基于液质联用技术比较郁香忍冬花蕾与金银花化学成分

目的 比较郁香忍冬花蕾与金银花的成分差异,评估郁香忍冬花蕾药用价值,为其开发利用提供参考。方法 以70%甲醇为提取溶剂,以UPLC-TOF-MS分析成分种类,以HPLC-QQQ-MS测定成分含量,经多元统计分析确定成分差异。结果 在郁香忍冬花蕾与金银花中共鉴定出52种成分,20种定量成分含量差异显著,金银花有4种差异成分,郁香忍冬花蕾的异绿原酸C、阿魏酸、木犀草苷、芦丁含量是金银花的2倍以上,马钱酸、马钱苷含量分别是金银花的11.96、37.23倍。马钱苷、异绿原酸A、马钱酸、芦丁及断马钱酸是区分郁香忍冬花蕾及金银花的关键差异成分。结论 郁香忍冬花蕾与金银花成分种类相近,但含量差异明显,郁香忍冬花蕾具有重要药用价值,可进一步开发利用。

北桑寄生化学成分及其体外抗肿瘤活性

目的研究北桑寄生Loranthus tanakae Franch.&Sav.化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法北桑寄生90%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法评价各化合物对3种细胞系(K562、HepG2、MCF-7)增殖的影响,进而评估其抗肿瘤活性。结果从中分离得到10个化合物,分别鉴定为4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(1)、吐叶醇(2)、3β,4β-dihydroxy-5,7-megastigmadien-9-one(3)、3,4-二羟基苯甲酸乙酯(4)、aromadendrin(5)、山柰酚(6)、2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,5-dihydroxy-7-methoxy-4 H-chromen-4-one(7)、槲皮素-3-葡萄糖苷(8)、3′-O-β-D-(6′′′-肉桂酰基)-吡喃葡萄糖基-7-O-甲基-槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮苷(10)。化合物9对人体乳腺癌细胞MCF-7的IC_(50)值为(45.93±1.69)μmol/L。结论化合物1~5、7~8、10为首次从桑寄生属植物中分离得到,化合物9有一定体外抗乳腺癌细胞毒活性。

金银花酚酸类化学成分、药理活性及体内代谢研究进展

金银花为传统中药,主要功效为清热解毒,酚酸类成分是金银花的主要活性成分,具有抗病毒、抗菌、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理活性,与清热解毒的传统功效密切相关。本文对金银花酚酸类成分的种类、分子结构、药理活性及其体内代谢进行综述,旨在为确定金银花传统功效物质、控制药材质量、临床合理用药及开发利用酚酸类成分植物资源提供参考。

金银花酚酸类成分的提取优化及其成分分布

目的:通过响应面法优化金银花酚酸类成分的提取工艺,对不同发育时期及不同部位金银花样品进行酚酸类成分的定性研究。方法:以提取温度、液料比、提取时间和甲醇浓度为考察因素,3种酚酸(绿原酸、异绿原酸A和异绿原酸C)含量为评价指标,利用Design-Expert 12.0软件设计Box-Behnken实验并验证,通过响应面法确定金银花总酚酸的最佳提取工艺;采用UPLC-TOF-MS技术对金银花酚酸类成分进行鉴定,明确金银花中酚酸类成分的分布。结果:金银花中酚酸类成分最佳提取工艺为:提取温度39℃,液料比27∶1(mL/g),提取时间56 min,甲醇浓度72%;从金银花中共鉴定出22种酚酸类成分,明确了各成分在金银花不同发育时期及不同部位中的分布情况。结论:优选的金银花总酚酸提取工艺稳定性好、准确率高,22种酚酸类成分在金银花中的分布存在一定的规律性,主要表现为从无到有或从有到无。

金银花色泽与酚酸类成分含量相关性研究

目的研究金银花颜色与绿原酸、总酚酸含量的相关性,探讨根据颜色指标预测绿原酸、总酚酸含量的可行性。方法利用色差仪测定金银花药材颜色指标L^(∗)、a^(∗)、b^(∗)值。测定绿原酸和总酚酸含量,采用Syncronis C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相0.1%磷酸(A)⁃乙腈(B),梯度洗脱;检测波长327 nm;体积流量0.7 mL/min;进样量2μL;柱温24℃。根据颜色指标值与绿原酸、总酚酸含量并构建回归方程模型。结果绿原酸、总酚酸含量与L^(∗)呈正相关,与a^(∗)、b^(∗)呈负相关;绿原酸、总酚酸含量与颜色指标值的回归方程为Y_(绿原酸)=4.108+0.057L^(∗)-0.105a^(∗)-0.065b^(∗),Y_(总酚酸)=8.047+0.056L^(∗)-0.174a^(∗)-0.106b^(∗)。颜色指标预测金银花药材质量可行。结论金银花药材颜色与绿原酸、总酚酸含量间具有显著相关性,方程间接体现金银花药材质量,为合理评价金银花药材质量提供有效手段。

DNA条形码技术在中药制剂中鸡内金鉴定的应用研究

目的:探讨以细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因作为DNA条形码鉴定中药制剂中鸡内金的可行性。方法:以11种市售含鸡内金中药制剂为材料,以天根DNA提取试剂盒提取DNA,利用合成的HE引物和TY引物进行聚合酶链式反应(PCR)扩增,将其产物进行琼脂糖凝胶电泳分离并测序,最后将测序结果导入美国国家生物技术信息中心(NCBI)网站进行Blast在线比对。结果:成功提取中药制剂中鸡内金DNA,扩增产物电泳后的条带长度与目的条带理论长度接近,且Blast对比数据相似度高。结论:以COⅠ基因作为DNA条形码鉴定中药制剂中的鸡内金有效、可行,且鉴别速度快,但还需结合其他方法排除掺入鸡其他器官组织的可能性,才能进一步保证检测结果的准确性。

