三法三穴推拿对坐骨神经损伤大鼠的即刻镇痛作用及其机制

目的观察三法三穴推拿对坐骨神经损伤大鼠的即刻镇痛作用并探讨其机制。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组及推拿组,每组6只。模型组及推拿组建立轻型坐骨神经慢性压迫性损伤模型模拟临床神经病理性疼痛,假手术组仅暴露神经并缝合。推拿组在造模后7 d采用按摩推拿手法模拟仪进行三法三穴推拿干预,假手术组及模型组进行等时间的抓握束缚。分别于造模前(T_(1))、造模后推拿前(T_(2))、推拿后(T_(3))采用机械缩足反射阈值及热缩足反射潜伏期评价三法三穴推拿即刻镇痛效果;评价结束后取大鼠腰膨大节段脊髓背角组织,采用Western blotting法检测各组大鼠脊髓背角组织嘌呤能受体P2Y12(P2RY12)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白。结果与假手术组同时点比较,模型组、推拿组在T_(2)及T_(3)时点MWT、TWL均降低(P均<0.05);与模型组同时点比较,推拿组T_(3)时点MWT、TWL均升高(P均<0.05)。模型组脊髓背角组织P2RY12、p-p38 MAPK、TNF-α蛋白表达均高于假手术组、推拿组(P均<0.05),假手术组及推拿组P2RY12、p-p38 MAPK、TNF-α蛋白表达比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论三法三穴推拿在坐骨神经损伤大鼠中具有较好的即刻镇痛效果,其机制可能为抑制小胶质细胞P2RY12/p38 MAPK/TNF-α通路从而缓解神经病理性疼痛。

雨课堂在生物化学课程民汉合班形成性评价中的应用初探

目的:探索雨课堂在民汉合班生物化学课程形成性评价中的应用效果。方法:选取新疆医科大学临床医学专业2017级和2018级民汉合班学生共642人作为研究对象,其中生物化学课程结束时,仅采用终结性评价的313名学生作为对照组;采用雨课堂形成性评价和终结性评价相结合的329名学生作为试验组。从形成性评价各部分成绩、及格率以及问卷调查三方面评价效果,应用SPSS 19.0对数据进行描述性分析和t检验。结果:试验组和对照组的期末综合成绩有统计学意义(t=-7.516,P=0.000);将少数民族学生成绩单独统计后,试验组与对照组有统计学差异(t=-4.982,P=0.000)。与对照组相比,试验组学生的及格率提高,并且试验组少数民族学生的及格率也高于对照组。调查问卷结果显示,85.95%的学生认可终结性评价与形成性评价相结合的评价方式,约80%的学生在自主学习及分析、解决问题能力方面得到提高。结论:线上线下相结合的雨课堂形成性评价,有助于临床医学专业提高民汉合班生物化学课程的教学质量。

3T3-L1前脂肪细胞分化过程中chemerin基因表达水平的变化

目的探讨体外培养3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中chemerin基因表达水平的变化与脂肪细胞分化、脂质积聚之间的关系。方法应用3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素、地塞米松联合方案诱导其分化为成熟的脂肪细胞,采用油红O染色观察脂肪细胞分化及脂质聚集情况,并应用RT-PCR和Western印迹技术检测chemerin基因表达的变化。结果 3T3-L1脂肪细胞分化过程中,chemerin mRNA表达水平逐渐升高,分化至第6天达到较高水平且逐渐趋于稳定。利用Western印迹可观察到,随着脂肪细胞分化成熟,chemerin基因的蛋白表达水平逐渐增高。结论 chemerin mRNA及蛋白质在脂肪细胞分化成熟过程中表达水平升高,提示其很有可能参与了脂肪细胞分化和脂质聚集。

