新型装配式流体力学综合实验装置的设计

流体力学是高等教育理工类学科基础力学教育的重要分支之一,其教学实验众多,但多数传统实验装置的某些组成部分之间有很大相似性,若针对某一特定实验设计独立实验装置将造成极大的资源及空间浪费。在充分考察现有实验装置相似组成部分后对其重新设计整合,提出了一种新型装配式流体力学综合实验装置,可在不同组合形态下分别进行雷诺、管嘴出流、卡门涡街等实验。经测试,此装配式流体力学综合实验设备具有功能齐全、空间占比低、成本小、稳定性好、耐腐蚀性高、可拓展性强等优点。

地下水位升降过程中的黏土地基孔压变化试验研究

季节性丰枯水期和暴雨导致的地下水位升降是否会导致黏土地基中的地下结构上浮失效是目前备受关注的问题。采用研制的装置开展试验,参照3个深度处土体的应力状态,先对黏土试样施加初始固结压力和水压使其达到对应深度处的自重应力,后增减水压模拟水位上升、回落和下降。结果表明:当水位上升时,孔压随着时间的延长而增大,15 h后进入稳定状态,并在达到理论孔压的92%以上后缓慢增长,最后接近理论值,最终与理论值最大相差5%;当水位回落和下降时,孔压随着时间的延长而减小,15 h后进入稳定状态,在达到理论孔压的97%以上后缓慢降低,最终与理论值最大相差4%。测试结果的进一步分析发现,当水力梯度为0.07~4.40时,孔压处于稳定状态,土体越密实,孔压稳定时的水力梯度越大,而实际工程中20%幅度的升降水位形成的水力梯度约为0.067,未达到引起孔压变化的下限值,故其短期内对基底水压基本没有影响,地下结构不会上浮。

临床HIV感染者血液样本的保藏与利用

当前,艾滋病——获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)仍是人类面临的世界性且极具威胁性的重大公共卫生问题之一,其病原体为人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)。HIV感染会导致CD4+T淋巴细胞的数量发生进行性减少,机体免疫功能遭受严重破坏,从而并发各种机会性感染及肿瘤等疾病[1]。

HIV-1潜伏库研究进展

HIV-1在未经治疗的艾滋病患者体内虽可以持续复制,但也可潜伏在细胞内以逃避宿主的免疫清除,这一现象即病毒潜伏。病毒潜伏对抗病毒治疗带来了挑战,也引起人们的高度关注。本文对HIV-1病毒潜伏库的研究进展进行了综述。

HAART早期AIDS患者CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的变化及其与免疫活化关系的研究

目的了解高效抗反转录病毒联合疗法(highly active antiretroviral the rapy,HAART)早期AIDS患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(regulatory Tcell,Treg)的变化规律,探讨抗病毒治疗过程中Treg细胞的作用。方法前瞻性分析21例接受HAART规律治疗的AIDS患者,收集患者服药前及服药第2、4、8、12周时的静脉血,采用流式细胞仪胞内染色技术检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的水平,分析Treg细胞在治疗过程中的变化规律,以及Treg细胞的变化与免疫活化间的相关性。结果 HAART治疗开始,Treg细胞计数呈逐渐上升的趋势,前4周呈现快速上升,而后上升速度减慢,Treg百分比变化也有相似的规律;CD8+CD38+表达水平随治疗时间延长而下降,未治疗时Treg细胞计数与免疫活化水平呈负相关,治疗后Treg细胞计数4周内的变化与12周CD8+CD38+水平呈负相关,即治疗开始后,前4周内Treg细胞增加越明显,治疗3个月时免疫活化水平下降越明显。结论抗病毒治疗过程中,活化CD8+淋巴细胞比例的下降与外周血中Treg细胞数的增加相关。Treg细胞数量恢复越早,活化CD8+淋巴细胞比例下降越明显。

HIV感染者调节性T细胞消耗可导致HIV特异CD8^+细胞凋亡

目的了解在HIV感染患者CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞(Treg)的降低是否能够引起HIV特异CD8+细胞过度凋亡。方法本研究对75例没有治疗的HIV患者进行研究,检测其外周血中Treg细胞计数及CD8+细胞的活化及凋亡情况并分析其相关性;同时纯化Treg细胞及CD8+细胞,在体外进行共培养,用五聚体检测HIV特异CD8+细胞的活化情况。结果在HIV感染患者,Treg细胞与CD8+细胞的活化及凋亡呈负相关,Treg细胞能够抑制HIV特异的CD8+细胞的凋亡。结论 HIV感染患者Treg细胞的降低可导致CD8+细胞、尤其HIV特异CD8+细胞的凋亡增加。

