三产地卤虫卵及无节幼体类胡萝卜素含量的比较

以超高效液相色谱仪为分析平台,选用ACQUITY UPLC^(■)BEH C181.7μm(2.1 mm×150 mm Column)色谱柱,通过调节流动相比例及流速等参数,构建了检测卤虫(Artemia)类胡萝卜素(β-胡萝卜素、角黄素、海胆酮、玉米黄质和虾青素)含量的方法,测定了青海、内蒙古和渤海湾产的卤虫去壳卵、初孵无节幼体以及在盐度25和水温27℃~28℃的人工海水中饥饿48 h的无节幼体体内类胡萝卜素的含量。结果表明:三产地的去壳卵及初孵无节幼体内均不含有β-胡萝卜素、玉米黄质和虾青素,仅含有角黄素和海胆酮。内蒙古产卤虫去壳卵角黄素含量最高(4.78μg/万个),渤海湾产卤虫去壳卵海胆酮含量最高(0.10μg/万个),青海产卤虫去壳卵角黄素含量(3.36μg/万个)和海胆酮含量(0.08μg/万个)最低。内蒙古产卤虫初孵无节幼体内角黄素含量最高(6.65μg/万只),但其海胆酮含量最低(0.07μg/万只),而青海产卤虫初孵无节幼体角黄素含量(4.17μg/万只)最低和海胆酮含量(0.11μg/万只)最高。饥饿过程中三产地卤虫无节幼体角黄素和海胆酮的含量均随着饥饿时间的延长而降低,且饥饿过程中三产地卤虫无节幼体内均未检测到β-胡萝卜素、玉米黄质和虾青素,表明卤虫无节幼体体内不能合成虾青素,但可能存在β-胡萝卜素-海胆酮-角黄素的代谢通路。

基于UPLC对卤虫体内类胡萝卜素检测方法的建立

通过优化梯度洗脱条件和类胡萝卜素提取条件,探索建立基于超高效液相色谱(ultraperformanceliquid chromatography,UPLC)检测卤虫体内类胡萝卜素组成及含量的有效方法.结果表明:类胡萝卜素提取选用丙酮-甲醇(体积比为2:1)作为提取溶剂,在超声波处理30 min、65℃浸提20 min的条件下提取效果最佳.UPLC选用ACQUITYH-ClassBEHC18色谱柱(1.7μm,2.1 mm×150 mm)以及二极管阵列(PDA)检测器.梯度洗脱条件:10%超纯水+90%甲醇-乙腈溶液(体积比为3:7)16 min,20%甲基叔丁基醚+80%甲醇-乙腈溶液(体积比为3:7)14 min,流量0.3 mL/min,进样量10μL,柱温25℃,检测波长475 nm.在此条件下可以在30 min内有效检测出卤虫初孵无节幼体中的角黄素和海胆酮的含量,分别为(572.60±11.60)μg/g和(18.02±0.41)μg/g(以干质量计),且验证了无节幼体体内不含虾青素、玉米黄质和β-胡萝卜素.该方法快速、准确、灵敏、有效,为后续卤虫类胡萝卜素营养强化及类胡萝卜素代谢模型的建立提供了有效的技术手段.