β_2肾上腺素能受体基因R16G多态与哈萨克族男性肥胖的相关性

目的探讨β2肾上腺素能受体基因R16G多态在哈萨克族人群肥胖发病中所起的作用。方法应用Taqman技术检测331例哈萨克族正常体重者,380例超重者以及232例肥胖者中ADRB2基因R16G多态性,观察各基因型和等位基因频率在不同BMI水平的分布及其与超重肥胖的关系。结果哈萨克族正常体重组、超重组与肥胖组组间基因型和等位基因频率的分布无统计学差异,但突变型纯合子基因型频率在哈萨克族超重组及肥胖组有增高趋势;将哈萨克族人群按性别分层并用logistic回归模型校正年龄、血压之后,显示男性组间基因型频率分布存在统计学差异(χ2=8.707,P=0.013),携带突变型纯合子(AA基因型)的个体患肥胖的风险为GG基因型的2.18倍。结论ADRB2基因R16G多态与哈萨克族男性肥胖相关,AA基因型可能是哈萨克族男性肥胖的风险因子。

重组chemerin蛋白对3T3-L1脂肪细胞visfatin、MCP-1基因表达的影响

目的重组chemerin蛋白对3T3-L1脂肪细胞visfatin、MCP-1等基因表达的影响。方法 3T3-Ll前脂肪细胞诱导分化至第10天成熟后,分别以不同浓度(0、25、50、100、200 ng/ml)的chemerin蛋白干预12、24、48 h后收集细胞,RT-PCR法检测visfatin、MCP-1等基因的表达情况。结果 chemerin蛋白作用于成熟的3T3-Ll脂肪细胞24 h后,100 ng/ml干预组visfatin的表达与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),50、100、200 ng/ml的chemerin蛋白干预组MCP-1表达与未干预组比较差异显著(均P<0.05);作用48 h后,50、100、200 ng/ml的chemerin蛋白干预组与对照组相比均上调了visfatin与MCP-1的表达(均P<0.05)。结论重组chemerin蛋白上调成熟的3T3-Ll脂肪细胞visfatin与MCP-1基因的表达。

β_2肾上腺素能受体基因多态性与心血管相关疾病

近年来,越来越多的研究结果表明β2肾上腺素能受体基因多态性与高血压、肥胖等疾病密切相关。通过对二者的研究,我们可以从分子水平上探讨心血管、肥胖等疾病的病因,从而为这些疾病的防治提供新的思路。

β_2肾上腺素能受体基因多态性与维吾尔族肥胖的关系

目的探讨β2肾上腺素能受体(β2-adrenergic receptor,β2-AR or ADRB2)基因R16G、Q27E多态性与新疆维吾尔族人群肥胖发生的相关性。方法采用Taqman技术对新疆754例维吾尔族受试者进行β2-AR基因R16G、Q27E位点基因分型,并分析各基因型和等位基因频率在不同体重指数(BMI)水平的分布及其与超重、肥胖的关系。结果维吾尔族人群中超重组与肥胖组的血压、甘油三酯及胆固醇水平显著高于正常体重组(P<0.05)。R16G、Q27E两个多态位点的基因型频率与等位基因频率在正常体重组、超重组与肥胖组之间的分布均无统计学差异(P>0.05);按性别分层后基因型与等位基因频率的分布在3组间亦未见统计学差异。R16G、Q27E多态构成的4种单倍型在正常体重组、超重组与肥胖组的分布无统计学差异(P>0.05)。维吾尔族与汉族人群间比较,Q27E基因型与等位基因频率分布的差异有统计学意义(P<0.001)。结论β2-AR基因R16G、Q27E多态性与新疆维吾尔族人群肥胖发生无关,但Q27E基因型与等位基因频率分布在汉族与维吾尔族人群间不同。

医学生物化学实验教学的体会

实验课是生化教学中的重要组成部分,在实验教学过程中,通过从实验内容、方法和考核手段等方面的改革尝试,不仅使学生体验到科学理论得出的方法,还提高了学生的操作和解决问题的能力,为今后独立进行科学实验奠定了基础。

