吉西他滨对人胰腺癌Patu-8988细胞株APE/Ref-1的诱导作用

目的:研究人胰腺癌细胞株在吉西他滨化疗时APE/Ref-1基因表达的变化,并试图揭示其在胰腺癌化疗耐药中所起的作用.方法:不同浓度吉西他滨0、10、20、40及60μmol/L作用人胰腺癌Patu-8988细胞株24 h,分别以RT-PCR及Western blot方法测定作用后APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达情况.结果:吉西他滨作用人胰腺癌Patu-8988细胞株24h后,APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达水平明显上升,并与吉西他滨的浓度呈正相关(RT-PCR:r=0.645,P=0.012;Western blot:r= 0.598,P=0.020).结论:APE/Ref-1在胰腺癌化疗时表达明显增强,可能与化疗耐药性的产生有关,并提示针对APE/Ref-1的靶向干预可能有助于提高胰腺癌的化疗敏感性.

放射性核素^32P对人胰腺癌Patu-8988细胞株APE／Ref-1的诱导作用

为研究人胰腺癌细胞株在放射性核素32P胶体内照射时APE/Ref-1基因表达的变化,并试图揭示其在胰腺癌放疗抵抗中所起的作用,用不同剂量的放射性核素32P胶体加入人胰腺癌Patu-8988细胞株培养液中,形成最终放射性活度分别为:0、0.11、0.22、0.45、0.90MBq/mL等5个放射照射剂量组,共孵育24h。然后分别以RT-PCR及Western-blot方法测定作用后APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达情况。32P胶体作用24h后发现,Patu-8988的APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达水平明显上升,并与32P胶体的放射照射剂量呈正相关。由此得出结论:APE/Ref-1在胰腺癌放射性核素32P胶体内照射时表达明显增强,可能与胰腺癌放疗抵抗的产生有关,并提示针对APE/Ref-1的靶向干预可能有助于提高胰腺癌的放疗敏感性。

沙利度胺预防ERCP术后胰腺炎的实验研究

目的评价具有促进TNF_αmRNA降解的免疫调节剂沙利度胺在预防ERCP术后胰腺炎中的作用。方法建立ERCP术后胰腺炎模型,治疗组术前8天起沙利度胺灌胃,并设立假手术组、无治疗组和赋形物对照组。24h后比较血清淀粉酶水平、胰腺水肿程度以及组织学炎症评分,并比较胰腺组织TNF-αmRNA表达情况。结果沙利度胺显著降低血清淀粉酶、减轻胰腺水肿及组织学炎症评分,并显著降低胰腺组织中TNF-αmRNA的表达。结论TNF-α可能在ERCP术后胰腺炎的发生发展中起着重要作用,预防性使用沙利度胺能有效减轻ERCP术后胰腺炎的严重程度。

重症急性胰腺炎预防性抗生素治疗的荟萃分析

目的通过对有关文献的荟萃分析,探讨预防性抗生素治疗在重症急性胰腺炎(SAP)中的作用。方法检索1966年到2004年8月期间发表的有关预防性抗生素治疗SAP的作用方面的随机对照临床试验(RCT)。按照人选标准,有6项临床试验纳入本研究,由2名作者各自独立地对入选研究中有关试验设计、研究对象的特征、研究结果等内容进行摘录,并用RevMan4.2软件进行分析。结果在SAP患者中,使用能在胰腺组织中达到有效浓度的广谱抗生素并不能减少胰腺感染(RR=0.77,95% 可信区间为0.48-1.24,P=0.28),也不能减少手术干预(RR=0.84,95%可信区间为0.40-1.74, P=0.64),更不能降低死亡率(RR=0.54,95%可信区间为0.28-1.04,P=0.07),只有胰外感染的发生率有一定的减少(RR=0.52,95%可信区间为0.31-0.88,P=0.01)。结论不建议在SAP患者中不加选择地预防性使用抗生素,但对于CT证实的坏死性胰腺炎,可以考虑抗生素预防性治疗。