庚型肝炎病毒及其与人类免疫缺陷病毒共感染的研究进展

庚型肝炎病毒（HGV）是最近几年发现的、归于黄病毒科的RNA病毒，HGV呈全球范围分布，人体感染后无明显的肝功能损害。由于人类免疫缺陷病毒（HIV）和HGV有共同的传播途径，两者均主要通过血液传播，因此HIV／HGV共感染的现象较常见。我们就HGV及HIV／HGV共感染的研究进展，综述如下。

宿主与HIV-1病毒的相互作用

人类获得性免疫缺陷综合征(AIDS)主要由人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)引起。近10年对HIV-1编码基因的功能研究结果促进了抗病毒药物的发展,如能直接抑制HIV-1基因编码的酶(逆转录酶和蛋白酶)的药物。但由于病毒突变所导致的耐药性及药物的不良反应等使这些药物不能很好的控制AIDS的发展。若没有合适的宿主因素,病毒将不能进行复制及引起疾病,通过调控宿主因素有可能防治病毒引起的疾病。本文对近年宿主与HIV-1相互作用的研究进展作简要论述。

传染病专业研究生培养过程中存在的问题及带教体会

随着越来越多的人选择接受研究生教育,传染病专业的研究生也越来越多。与其它疾病相比,传染病专业有其自身的特点并且新发传染病不断出现,对研究生科研能力的要求也越来越高。传染病专业的研究生就业压力也越来越大。传染病专业研究生在短短三年左右的时间里,除了要兼顾学习临床技能和科研,还要掌握新发传染病的有关知识及花费大量的时间找工作。本文将对传染病专业研究生培养过程中存在的问题进行总结。

HAART后血液及精液中HIV水平的比较研究

目的高效抗逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)6个月后,对HIV感染者血浆及精浆中的HIV RNA水平进行比较研究,对外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)及精液细胞中的HIV DNA水平进行比较研究。方法收集HAART 6个月后血液中HIV RNA下降到检测不出的16例患者的精液和血液样本,采用实时定量PCR的方法检测其血浆及精浆中的HIV RNA水平,PBMC及精液细胞中的HIV DNA水平。结果 16例患者的精浆中有15例可检测到HIV RNA,在PBMC及精液细胞中均可检测到HIV DNA,且二者HIV DNA水平差异无统计学意义。结论 HAART 6个月后,大多数患者精液中仍可检测到HIV RNA及HIV DNA。

四种全自动尿沉渣分析仪对尿液中红细胞和白细胞的检测性能研究

目的评价FUS-200、IQ-200、AVE-764B、UF-500i四种尿沉渣分析仪对尿液中红细胞(RBC)、白细胞(WBC)的检测性能。方法对FUS-200、IQ-200、AVE-764B、UF-500i四种尿沉渣分析仪检测尿液中RBC、WBC的批内精密度、携带污染率、线性范围、干扰实验进行评价。选择100例阳性尿样本分别用以上四种尿沉渣分析仪检测RBC、WBC,并将检测结果与人工镜检的结果进行对比分析。结果 FUS-200、IQ-200、AVE-764B、UF-500i四种尿沉渣分析仪检测尿液中RBC的批内精密度分别为7.0%、5.8%、6.3%、3.2%,携带污染率分别为0、0.04%、0、0.09%;检测WBC的批内精密度分别为9.8%、8.2%、4.9%、5.9%,携带污染率分别为0、0.41%、0、0.12%。当RBC在0～15 000个/μl、WBC在0～10 000个/μl范围内时,四种尿沉渣分析仪的测定值与理论值的线性相关系数R2均>0.99。UF-500i、FUS-200修饰后、IQ-200修饰后、AVE-764B修饰后的RBC及WBC检测结果与人工镜检的结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05),真菌和结晶会干扰四种尿沉渣分析仪对RBC和WBC的检测结果。结论 FUS-200、IQ-200、AVE-764B、UF-500i四种尿沉渣分析仪检测尿液RBC和WBC的精密度高、线性好、携带污染率低,可用于临床样本的初筛,但不能完全取代人工镜检。

