猬裂头蚴27kD半胱氨酸蛋白酶基因的克隆、表达及生物信息学分析

目的克隆、表达猬裂头蚴27kDa半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease,CP)基因,并分析其生物学特性。方法提取蛇源猬裂头蚴总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增27kDa半胱氨酸蛋白酶(27kDa CP)基因,克隆入pMD-19T载体,测序正确后将27kDa-CP基因亚克隆入表达载体pET-28a(+),构建pET-28a(+)-27kDa-CP重组质粒,转入大肠埃希菌Transetta(DE3)中,经IPTG诱导,表达目的蛋白27kDa CP。用镍离子柱亲和层析法纯化目的蛋白。表达产物用SDS-PAGE及Western Blotting进行分析,并运用NCBI和ExPASy等有关的生物信息学分析工具,对27CP基因及其编码蛋白进行预测和分析。结果 CP基因序列的开放阅读框长为1 011bp,去除信号肽序列长954bp,登录到GenBank,获得登录号ANA52569。该基因编码一个含317个氨基酸的蛋白多肽,属于Peptidase_C39_like超家族,理论分子量约35 669.9Da,等电点5.92。pET-28a(+)-27kDa-CP重组质粒经IPTG诱导后,蛋白在大肠埃希菌中成功表达,经纯化后的蛋白利用Western blotting检测,证明与预期大小相符,且与猬裂头蚴感染阳性血清有较好的结合反应。结论成功克隆、表达了猬裂头蚴27kDa CP基因,获知CP基因及其编码的氨基酸序列和生物信息学。

彩色多普勒超声联合肿瘤标志物CA125及CA724对卵巢良恶性肿瘤的鉴别诊断价值

目的:探讨彩色多普勒超声联合肿瘤标志物C A125、CA724对卵巢良恶性肿瘤的诊断应用。方法:遴选本院2019年6月—2020年5月接受手术治疗的卵巢肿瘤患者198例,对本次诊断结果进行分析比较。结果:良性卵巢肿瘤组病理诊断的符合率优于恶性肿瘤组,差异明显,可比较(P<0.05);卵巢恶性肿瘤组的CA125与CA724均高于良性肿瘤组,差异明显,可比较(P<0.05);彩色超声诊断与CA125、CA724的指标诊断中,卵巢恶性肿瘤组阳性表现大于良性组,(P<0.05)结论:彩色多普勒超声联合肿瘤标志物CA125、CA724对卵巢良恶性肿瘤的鉴别诊断价值较好,可比较。

父母心理攻击与小学中高年级儿童问题行为的关系:儿童愤怒和悲伤管理的中介作用

以660名小学中高年级儿童及其父母为被试,采用问卷调查法探讨父母心理攻击与学龄中期儿童内外化问题行为之间潜在情绪机制的差异。结果发现:(1)父亲心理攻击显著正向预测儿童外化问题行为,母亲心理攻击显著正向预测儿童内化问题行为;(2)儿童愤怒失调在父亲和母亲心理攻击和儿童外化问题行为之间起中介作用,儿童悲伤失调在母亲心理攻击与儿童内化问题行为之间起中介作用,儿童愤怒应对在母亲心理攻击和儿童内外化问题行为之间存在中介作用。结果表明,父母心理攻击影响儿童内外化问题行为的情绪机制因儿童自身情绪类型与管理策略的不同而表现出差异性。