加贝酯预防ERCP术后胰腺炎的临床研究

目的探讨加贝酯预防ERCP术后胰腺炎、胰性腹痛和高淀粉酶血症的疗效和安全性。方法按随机双盲法将拟行ERCP术的患者分为加贝酯组和对照组。加贝酯组患者在ERCP术前0．5h起开始静脉滴注加贝酯(300mg加入林格氏液500ml),维持4．5h。对照组则仅静脉滴注林格氏液500ml,也维持4．5h。结果共有94例患者完成研究,其中加贝酯组48例,对照组46例。加贝酯组有3例(6．3％)、对照组有9例(19．6％)患者发生了胰腺炎(P=0．040)；高淀粉酶血症的发生率两组分别为12例(25．0％)和21例(45．7％)(P=0．036)；胰性腹痛的发生率两组分别为5例(10．4％)和14例(30．4％)(P=0．016)。结论以加贝酯总量300mg持续4．5h静脉滴注(术前0．5h起给药)较安慰剂能有效减少ERCP术后胰腺炎发生率,减少高淀粉酶血症及胰性腹痛的发生。

大鼠ERCP术后胰腺炎模型的建立及意义

目的 建立内镜逆行胰胆管造影(ERCP)术后胰腺炎大鼠模型,并与牛黄胆酸所诱发胰 腺炎模型进行对照,为研究药物预防ERCP术后胰腺炎提供实验和理论依据。方法 16只SD大鼠随机 分为3组,实验组(6只):以恒定压力(50 mmHg)胰胆管注射30％泛影葡胺持续2 min;对照组(6只):按 0.1 ml／100g,0.2 ml/min速度用微量推射泵在胰胆管内注入5％牛磺胆酸;假手术组(4只):打开腹腔 翻动胰腺后关腹。24 h后开腹取胰腺组织作病理学检查,并检测血淀粉酶。结果 24 h后实验组及对照 组胰腺与假手术组比较不论在大体病理,还是组织学病理的变化上均有显著差异,实验组和对照组血清 淀粉酶也显著高于假手术组,而实验组和对照组差异不显著。结论恒定压力下胰胆管注射泛影葡胺 建立的大鼠胰腺炎模型模拟了人ERCP术后胰腺炎过程,而且与牛黄胆酸所诱导的胰腺炎模型有类似 的病理和淀粉酶变化,为研究预防ERCP术后胰腺炎的发生打下了基础。

细胞外钙敏感受体及其在胰腺上的表达

细胞外Ca2 +通过钙敏感受体 (CaR)发挥着类似激素的功能 ,CaR在多种器官中广泛表达并参与各种生命活动的调节。在胰腺内、外分泌部多种细胞上都存在CaR ,参与调节胰液和胰酶分泌、调节胰岛素分泌和胰腺血管和神经分布、参与胰腺肿瘤细胞增殖等多种生理或病理过程。

药物预防ERCP术后急性胰腺炎

内镜逆行胰胆管造影(endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)开展30年来,由于能在诊断的同时进行一些治疗,是肝胆胰疾病诊治的重要手段之一,国内外已广泛应用于临床.熟练的内镜医师ERCP成功率可达95%,但ERCP引起的术后危重并发症发生率仍可达3%～5%.其主要并发症包括急性胰腺炎、出血和穿孔.尤其是ERCP术后急性胰腺炎往往给患者增加痛苦,延误诊治,增加住院日数和费用,甚至危及生命,引起人们较大关注.ERCP前使用药物是否可预防急性胰腺炎的发生存在不同观点,现对其作一综述.

含左氧氟沙星的四联方案补救治疗幽门螺杆菌的临床研究

目的评价含左氧氟沙星的四联方案补救治疗幽门螺杆菌的有效性和安全性。方法33例幽门螺杆菌初次根除失败的消化性溃疡或慢性萎缩性胃炎患者接受了下述10天含左氧氟沙星的四联方案:质子泵抑制剂(标准剂量)+枸橼酸铋钾(0.22g)+左旋氧氟沙星(0.2g)+阿莫西林(1.0g)b.d,4周后通过13C尿素酶呼吸试验判断根除成功与否。结果2例失访,余31例完成治疗及随访,其中26例补救根除成功,5例补救治疗失败,6例(18.18%)患者发生轻微不良反应,根据意向处理分析(ITT)和完成治疗分析(PP),根除率分别为78.79%和83.87%。结论含左氧氟沙星的四联方案为安全有效的幽门螺杆菌补救治疗方案。

