免疫荧光染色检测海马中CA1、CA2、CA3、DG1、DG2区域的神经元(NeuN阳性)和Cleaved Caspase-3的共标情况;采用免疫荧光标记海马中星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP),通过sholl analysis分析星形胶质细胞形态变化,并检测分别与补体C3^(+)、S100A^(+)的共标情况,以了解海马中星形胶质细胞A1、A2分型情况。【结果】旷场实验发现:EA+SD组大鼠在中心停留时间的时间增加,在中心区域的运动速度下降;免疫荧光染色显示:EA+SD组大鼠在海马不同区域除CA3外,其余的CA1、CA2、DG1、DG2区神经元上Cleaved caspase-3较SD组大鼠表达减少(P<0.05);sholl anal-ysis发现在12µm、15µm、18µm、21µm处EA+SD组星形胶质细胞与同心圆交点数目多于SD组,在海马区A1型星形胶质细胞(C3^(+)GFAP^(+)/GFAP^(+))比例低于SD组,A2型(S100A^(+)GFAP^(+)/GFAP^(+))所占比例高于SD组。【结论】四神聪电针对急性睡眠剥夺大鼠海马区神经元具有保护作用,其机制可能通过预防星形胶质细胞形态损伤,减少海马区A1型星形胶质细胞,增加A2型星形胶质细胞表达,降低急性睡眠剥夺导致的细胞毒性,减少神经元凋亡数而实现;同时,四神聪电针还能预防或降低急性睡眠剥夺对大鼠探索性行为的影响。

电针联合神经导管移植对长缺损正中神经再生和功能恢复的影响

【目的】探讨电针联合神经导管移植修复大鼠正中神经长节段缺损的疗效。【方法】选取成年SD大鼠18只,随机分成对照组、导管组、电针联合导管组,每组6只。建立大鼠左侧正中神经10 mm长节段缺损模型,导管组、电针联合导管组采用壳聚糖神经导管桥接于神经缺损处,并以正中神经缺损作为对照。电针联合导管组在术后第4天开始于患侧上肢天泉、曲泽穴进行电针治疗,每天治疗1次,每周连续治疗5次,共治疗4周。采用网格行走试验及除胶试验评估三组大鼠正中神经的运动与感觉功能恢复情况,并通过免疫荧光染色检测正中神经缺损处神经微丝蛋白(NF)和S100钙结合蛋白β(S100β)的表达以了解受损正中神经纤维的再生情况,对正中神经对应C5节段脊髓组织进行尼氏染色以观察脊髓神经元的存活情况。【结果】在行为学观察中,电针联合导管组大鼠的网格前肢失足率和除胶试验中的接触时间改善程度皆显著优于导管组和对照组(P<0.05);免疫荧光染色显示:经治疗后,电针联合导管组大鼠在正中神经缺损桥接处的近端、远端皆可看到NF和S100β表达,且表达的数目显著多于导管组(P<0.05)。此外尼氏染色显示电针联合导管组在C5节段内左前角运动神经元数量显著多于导管组与对照组(P<0.05)。【结论】电针联合神经导管移植治疗能促进发出正中神经的脊髓神经元存活,同时,电针可能更好地促进长节段缺损正中神经近侧断端的神经纤维再生长入桥接的壳聚糖神经导管内并到达远侧断端,进而促进大鼠损伤侧上肢的运动和感觉功能的恢复。