外源性雌激素对去卵巢大鼠抗氧化能力及海马神经元线粒体的影响

目的用去卵巢大鼠作为雌性更年期的动物模型,探讨补充外源性雌激素对血清抗氧化能力、海马神经元线粒体形态结构的影响及与凋亡的关系。方法用HE染色和电子显微镜观察海马神经元细胞形态和线粒体超微结构的变化,用荧光显微镜检测海马神经元的凋亡,用生化法和RIA测定血清中MDA、SOD和E2等指标。结果未补E2组海马神经元线粒体出现损伤,补充大剂量E2组,其形态基本正常;血清中MDA、SOD与E2浓度呈负相关;未补充E2组海马神经元凋亡明显,随着补充剂量增加,凋亡逐渐减少。结论外源性E2对海马区神经元的保护作用,可能与血清抗氧化能力提高,减少线粒体损伤和海马神经元凋亡有关。

吗啡耐受大鼠海马结构M1受体、c-fos和CREB表达改变

目的观察大鼠海马结构在吗啡耐受中的作用。方法 SD大鼠20只随机分为两组:①对照组:背部皮下注射与耐受组等量的生理盐水;②耐受组:背部皮下一日三次逐日递增的注射盐酸吗啡,连续6天后,停止注射,处死全部大鼠,用免疫组化染色方法观察各组海马结构内的M1受体、环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)和c-fos蛋白表达。结果①在光镜下,HE染色显示吗啡耐受组与对照组相比未发现海马结构形态学有异常改变。②耐受组与对照组相比,组织化学染色发现M1受体表达减少,而c-fos和p-CREB的蛋白表达增加。结论海马结构可能参与了吗啡耐受,这可能与海马结构的M1受体表达减少有关,也与转录因子c-fos和p-CREB激活表达有关。

去卵巢大鼠行为改变与海马结构中突触素表达减少的相关性研究

目的通过去卵巢大鼠的模型,观察雌激素缺乏后对学习和记忆的影响以及突触素表达的情况。方法实验选用成年Wistar大鼠33只,随机分为对照组、去卵巢组、补充雌激素组(去卵巢),每组11只,实验周期为4个月,观察指标:血中的雌二醇含量、记忆跳台潜伏期和错误次数以及海马结构中突触素表达情况。结果①血清中雌二醇浓度:对照组为(46.7±25.3)pg/mL;去卵巢组为(0.3±0.3)pg/mL;补充雌激素组为(144.4±78.9)pg/mL,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。②跳台记忆潜伏期和错误次数:对照组分别为(148.7±19.6)s、(2.9±1.1)次;去卵巢组为(85.6±16.8)s、(7.9±2.9)次;补充雌激素组为(101.6±18.6)s、(4.6±1.1)次;除了去卵巢组的记忆潜伏期与补充雌激素组比较无显著差异外(P>0.05),其他各组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。③海马结构突触素的表达:去卵巢组海马的神经元胞浆内有少许棕黄色的颗粒,呈弱阳性;补充雌激素组与对照组相似,呈强阳性表达。结论雌激素缺乏可以导致大鼠跳台试验的错误次数增加和记忆潜伏期延长,突触素表达减少;补充雌激素有所好转,同时突触素表达增多,推测大鼠雌激素缺乏后的认知功能减退可能与海马结构中突触素表达减少有关。