代谢综合征大鼠模型的实验研究

目的通过2种不同饲料联合链脲佐菌素(STZ)诱导建立代谢综合征(MS)大鼠模型,为该疾病的研究探索理想的建模方法。方法 90只大鼠随机分为3组:MS模型正常盐组(NS)、MS模型高盐组(HS)和对照组(NC)。NS组大鼠饲喂高脂高糖饲料,HS组大鼠饲喂高脂高糖高盐饲料,NC组大鼠饲喂基础饲料。10周末,NS组和HS组选择腹围达标的大鼠,给予一次性腹腔注射STZ25mg/kg。分别在不同时间点测定各组大鼠体重、腹围、血压、空腹血糖及血脂等指标。结果 NS组和HS组大鼠体重、腹围、空腹血糖与NC组相比均升高,差异有统计学意义(P<0.05～0.01)。12周末时,HS组大鼠血糖及腹围较NS组增高,差异有统计学意义(P<0.05);12周末时,HS组大鼠高密度脂蛋白胆固醇较NS组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。NS组成模率为40.0%,HS组成模率为66.7%,2组成模率差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用高脂高糖饮食或高脂高糖高盐饮食诱导加腹腔注射小剂量STZ的方法可在短时间内成功复制稳定的MS大鼠模型,且HS组成模率较NS组高。

维吾尔族肥胖患者脂肪和血清内脂素、脂联素的改变及相关因素

目的探讨维吾尔族肥胖患者内脂素、脂联素(APN)在腹部网膜、皮下脂肪组织的表达和血清水平改变及其与体重指数(BMI)、腰臀围比(WHR)和血脂的关系。方法用半定量RT-PCR方法检测41例肥胖患者和20例非肥胖对照脂肪组织内脂素和APNmRNA表达水平,ELISA法检测血清内脂素和APN浓度,并测量腰围(WC)、臀围(HC)、血压(BP)、空腹血糖(FPG)和血脂等。结果①网膜脂肪组织内脂素mRNA表达水平在肥胖组与非肥胖对照组之间差异无显著性,肥胖组APNmRNA表达水平显著低于非肥胖对照组(P<0.05);内脂素、APN在两组网膜和皮下脂肪组织mRNA的表达水平均无显著性部位差异;血清内脂素肥胖组显著高于非肥胖对照组(P<0.05),APN在两组之间比较差异无显著性。②肥胖组舒张压(DBP)和收缩压(SBP)均显著高于非肥胖对照组(P<0.01和P<0.01),高密度脂蛋白(HDL-C)明显低于非肥胖对照组(P<0.05)。③网膜脂肪组织内脂素mRNA表达量与血清内脂素、BMI和TG显著正相关,APNmRNA表达量与血清APN显著正相关,与BMI、LDL-C显著负相关。结论维吾尔族肥胖患者血清内脂素水平升高,网膜和皮下脂肪组织内脂素mRNA表达水平无显著性部位差异;APNmRNA在网膜脂肪组织的表达显著降低,内脂素和脂联素可能在维吾尔人中心性肥胖相关的代谢紊乱性疾病中起一定作用。

实验性糖尿病小鼠的血清氨基酸代谢谱

目的通过测定2型糖尿病小鼠血清氨基酸代谢谱的变化,探讨代谢轮廓分析结合模式识别技术在糖尿病动物模型中的应用。方法 SPF级雄KM小鼠高脂饲料喂养4周后,腹腔注射链脲菌素(streptozotocin,STZ)建立2型糖尿病模型,动态监测空腹血糖(FBG)变化,分别于造模后第4周处死,收集小鼠血清,检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平。采用高效液相色谱(HPLC)柱前衍生方法检测小鼠血清中氨基酸代谢谱的变化。结果 2型糖尿病小鼠FBG、TG、TC明显升高,差异均有显著性。利用代谢轮廓分析可以对模型组大鼠代谢谱与对照组完全区分。结论小鼠成模后体内氨基酸发生了明显变化。从差异变量中鉴定出4个氨基酸对组间贡献较大(精氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、牛磺酸)。氨基酸的代谢轮廓分析结合模式识别技术可以在一定程度上反映2型糖尿病小鼠的代谢变化。