北京市部分男男同性恋人群中HIV-1分子流行病学研究

目的了解北京市部分男男同性恋(men who have sex with men,MSM)人群HIV-1的分子流行情况,监测该地区人群HIV毒株的最新流行情况。方法提取17例男男同性恋者HIV-1抗体阳性样本全血基因组DNA,直接进行巢式PCR扩增HIVenv基因C2-V5区及gag基因P17-P24区,对PCR产物进行核苷酸序列测定和分析,确定基因亚型。结果17例患者中,共存在CRF01-AE、B亚型和CRF07-BC3种亚型,其中CRF01-AE9例(52.94%),B亚型5例(29.41%),CRF07-BC3例(17.65%)。结论小样本量的流行病学调查显示,北京地区部分男男同性恋人群中主要存在CRF01-AE、B和CRF07-BC3种亚型;CRF01-AE已取代B亚型而成为北京市MSM人群中HIV主要流行亚型,CRF07-BC重组亚型在北京市MSM人群中增长迅速。

立氏立克次体外膜蛋白B基因片段的克隆与表达

目的立氏立克次体(Rickettsiarickettsii)外膜蛋白B(OmpB)基因(ompB)片段的克隆与表达。方法采用PCR方法,从立氏立克次体基因组中扩增其ompB基因片段,将该基因片段与原核表达载体pQE30连接,构建重组原核表达质粒pQE30/ompB;将pQE30/ompB转入大肠杆菌细胞内,用IPTG诱导转化大肠杆菌表达目的基因。结果获得长为1188bp的ompB基因片段,SDS-PAGE分析发现pQE30/ompB转化菌表达了一44kDa蛋白,该蛋白与立氏立克次体免疫兔血清在免疫印迹分析中呈阳性反应,与其它立克次体免疫血清反应呈阴性,用该重组蛋白免疫血清做间接免疫荧光,检测立氏立克次体结果为阳性,而检测贝氏柯克斯体、恙虫病立克次体和普氏立克次体的结果为阴性。结论pQE30/ompB转化的大肠杆菌表达了ompB基因片段,所产生的重组蛋白具有立氏立克次体抗原特异性和良好的免疫反应性。

HIV感染病例流行特征研究

目的研究人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染病例流行特征。方法抽取330例首都医科大学附属北京佑安医院性病艾滋病临床诊疗中心收治的2003年1月至2007年12月确诊的获得性免疫缺陷综合征(acquiredimmuno deficiency syndrome,AIDS)患者为调查对象,回顾性分析HIV/AIDS患者HIV传播途径,HIV-1/乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)/丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)/梅毒共感染,艾滋病发病比例变化等流行病学资料。结果①随机选取诊疗中心收治的330例HIV/AIDS患者,其性传播途径和经血传播比例在2003至2007年分别为30%vs 60%、24.8%vs 75%、26.9%vs 70%、67.9%vs 20%、84.9%vs 10%。②HIV-1/HBV共感染患者比例2003至2007年分别为4%、10%、14%、21%、22%;而HIV-1/梅毒共感染患者比例为15%、5%、16%、23%、30%;HIV-1/HCV共感染患者比例为60%、62%、51%、18%、8%。③HIV/AIDS患者中AIDS患者比例逐年上升,由2003年的6.5%上升至2004年的9.5%、2005年的20%、2006年的25%和2007年的26.3%。结论①HIV的性传播途径与HIV-1/HBV、HIV-1/梅毒共感染比例均呈上升趋势,而经血传播途径及HIV-1/HCV共感染比例均呈下降趋势,北京地区HIV的主要传播途径由经血传播途径转变为性传播途径;②HIV/AIDS患者中AIDS患者比例有逐年上升趋势。

调节性CD4^+T细胞及非调节性CD4^+T细胞与HIV/AIDS患者疾病进展关系的研究

目的分析比较中国HIV感染者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+regulatory T cells,Treg)及非Treg细胞与疾病进展的关系,探讨Treg细胞在HIV感染过程中的作用。方法选取76例HIV/AIDS患者,根据其CD4+T细胞计数水平不同分为3组,A组CD4<200个/μL,B组CD4200～400个/μL,C组CD4>400个/μL。采用流式细胞仪胞内染色技术检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的水平,并分析其与CD4计数及病毒载量的相关性。结果随着疾病的进展,Treg细胞百分比逐渐升高,各组间差异有统计学意义;Treg细胞及非Treg细胞的绝对计数均明显下降,且以非Treg细胞下降为主;Treg绝对计数与病毒载量呈负相关(P<0.05)。结论中国HIV感染者随着疾病进展,辅助性T细胞等非Treg细胞的数量下降,对机体免疫保护能力降低,而Treg细胞数量及功能的下降使其对机体的过度免疫活化的抑制作用减弱,病毒复制,加剧病情进展。