部分毁损内嗅区皮质区对吗啡戒断大鼠行为学和海马结构CREB表达的影响

目的本探究使用兴奋型神经毒海人藻酸(kainate,KA)部分毁损海马结构信息的主要传入通路内嗅区皮质后,观察吗啡成瘾大鼠戒断时海马结构中CREB蛋白的表达变化及吗啡戒断鼠的行为学的变化。方法实验使用Wistar大鼠,随机均分为4组:①对照组:背部肩胛间皮下注射与实验组等体积的生理盐水;②戒断组:背部肩胛间皮下注射盐酸吗啡;③戒断注生理盐水组:在背部肩胛间皮下注射吗啡,再在内嗅区皮质注射生理盐水;④戒断注KA组:在背部肩胛间皮下注射吗啡,再在内嗅区皮质注射KA。对照组、戒断注生理盐水组和戒断注KA组连续注射6天吗啡,每天按体重增加吗啡量,使之快速成瘾;注射吗啡6天后,不再注射,开始观察戒断症状并在内嗅区皮质注射KA;戒断52h后,处死全部大鼠,用免疫组化染色方法观察各组大鼠海马结构内CREB蛋白的表达。结果①在戒断症状出现的高峰期,单纯戒断组与对照组相比大部分戒断症状的行为学指标都具有阳性意义;戒断注KA组与单纯戒断组或者戒断注射生理盐水组相比较大部分戒断症状的行为学指标下降较明显;戒断注KA组与对照组相比较大部分戒断症状的行为学指标差异不明显;②CREB在对照组、戒断组、戒断注生理盐水组以及戒断注射KA组的表达不同,其中在戒断注射生理盐水组的表达最高,其次为戒断组,在戒断注射KA组表达较低,而在对照组表达最低。结论毁损内嗅区皮质后吗啡成瘾大鼠的戒断症状明显减少,同时海马结构中的CREB表达减少,海马结构可能在大鼠CREB介导的成瘾记忆中有重要作用。

去卵巢大鼠脑海马结构ChAT及ncNOS的mRNA表达

目的 观察去卵巢 76天后雌性大鼠海马结构神经元型一氧化氮合酶 (ncNOS)及乙酰胆碱转移酶 (ChAT)的mRNA表达变化 ,探讨雌激素缺乏对两种酶的短期影响。方法 应用原位杂交方法 ,检测去卵巢 (OVX)组大鼠和假手术组大鼠脑组织海马结构中ncNOSmRNA和ChATmRNA的组织定位和表达强度。结果 ncNOSmRNA和ChATmRNA均以细胞质表达为主。OVX组中海马结构ChATmRNA表达的平均阳性指数为 1.5 0± 0 .6 0 ,假手术组的平均阳性指数为 0 .38± 0 .17,两者间有显著差异 (P <0 .0 5 ,n =5 ) ;OVX组中海马结构ncNOSmRNA表达的平均阳性指数为 1.0 6± 0 .5 1,较假手术组的平均阳性指数 (0 .37± 0 .17)明显增加 (P <0 .0 1,n =5 ) ;在海马的各个分区(CA1区、CA2区、CA3区、DG区 )中 ,OVX组的ncNOSmRNA表达和ChATmRNA表达都明显增加 ,且ChAT和ncNOSmRNA在海马结构中的组织定位有明显的相关性 ,Pearson相关系数为 0 .95。结论 大鼠去卵巢

青年教师在成人机能实验课教学中的几点体会

教师作为实验课的教授者,要充分认识到加强试验基本功训练和多方面学习的重要性,有目的、有意识地学习与实验有关的各种知识;教师还要做实验课的领导者,对参与实验的同学进行合理的分组,打破他们不良的"小群落",让懒惰的同学在新的小组勤劳起来;同时,教师也要做实验课的参与者,参与到学生中,以新接触机能实验学的学生的视角,巧妙的设问,唤醒学生心灵深处沉睡的求知欲和创造力,促使他们经过相互提醒、相互激发,在争辩中不知不觉地完成对已有知识的分析总结,从而达到对理论的认知。