干燥方式对金银花酚酸类和黄酮类成分的影响

目的:比较不同方式干燥金银花中17种酚酸类成分和20种黄酮类成分的含量,确定金银花的最佳干燥方式。方法:用不同方式(晒干、阴干、低温烘干、高温烘干、微波杀青低温烘干和微波杀青高温烘干)干燥金银花,运用高效液相色谱串联三重四极杆质谱(HPLC-QQQ-MS/MS)测定酚酸类和黄酮类成分含量,结合主成分分析(PCA)和层次聚类分析(HCA)等化学模式识别分析,评价金银花质量。结果:晒干金银花总酚酸含量最高,为53 939.39μg/g,其他干燥方式优劣顺序为低温烘干>微波杀青低温烘干>微波杀青高温烘干>阴干>高温烘干;低温烘干金银花总黄酮含量最高,为4 002.24μg/g,其他干燥方式优劣顺序为晒干>微波杀青低温烘干>阴干>微波杀青高温烘干>高温烘干。微波杀青处理能有效减少活性成分的酶促分解。PCA和HCA分析结果表明,不同方式干燥金银花酚酸类和黄酮类成分含量差异较大,芹菜素、绿原酸甲酯、紫云英苷和野漆树苷等15个成分是6种方式干燥金银花的差异成分。结论:不同方式干燥金银花酚酸类和黄酮类成分含量有显著差异,微波杀青后恒温烘干,不仅可使金银花保留较好色泽,还能保持较高的活性成分含量,是一种很有前途的干燥技术。

激光显微切割技术联合HPLC-TOF/MS定性分析金银花花蕾腺毛成分

目的分析金银花花蕾腺毛成分,为金银花药材质量评价和控制提供参考。方法采用激光显微切割技术获取花蕾腺毛,低温冷冻涡旋法去除花蕾表皮毛(腺毛与非腺毛),HPLC-TOF/MS检测花蕾、去表皮毛花蕾和腺毛中的成分,通过对照品对照、数据库检索及质谱裂解规律进行结构解析和鉴定。结果从花蕾中鉴定成分37种,去表皮毛花蕾中鉴定31种,腺毛中鉴定35种;相对于花蕾,腺毛缺少2种酚酸类成分,去表皮毛花蕾缺少6种黄酮类成分。结论腺毛含有多种次生物质,是金银花花蕾次生物质合成积累的重要场所,与金银花药材品质密切相关。

不同种质金银花发育过程中黄酮类成分含量变化规律研究

目的建立一种同时测定金银花Lonicerae Japonicae Flos 20种黄酮类成分含量的方法,并对含量结果进行多元统计分析,探讨不同种质金银花发育过程中黄酮类成分的含量变化规律,为优良品种选育与金银花药材质量控制提供技术支撑。方法建立基于HPLC-ESI-MS/MS同时测定金银花20种黄酮类成分含量的方法,测定5种种质金银花不同发育时期黄酮类成分含量,利用主成分分析(principal components analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPLS-DA)研究其变化规律,并筛选差异性活性成分。结果建立的HPLC-ESI-MS/MS方法重复性好、稳定性好,5种种质金银花总黄酮含量:华金6号>九丰一号>四季花>红白忍冬>华金3号,木犀草苷含量:华金6号>红白忍冬>九丰一号>四季花>华金3号;在各种质金银花发育过程中,木犀草苷和总黄酮含量在二白期或大白期最高;通过多元统计分析确定了不同种质间存在9个潜在差异性黄酮标志物(野漆树苷、似梨木双黄酮、忍冬苷、水仙苷、芦丁、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷、圣草酚-7-O-葡萄糖苷、芹菜素和山柰酚-3-O-芸香糖苷),不同发育时期有7个差异性黄酮标志物(苜蓿素、野漆树苷、香叶木素、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、金圣草黄素、紫云英苷和圣草酚-7-O-葡萄糖苷)。结论金银花黄酮类成分组成与含量既决定于种质又受发育程度的影响,选育优良品种、确定合理采收时期是提高金银花药材黄酮类成分含量的有效途径。

北桑寄生醋酸乙酯部位化学成分研究

目的对北桑寄生Loranthus tanakae醋酸乙酯部位化学成分进行研究。方法运用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、半制备HPLC等技术进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构。结果从北桑寄生醋酸乙酯部位分离得到18个化合物,分别鉴定为4-羟基-3-甲氧基苯丙酮(1)、反式肉桂酸(2)、对羟基苯甲酸乙酯(3)、对羟基苯甲醛(4)、香草醛(5)、2-羟基-二丁酸-1,4-二乙酯(6)、4-羟基-α-乙烯基-苯乙醛(7)、松脂素(8)、salicifoliol(9)、2,6-二甲氧基-1,4-苯醌(10)、2,6,2′,6′-tetramethoxy-4,4′-bis(2,3-epoxy-1-hydroxypropyl)biphenyl(11)、7-O-甲基槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(12)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(13)、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(14)、鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、7-O-甲基-山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(16)、5,3′,4′-trihydroxy-7-methoxyflavone3-O-(2′′-rhamnosylglucoside)(17)、3′-O-β-D-(6′′′-肉桂酰基)-吡喃葡萄糖基-7-O-甲基-槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(18)。结论化合物1~11、15、17为首次从该植物中分离得到,化合物18为1个新的黄酮苷类化合物,命名为北桑寄生黄酮苷A。