氟哌啶醇对新西兰兔心室肌细胞钾通道基因表达的影响

目的研究氟哌啶醇对兔左心室肌细胞钾通道基因水平的影响,探讨氟哌啶醇致心律失常的分子机制。方法实验组分别耳缘静脉注射氟哌啶醇(Haloperidol,Hal)1,2,4mg.kg-1.d-1,假手术组注射2ml.d-1生理盐水,同时监测心电图。应用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR),对ERG、KvLQT1和mink的基因表达进行半定量分析。结果氟哌啶醇低、中、高剂量组KvLQT1、mink及ERG mRNA表达较正常组降低(P<0.05),假手术组与正常组差异无统计学意义(P>0.05)。结论氟哌啶醇可能通过降低IKr、IKs钾通道基因KvLQT1、mink及ERG的表达,而使钾离子外流减少,心肌细胞动作电位时程延长,增加QT间期延长诱发Tdp的风险。

内脂素基因在3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中表达水平的变化

目的观察3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程的不同时段内脂素基因表达水平的变化,探讨内脂素基因与脂肪细胞分化、脂质积聚之间的关系。方法体外培养3T3-L1前脂肪细胞,在该细胞生长至完全汇合（con-fluent）后2d,采用经典的鸡尾酒方法诱导其分化,并于诱导分化过程中用油红O染色鉴定脂肪细胞分化情况,采用RT-PCR和Western blot技术检测内脂素基因表达的变化规律。结果油红O染色显示,细胞内脂滴逐渐增大、增多,至分化末期占视野90%以上。内脂素基因在诱导分化初期不表达,分化第2天开始表达,分化第4~8天表达显著上调,分化至第10~12天,内脂素基因表达保持在较高水平并趋于稳定。其中,诱导分化后第6~12天较分化第0天显著升高（P〈0.05）,诱导分化第10~12天较第2~6天显著升高,诱导分化第12天较第6~8天显著升高（P〈0.05）。Western blot方法检测结果显示,随细胞分化成熟内脂素蛋白表达水平逐渐升高。结论内脂素基因与脂肪细胞分化和脂质积聚有密切的关系。

维、汉两民族脂联素基因+45位点和+349位点SNPs及其与肥胖关系的研究

目的探讨维、汉两民族脂联素基因(adipose most abundant gene transcript1)+45位点及+349位点单核苷酸多态性与肥胖的关系。方法采用优化的特异性引物PCR(SSP-PCR)技术确定脂联素基因+45位点和+349位点的基因型。结果肥胖组与对照组中汉族脂联素基因+45位点GT基因型频率均高于维吾尔族,2组维吾尔族TT基因型频率均高于汉族,但差异无统计学意义(P>0.05);维吾尔族人群肥胖组和对照组的脂联素基因+349位点A、G等位基因频率分布差异具统计学意义(P<0.05)。结论维、汉两民族脂联素基因的+45位点可能存在差异,维吾尔族人群脂联素基因+349位点A、G等位基因频率与肥胖有关。

G蛋白β_3基因多态性同维吾尔族人群高血压的关联分析

目的研究G蛋白β3亚单位(G-proteinβ3Subunit,GNB3)基因第10外显子C825T多态性同中国维吾尔族人群高血压之间的关联性。方法采用较大样本巢式病例-对照研究(n=738),用聚合酶链式反应(PCR)及限制性片段长度多态性(RFLP)技术对354例高血压患者及384例正常血压者GNB3基因C825T多态进行检测。结果GNB3基因C825T多态3种基因型CC、TT、CT分布频率在病例组为27.2%、42.9%、29.9%,在正常对照组为27.7%、42.4%、29.9%,基因型分布在组间的差异无统计学意义(2χ=0.026 2,P=0.99)。T等位基因分布频率在病例组为51.4%、在正常对照组为51.2%,组间的差异也无统计学意义(χ2=0.001 6,P=0.97)。对病例组在不同基因型间进行比较,未发现CC、CT、TT基因型间收缩压、舒张压、体重指数、血糖、血脂水平有统计学差异。结论GNB3C825CT多态可能与维吾尔族人群高血压无关联。