维生素E对老年大鼠卵巢颗粒细胞保护作用机制的探讨

目的:通过观察维生素E(VE)对老年雌性大鼠卵巢凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响及对其抗氧化能力的影响,探讨VE延缓卵巢衰老的作用和机制。方法:采用自然衰老雌性大鼠,给予不同剂量外源性VE,用免疫组化方法观察卵巢颗粒细胞凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax的表达,用Western Blot法检测卵巢Bcl-2、Bax蛋白含量,用生化法测定血清总超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。结果:与成年对照组相比,老年对照组Bcl-2表达明显降低、Bax表达明显升高(P<0.01),血清中SOD活力下降、MDA含量显著升高(P<0.01)。与老年对照组相比,VE组Bcl-2表达升高,Bax表达降低(P<0.05),MDA含量显著减少(P<0.01)。结论:VE可调控凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达和对抗自由基对颗粒细胞的损伤,对卵巢颗粒细胞具有一定的保护作用。

维生素E对老年雌性大鼠抗氧化能力及海马神经元凋亡的影响

目的探讨维生素E(VE)对老年雌性大鼠抗氧化作用和海马神经元凋亡调节作用。方法用生化法测定血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)和丙二醛(MDA);用TUNEL法检测海马神经元凋亡。结果与老年对照组相比,各VE组T-SOD活力有所升高但无显著性差异;各VE组、雌激素组MDA含量均显著降低(P<0.01);各VE组、雌激素组神经元凋亡百分率均显著降低(P<0.01)。结论在老年雌性大鼠中,VE具有较强的对抗自由基损伤作用,并可显著降低神经元凋亡的发生率。

维生素E对老年雌性大鼠卵巢颗粒细胞形态及凋亡的影响

目的观察维生素E对老年雌性大鼠卵巢颗粒细胞结构及凋亡的影响。方法采用自然衰老雌性大鼠,实验组分别给予不同剂量维生素E,用电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构的变化,TUNEL法检测颗粒细胞的凋亡。结果给予外源维生素E组卵巢颗粒细胞形态和线粒体的结构趋于正常,老年对照组则发生明显异常改变,维生素E组卵巢颗粒细胞凋亡百分率降低,中、大剂量维生素E组尤为明显。结论一定剂量的维生素E可抑制卵巢颗粒细胞超微结构的异常改变,减少颗粒细胞的凋亡,改善老年大鼠卵巢的功能。

穿心莲内酯对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的保护作用及机制的实验研究

目的研究穿心莲内酯（Andro）对内毒素（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠的保护作用及机制。方法32只健康成年大鼠随机分成四组。生理盐水对照组、穿心莲内酯对照组、内毒素组和穿心莲内酯治疗组。对内毒素组和穿心莲内酯治疗组大鼠通过鼠尾静脉注射LPS（5mg／kg）。给予LPS后3h．6h及12h，对穿心莲内酯对照组和穿心莲内酯治疗组大鼠腹腔注射穿心莲内酯（10mg／kg）。注射LPS后24h收集各组支气管肺泡灌洗液（BALF）及肺组织。检测BALF中肿瘤坏死因子-α（TNF—d）、白细胞介素-1p（IL-1p）及细胞间黏附因子-1（ICAM-1）的浓度；检测肺组织中的丙二醛（MDA）、核转录因子-κB（NF—κB）浓度及髓过氧化物酶（MPO）活性，同时进行动脉血气分析。结果与LPS组比较，穿心莲内酯治疗组TNF-α降低（P〈0．05），而IL-1B和ICAM-1明显降低（P〈0．01）。穿心莲内酯治疗组与LPS组比较，MPO活性降低（P〈0．05），而MDA和NF—KB明显降低（P〈0．01）。穿心莲内酯治疗组与LPS组比较，PaO，明显升高（P〈0．01），pH值升高（P〈0．05），PaCO：降低（P〈0．05）。结论穿心莲内酯通过抑制NF—KB激活对LPS诱导的ALI具有保护作用。