CD4^+T淋巴细胞亚群研究进展

在免疫应答期间．外周血T淋巴细胞发育为功能不同的亚群．并通过分泌特殊的细胞因子．影响细胞免疫，调节体液免疫应答。T淋巴细胞按表型不同可分为CD4^＋和CD8^＋两大亚群．它们多数表达T细胞受体．但识别的抗原和所受的主要组织相容性复合体（major histoconapatibility complex, MHC）的限制性不同。现将近年来关于CD4^＋T淋巴细胞亚群的研究进展综述如下。

20例HIV/AIDS患者耐药结果分析

目的对高效抗逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)失败的HIV/AIDS患者,进行回顾性基因型耐药检测,了解HAART过程中HIV-1耐药位点的产生,分析基因型耐药检测在HAART过程中的必要性及指导意义。方法采用Versant HIV-1RNA3.0检测病毒载量;采用TriTEST CD4FITC/CD8PE/CD3PerCP Reagent检测CD4+T淋巴细胞计数;采用Trugene HIV-1Genotyping Kit和OpenGene DNA系统进行基因型耐药检测;用Blast等分子生物学软件进行HIV-1亚型分析。结果20例患者中,17例保存有治疗前的血浆标本,其中1例在治疗前即存在非核苷类逆转录酶抑制剂(non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors,NNRTIs)耐药相关突变。20例患者均进行了治疗后耐药检测,其中3例未检出耐药相关突变。其他17例检出耐药相关突变,其中13例出现NNRTIs耐药相关突变;突变位点主要为K103N、Y188L、Y181C、V106M和G190A;11例显示有核苷类逆转录酶抑制剂(nucleoside/nucleotidereverse transcriptase inhibitors,NRTIs)耐药相关突变,突变位点主要为M184V、T/215Y/F、D67N、K70R以及K219E/Q;3例出现蛋白酶抑制剂(protease inhibitors,PIs)耐药相关突变,其中主突变为M46I/L、V82F/A,而次级突变中以M36I、L63P出现的频率最高。20例患者中B亚型9例(45%,9/20),CRF01_AE重组亚型5例(25%,5/20),CRF07_BC重组亚型5例(25%,5/20),CRF06_CPX1重组亚型1例(5%,1/20)。结论对治疗失败的患者进行基因型耐药检测可以帮助医生判断HAART失败的原因,并指导治疗方案的优化;亚型分析显示HIV-1病毒亚型的流行与感染途径之间存在明显的联系。

血样的不同处理对HIV-1病毒载量检测值的影响

目的观察血样本存放时间、存放温度及冻融次数对HIV病毒载量检测值的影响。方法收集同一HIV感染者的抗凝血标本,在不同时间分离血浆,并在不同温度下保存不同时间或经过不同次数的冻融,应用HIV-1核酸序列扩增技术(NASBA法)检测各样本的病毒载量进行比较。结果与全血样本相比,以血浆形式保存的样本HIV病毒载量更加稳定;病毒载量的下降主要发生在采血后的6h内;-20℃保存的血浆样本反复冻融3次,病毒载量会显著下降。结论对于运送HIV病人的外周血进行病毒载量检测时,应尽量以低温和血浆形式保存,并尽快的送到检测单位。

AIDS患者γδ T细胞能够杀伤自体HIV感染的CD4^+ T细胞

目的建立自体人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的CD4+T细胞模型,检测获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者γδT细胞对自体HIV感染的CD4+T细胞的杀伤作用。方法分离健康志愿者和未治疗的AIDS患者外周血单个核细胞(PBMCs),磁珠分选获得高纯度的CD4+T细胞,加入植物血凝素(PHA)和白细胞介素-2(IL-2)共同培养,建立自体HIV感染的CD4+T细胞模型。流式细胞术检测HIV-P24+CD4+T细胞的比例。乳酸脱氢酶(LDH)法测定γδT细胞的细胞毒作用。结果培养到第10天时,HIV-P24+CD4+T细胞的比例达到最高值。AIDS患者的γδT细胞不仅能够杀伤自体HIV感染的CD4+T细胞(细胞溶解率为71.1±97),而且对HIV也有一定的杀伤作用(细胞溶解率为24.2±18.2)。而健康志愿者γδT细胞对自体CD4+T细胞没有杀伤作用(细胞溶解率为4.3±10.1)。结论 AIDS患者γδT细胞能够杀伤自体HIV感染的CD4+T细胞,为采用γδT细胞过继免疫治疗AIDS提供了依据。