维吾尔族肥胖伴胰岛素抵抗患者内脂素的表达变化及意义

目的探讨维吾尔族肥胖(OB)伴胰岛素抵抗(IR)患者血清内脂素的变化及意义。方法根据胰岛素抵抗诊断标准(胰岛素抵抗指数≥2.8),将患者分为肥胖伴胰岛素抵抗组(OB伴IR组)31例,肥胖无胰岛素抵抗组(OB无IR组)26例,另选14例健康体检者为正常对照组。半定量RT-PCR方法检查研究对象网膜和皮下脂肪组织内脂素mRNA的表达水平。对所有受试者采用稳态模式评估法(HOMA)评价胰岛素抵抗(IR),采用ELISA法测定血清内脂素水平,同时进行临床生化参数的检测。结果(1)OB伴IR组血清内脂素水平高于OB无IR组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)血清内脂素与体质量、甘油三酯(TG)呈正相关,与高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)呈负相关。(3)3组网膜与皮下脂肪组织内脂素mRNA表达水平差异无统计学意义。结论血清内脂素水平的升高可能与维吾尔族肥胖患者的胰岛素抵抗有关。

脂肪细胞因子chemerin与代谢综合征的关系

目的通过检测脂肪细胞因子chemerin在代谢综合征(metabolic syndrome,MS)大鼠脂肪组织及血清中表达水平的变化,探讨其与MS的关系。方法将60只SD大鼠随机分为代谢综合征模型组(MS)和正常对照组(NC),采用高脂、高糖、高盐饲料联合腹腔注射链脲佐菌素的方法构建MS大鼠模型。采用RT-PCR方法检测两组大鼠脂肪组织中chemerin mRNA的表达情况;采用酶联免疫吸附实验检测大鼠血清chemerin蛋白的表达变化。结果①在大鼠肾周围、附睾旁及肩胛间肌旁部位脂肪组织中,chemerin mRNA的表达水平MS组较NC组增高,且差异有统计学意义(P<0.05),在网膜脂肪组织中MS组较NC组虽有升高的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。②MS组大鼠血清chemerin水平较NC组有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Chemerin在高脂、高糖、高盐饮食联合STZ构建的MS大鼠模型的发病过程中可能起重要作用。

石榴皮提取物对糖尿病大鼠血糖和血脂的影响

目的探讨石榴皮乙醇提取物浸膏对糖尿病大鼠的降糖、调脂效果。方法雄性SD大鼠随机分为空白对照组(10只)和实验组(42只)。对照组仅用普通饲料喂养,实验组高糖高脂饲料喂养4w,给予链脲佐菌素(STZ)45mg/kg,腹腔注射,建立2型糖尿病大鼠模型。72h后空腹血糖≥11.1mmol/L确定为糖尿病模型。成模大鼠随机分为罗格列酮组和石榴皮乙醇提取物低、中、高剂量组,干预4w后观察提取物对大鼠血糖和血脂水平的影响。结果模型组大鼠血糖升高,从生化指标方面证实造模成功。石榴皮乙醇提取物中、高剂量组能有效地降低糖尿病模型动物血清中胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)水平,高剂量组还能有效降低糖尿病模型动物血糖水平。结论通过高糖高脂喂养联合腹腔注射STZ成功复制出了2型糖尿病大鼠模型;石榴皮乙醇提取物对糖尿病大鼠具有较好的降糖、降脂效果。

慕课与翻转课堂在生物化学教学中的联合应用

随着计算机网络的广泛普及,教学形式已不再局限于课堂教学。翻转课堂及慕课的使用为生物化学教学提供了新的方式与方法。利用丰富的网络资源,学生可以通过教师所录制的慕课在线寻找与课程相关动画及视频来进行补充学习,这就要求教师在生物化学课程慕课的录制过程中充分利用视频教学的特点,有针对性地开展教学。本文重点探讨了慕课及翻转课堂在生物化学课程教学中的使用及录制时的特点,以方便教师合理地设置课程内容及课程形式。