酶电极法测定谷物淀粉含量的研究

〔目的〕用生物传感器法测定淀粉含量 ,以简化淀粉测定的操作程序 ,提高检测速度 ,降低检测成本。〔方法〕制备酶电极 ,做最佳条件实验及酶电极的性能实验。〔结果〕测试最佳条件为 :p H=4.4,响应时间 4min,测定温度 30℃ ;酶电极的性能 :线性范围 :0 .1%～ 0 .5 % ;回归方程为 :y=0 .0 16 99x- 0 .15 1,r=0 .9980 ;重现性 :RSD%=4.39;回收率 :75 %～ 86 %。测定 6种谷物淀粉含量并与容量法测定结果进行比较 ,经统计学处理 ,P>0 .0 5。〔结论〕该方法可用于测定淀粉含量。其优点是 :操作简单、灵敏度高、测定速度快。

延髓头端腹外侧部在脑梗死合并心律失常中的作用

目的探讨延髓头端腹外侧部在脑梗死合并心律失常中的作用及可能机制。方法 112只Wistar大鼠随机分为3组:对照组(n=16)、假手术组(n=16)和模型组(n=80)。模型组再随机分为造模后30 min、1 h、2 h、4 h和8 h组,每组16只,观察脑梗死后延髓头端腹外侧部神经元活动的变化。另40只大鼠随机分为5组:对照组(n=8)、生理盐水组(10μL,n=8)、L-谷氨酸组(0.5μmol,10μL,n=8)、谷氨酸非选择性NMDA受体拮抗剂MK-801(4 nmol,10μL)加L-谷氨酸组(n=8)和MK-801加模型组(n=8),以观察谷氨酸在脑梗死诱发心律失常中的作用。心电图用生物信号采集系统采集。脑梗死动物模型制作采用大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO),给药途径为侧脑室注射,以Fos蛋白作为神经元激活的标志物。结果对照组和假手术组大鼠心电图均无明显异常,模型组大鼠心律失常的发生率为78.75%(63/80),明显高于对照组(P<0.01),且在心律失常发生的相应时间点延髓头端腹外侧部Fos蛋白表达明显增加(P<0.01)。侧脑室注射生理盐水组心电图无明显异常,侧脑室注射L-谷氨酸后心律失常发生率为87.5%(7/8),明显高于生理盐水组(P<0.01),心律失常类型类似于模型组,同时延髓头端腹外侧部Fos蛋白表达明显增高(P<0.05)。MK-801预处理后再造模和MK-801预处理后再侧脑室注射L-谷氨酸组,均无心律失常发生,延髓头端腹外侧部Fos蛋白表达无显著性变化(P>0.05)。结论脑梗死合并心律失常的发生与延髓头端腹外侧部活动增强有关,且此作用由谷氨酸激活NMDA受体介导。

发挥生理学CAI教学优势 提高继续医学教育实验课教学质量

生理学CAI实验教学具有教学方式灵活、多样、直观、生动 ,分析结果科学 ,实验效率高等特点和优势 ,有利于理论教学 ,有利于对学生能力与素质的培养 ,有利于提高继续医学教育实验课教学质量。

生理学双语教学浅析

双语教学是目前教学改革的热点.随着生命科学领域研究的飞速发展和水平的不断提高,要求生理学的教学实行双语.讨论了生理学双语教学的必要性及其开展的关键问题、面临的挑战和引发的思考.

雌二醇对去卵巢大鼠血管内皮细胞功能的影响

目的本实验用去卵巢大鼠建立更年期动物模型,给予不同剂量外源性雌二醇(E2),检测血清中一氧化氮(NO)和内皮素(ET)含量的变化,观察E2对心肌和血管细胞凋亡以及对心肌和血管结构形态的改变,进一步探讨E2对于心脏及血管内皮细胞功能的影响。方法用放射免疫分析方法(RIA)测定血清中E2和ET;用酶法测定血清中NO的含量;用荧光标记法观察心肌和血管细胞凋亡;用电子显微镜(EMS)观察心肌和血管超微结构。结果NO浓度随E2水平增加而升高,而ET浓度则随E2水平升高而降低,心肌和血管细胞凋亡以及超微结构损伤与E2含量呈负相关。结论适量外源性E2对心血管系统的保护机制可能促进NO生成、抑制ET合成,同时抑制心肌和血管细胞凋亡及超微结构的损伤。

