棉花幼苗根系响应NaCl胁迫的差异蛋白组学分析

为了探讨盐胁迫对棉花幼苗根系蛋白表达谱的影响,丰富棉花在分子水平上应对盐胁迫的机理,本研究对盐胁迫下棉花幼苗根系进行差异蛋白组学分析。试验利用1%Na Cl模拟盐胁迫,对陆地棉品种‘中棉69’进行72 h处理,利用磷酸盐缓冲液研磨后再用月桂酸辅助三氯醋酸沉淀的方法获得棉花幼苗根系蛋白样品,并进行双向电泳分离,获得了分辨率较高、背景清晰的差异蛋白表达图谱。图谱分析显示,共有36个棉花幼苗根系蛋白点响应盐胁迫,其中16个表达量显著上调,20个表达量显著下调。对其中的10个表达差异的蛋白进行了质谱分析和同源蛋白鉴定,结果显示它们分别为抗坏血酸过氧化物酶、烯醇化酶、谷胱甘肽-S-转移酶、醌氧化还原酶、膜联蛋白Anx Gb3、叶绿体Rubiso大亚基蛋白结合α亚基、P23蛋白、果糖激酶、乙醇脱氢酶、腺嘌呤磷酸转移酶1亚型1。本研究结果显示盐胁迫下有部分棉花幼苗根系蛋白有显著差异表达,表明这些蛋白可能参与棉花抗(耐)盐的信号、代谢途径中。

基于Gelatin-SDS-PAGE的植物蛋白酶检测方法

为给不同蛋白酶家族的鉴定及蛋白酶抑制剂的筛选提供参考,以甘蓝型油菜鼎油杂4号为试验材料,建立基于Gelatin-SDS-PAGE的油菜蛋白酶的酶谱检测方法,并对不同温度和pH对油菜叶片中蛋白酶酶谱的影响进行对比。结果表明:甘蓝型油菜叶片蛋白酶在37℃、pH 7.6时,凝胶酶谱中酶解底物被蛋白酶消化后呈现的条带透明度较强,相应区域存在蛋白酶且其活性较强。甘蓝型油菜中叶片蛋白酶主要分布在2个区域,区域1蛋白酶的相对分子质量在180kDa以上,区域2蛋白酶的相对分子质量介于63~100kDa。