丝裂亚菊精油抗氧化、抑菌活性及抑菌机理初步研究

对丝裂亚菊精油进行成分分析,测定抗氧化活性和抑菌活性并初步研究其抑菌机理.蒸馏法提取丝裂亚菊精油并对其成分进行气相色谱-质谱(GC-MS)分析;滤纸片法定性测定其抑菌活性,倍比稀释法定量测定最低抑菌浓度和最低杀菌浓度;1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼测定抗氧化能力;扫描电镜观察精油对测试菌种细胞壁膜的影响. GC-MS分析结果显示,丝裂亚菊精油中含有17种化合物,占精油总含量的97.37%,主要成分为β-蒎烯(34.72%)、(1, 8-)桉树脑(24.97%)和马鞭草烯醇(20.39%);抑菌试验发现丝裂亚菊精油对供试菌种均具有较强的拮抗作用,且供试菌种的最低抑菌浓度在2.5~80μL/mL内,最低杀菌浓度在10~80μL/mL内;扫描电镜结果显示植物精油破坏了细菌的壁膜,且浓度越大,对细胞壁膜的损伤程度越大.丝裂亚菊精油对破伤风杆菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞杆菌有很强的抑制性,其抗菌机理为丝裂亚菊精油对细菌细胞的壁膜造成了不可逆转的破坏.

家蝇几丁质酶基因的鉴定与表达分析

目的从基因家族的角度对家蝇几丁质酶进行鉴定与分析,初步探讨其潜在的生物学功能。方法采用生物信息学方法分析家蝇几丁质酶基因的结构、组成及蛋白的理化特性,并构建分子系统树;通过qPCR检测8个基因的时空表达情况和4个基因在3种浓度的20E处理下的表达变化。结果共鉴定20个家蝇几丁质酶基因,N-J树划分为8组;不同基因的外显子数量及结构域组成存在差异性;催化结构域具备昆虫几丁质酶高保守序列;相对分子质量为(26.663~270.602)×10^(3),pI为5.02~10.28。MdCht2、MdCht5、MdCht7和MdCht10在蛹期显著性高表达;MdCht4、MdCht8、MdCht9和MdIDGF7主要在幼虫期高表达;Ⅱ龄幼虫的8种几丁质酶基因呈组织特异性表达,其中在马氏管和肠组织中MdCht4显著性高表达。MdCht4、MdCht5、MdCht7和MdCht10对蜕皮激素20E的刺激呈正向应答,注射后8h和12h时的应激表达量与20E的浓度相关。结论家蝇丁质酶基因呈组织特异性表达,部分几丁质酶基因对蜕皮激素20E的刺激呈正向应答,本文可为家蝇几丁质酶的功能研究及家蝇的防治提供参考。

地衣芽孢杆菌TG116胞外蛋白酶产酶条件与酶学性质

【背景】从独角莲中分离得到的地衣芽孢杆菌TG116是一株对植物病原菌具有广谱抗性作用的生防菌株。【目的】优化TG116的产酶条件并探索其酶学性质,进一步了解其抗菌机制。【方法】采用Folin-Phenol显色法与响应曲面法,优化菌株TG116的产酶条件并研究其蛋白酶的酶学性质。【结果】菌株TG116产酶最适条件为:温度40.83°C,p H 8.01,发酵时间53.74 h,增加通气量可以显著提高酶活力。按照优化后的条件培养48 h后,上清液蛋白酶活力从57.46 U/mL达到了254.07 U/mL。酶学性质研究表明:该酶为碱性蛋白酶,最适反应pH为8.5,最适反应温度为50°C,具有良好的温度和pH稳定性,EDTA对酶活具有强烈的抑制作用,金属离子Mg2+、Ca2+、Na+、Co2+、K+等对酶活也具有一定的抑制作用。【结论】菌株TG116具有良好的p H与温度稳定性,在实际应用中蛋白酶不易失活,可以分解真菌的细胞壁蛋白成分,破坏细胞壁结构,从而抑制甚至杀死病原菌,达到抗菌作用。

哈密瓜内生菌分离实验应用于中职生物学教学的尝试

哈密瓜内生菌分离和纯化周期短,通常为15-20d左右,即可分离出菌种,因此适合作为教学实验内容。为了解哈密瓜的内生菌生物多样性,采用菌悬液涂布法,从冷藏健康哈密瓜的深层、浅层和皮层分离内生菌,并进行分离和统计,经纯化后得到8株内生菌,其中来自哈密瓜皮层的菌株4株,占总菌株数的50%;浅层的有2株,占总菌株数的25%;深层的有2株,占总菌株数的25%。将哈密瓜内生菌的分离与纯化作为中职学校生物技术实验的内容,不仅增进了学生的感性认识,还提高了学生的实操能力,同时激发了学生的学习兴趣和热情。