浅析生理学留学生本科教学

2006年上半年，来自尼泊尔、巴基斯坦、印度等国家的留学生踏进了哈医大的校园。对外国留学生实行全英语教学是我校教学实践中新的尝试，结合生理学首次教学的体会，总结、分析其教学的相关问题并提出相应的对策，探讨更有效的留学生全英语教学方法。

发挥CAI教学优势 提高生理学实验教学质量

生理学CAI实验教学具有教学方式灵活、多样、直观、生动,结果分析科学,可以提高实验效率等特点和优势,有利于理论教学和对学生能力与素质的培养.

杏仁核在脑梗死合并心律失常中的作用

目的探讨杏仁核在脑梗死合并心律失常中的作用及可能机制。方法为观察脑梗死后杏仁核神经元活动的变化,将48只大鼠随机平均分为假手术组,脑梗死后30 min、1 h、2 h、4 h和8 h组。为观察谷氨酸在脑梗死诱发心律失常中的作用,另取40只大鼠随机平均分为空白对照组、生理盐水组、L-谷氨酸组、MK-801预处理后侧脑室注射L-谷氨酸组和MK-801预处理后再进行中动脉栓塞(MCAO)组。通过大鼠大脑MCAO建立脑梗死模型,用生物信号采集系统采集心电图,用Fos蛋白作为神经元激活标志物。结果假手术组心律失常的发生率为0,脑梗死组心律失常的发生率为78.75%,明显高于假手术组(P<0.01),且在心律失常发生的相应时间点杏仁核Fos蛋白表达明显增加(P<0.01)。空白对照组和生理盐水组心律失常的发生率均为0,L-谷氨酸组心律失常的发生率为87.5%,明显高于空白对照组(P<0.01),且L-谷氨酸组杏仁核Fos蛋白表达明显增高(P<0.05)。MK-801预处理后MCAO组和MK-801预处理后侧脑室注射L-谷氨酸组心律失常的发生率均为0,且杏仁核Fos蛋白表达均无明显变化(P>0.05)。结论脑梗死后杏仁核活动的增强可能参与了脑梗死后心律失常的发生发展,且此作用可能由谷氨酸激活门冬氨酸受体所介导。

维生素E对老年雌性大鼠心肌细胞雌激素受体α的影响

目的以雌性自然衰老大鼠为模型,探讨维生素E(VE)对心肌细胞保护作用的机制。方法以注射植物油的老年大鼠为对照,给予模型大鼠经腹腔注射VE注射液5mg/kg(小剂量组)、15mg/kg(中剂量组)、60mg/kg(大剂量组),连续注射9周,用生化比色法测定血清中的低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)含量变化,放免法检测血清雌二醇(E2)水平,免疫组化法观察心肌雌激素受体α(ERα)的表达。结果各VE实验组血清LDL、HDL、E2水平和ERα表达均高于老年对照组。结论VE可通过增加血清中的LDL、HDL、E2含量及心肌细胞ERα的数量,减少心肌细胞的损伤,对心肌细胞的起到保护作用。

一氧化氮对福尔马林实验大鼠痛觉行为反应的作用

目的 通过使用不同剂量一氧化氮合酶抑制剂L-NNA研究NO对福尔马林致痛模型大鼠痛觉行为反应的作用。方法 腹腔注射L-NNA_1小时后,进行大鼠福尔马林致痛实验,观察L—NNA的镇痛效应。结果 腹腔注射不同剂量的L-NNA(10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg)产生明显的镇痛作用,并有剂量依赖关系。结论 研究结果表明,一氧化氮在伤害性痛觉调制中起重要作用,一氧化氮合酶抑制剂 L-NNA有明显的镇痛作用。