基于CX3CL1介导的炎症反应研究淫羊藿苷对缺氧诱导的肺动脉高压小鼠的作用

目的研究淫羊藿苷改善缺氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)作用与趋化因子C-X3-C基元配体1(chemokine C-X3-C motif ligand 1,CX3CL1)介导的炎症反应的关系。方法将40只C57BL/6J雄性野生型(wide type,WT)小鼠随机分为对照组、WT模型组和WT+淫羊藿苷(10、20 mg/kg)组,20只雄性CX3CL1-/-小鼠分为CX3CL1-/-模型组和CX3CL1-/-+淫羊藿苷(20 mg/kg)组。除对照组外,各组均于含氧量为10%的低氧环境中连续饲养21 d,于低氧饲养7 d后ig淫羊藿苷2周。采用小动物超声仪检测小鼠肺动脉血流速度和右心室血流动力学,测量右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index,RVHI);采用苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察小鼠肺小动脉重构情况;采用ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平;采用Western blotting检测小鼠肺组织CX3CL1和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关蛋白表达情况。结果与对照组相比,WT模型组小鼠肺动脉血流速度明显降低(P<0.05),RVHI显著增大(P<0.05),右心室收缩末期直径、收缩末期容积和每博输出量升高(P<0.05),右心室短轴缩短率和射血分数降低(P<0.05),肺小动脉重构明显。与WT模型组相比,淫羊藿苷能够增加WT小鼠肺动脉血流速度(P<0.05),降低RVHI、右心室收缩末期直径、收缩末期容积和每博输出量(P<0.05),升高右心室短轴缩短率和射血分数(P<0.05),肺小动脉重构明显改善,同时,淫羊藿苷降低血清IL-1β和TNF-α水平以及肺组织CX3CL1蛋白表达水平(P<0.05),抑制NF-κB通路相关蛋白表达水平(P<0.05)。与WT模型组相比,CX3CL1-/-模型组小鼠肺动脉血流速度、肺小动脉重构、右心室血流动力学均有改善(P<0.05),血清IL-1β和TNF-α水平降低(P<0.05)。敲除CX3CL1-/-后,淫羊藿苷(20 mg/kg)对HPH小鼠的改善作用减弱甚至消失。结论淫羊藿苷能够通过抑制CX3CL1介导的炎症反应改善小鼠HPH。

淫羊藿苷抗缺氧诱导小鼠肺动脉高压的作用

目的观察淫羊藿苷(Ica)对缺氧诱导小鼠肺动脉高压的影响及相关作用机制。方法将50只C57雄性小鼠随机均分为空白组,模型组,Ica低、高剂量(10、20 mg·kg-1·d-1,ig)组和吖啶黄(Acr,15 mg·kg-1·d-1,ig)组。空白组于常氧条件下饲养,其余各组均于含氧量为10%的低氧仓连续饲养21 d,饲养第8日按分组给药,连续14 d,每周称量体重。末次给药2 h后采用小动物超声检测心功能和肺动脉血流,计算右心肥厚指数(RVHI),HE染色观察肺小动脉病理改变,Masson染色观察肺血管纤维化,Western blot法检测肺组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和磷酸化核因子κB(p-NF-κB)的蛋白水平。结果与空白组相比,模型组大鼠体重和肺动脉血流速度减小,右心室功能减弱,RVHI显著升高,肺小动脉重构和纤维化明显,且HIF-1α、TNF-α、p-NF-κB蛋白量显著增加(均P<0.05)。与模型组相比,Ica低剂量组仅部分心功能指标改善,TNF-α蛋白表达降低(P<0.05);Ica高剂量组和Acr组肺动脉血流速度显著增加,心功能显著改善,RVHI降低,HIF-1α、TNF-α和p-NF-κB蛋白表达降低(P<0.05),肺血管重构和纤维化缓解。结论Ica可有效改善缺氧诱导的小鼠肺动脉高压,可能与抑制HIF-1α/TNF-α/NF-κB信号通路有关。