益生菌制剂VSL#3对溃疡性结肠炎诱导缓解作用的系统评价

背景:循证医学证据提示益生菌对溃疡性结肠炎(UC)的诱导缓解无效,但对维持缓解有效,然而2009年发表的两项临床试验结果显示益生菌合剂VSL#3对UC的诱导缓解有效。目的:系统评价益生菌尤其是VSL#3诱导UC缓解的有效性和安全性。方法:联机检索MEDLINE、EMBASE、Cochrane Library和中国生物医学文献数据、万方数据库,由两名分析人员独立选取与UC诱导缓解相关、比较益生菌治疗组与对照组(安慰剂或阳性对照)的随机对照试验(不限语种)并提取数据。应用RevMan 5.2.10软件行meta分析,同时行亚组分析和敏感性分析。结果:共纳入9项随机对照试验,共557例UC患者,其中4项治疗组使用VSL#3。Meta分析显示益生菌组总体诱导缓解率显著优于对照组(OR=2.05,95%CI:1.14～3.70,P=0.02),亚组分析显示VSL#3亚组诱导缓解率显著优于对照组(OR:2.35,95%CI:1.45～3.80,P=0.0005),其他菌种与对照组间诱导缓解率无明显差异。益生菌组、VSL#3亚组与对照组间不良反应发生率均无明显差异。敏感性分析显示meta分析结果稳定。结论:VSL#3对UC的诱导缓解作用优于对照组且安全性高。

含多西环素的四联方案补救治疗幽门螺杆菌初次根除失败的临床研究

背景:幽门螺杆菌(H.pylori)一线三联疗法的根除失败率日益增高。目的:评价含多西环素的四联方案补救治疗H.pylori初次根除失败的有效性和安全性。方法:共纳入37例H.pylori初次根除失败的消化性溃疡、慢性萎缩性胃炎或非溃疡性消化不良患者,予四联方案埃索美拉唑(20 mg)+枸橼酸铋钾(220 mg)+多西环素(100 mg)+阿莫西林(1000 mg),2次/d×10 d。治疗结束4周后行13C-尿素呼气试验(UBT)以评估H.pylori根除情况。结果:4例患者失访,25例患者补救治疗成功,8例失败,补救治疗意向治疗(ITT)分析和符合方案(PP)分析根除率分别为67.6%和75.8%。21例(63.6%)患者发生轻微不良反应。结论:含多西环素的四联方案是一种安全、有效的H.pylori初次根除失败后的补救治疗方案。

肠内营养和全胃肠外营养治疗重症急性胰腺炎疗效的荟萃分析

背景：营养支持是重症急性胰腺炎（SAP）的重要治疗措施,然而目前对选择肠内营养（EN）或全胃肠外营养（TPN）治疗SAP仍存在争议.目的：系统性评价EN和TPN治疗SAP/预期SAP患者的临床效果.方法：检索MEDLINE、EMBASE、Cochrane图书馆、万方数据资源系统和中国期刊网（1966年1月～2010年4月）,纳人有关EN和TPN治疗的随机对照试验（RCT）.2名评价者对入选研究的试验设计、研究对象特征、研究结果等内容进行独立摘录,并应用RevMan 4.2软件进行荟萃分析.结果：共纳入14项RCT,包括701例患者.与TPN相比,EN能显著降低感染率（RR=0.43,95%CI：0.28～0.66,P〈0.0001）、外科干预率（RR=0.45,95%CI：0.29～0.70,P=0.0004）、器官衰竭率（RR=0.45,95%CI：0.26～0.78,P=0.004）和死亡率（RR=0.37,95% CI：0.23～0.58,P〈0.0001）.结论：EN治疗SAP优于TPN,若无EN禁忌症,应优先选择EN.

肠内营养对重症急性胰腺炎患者小肠细菌过度生长抑制作用的临床评估

背景：急性胰腺炎（AP）动物模型存在小肠细菌过度生长（SIBO）,肠内营养（EN）可降低重症急性胰腺炎（SAP）患者胰腺继发感染的风险.目的：评估EN对SAP患者SIBO的影响.方法：13例CT严重度指数（CTSI）≥3分的AP患者随机分为EN组（7例）和胃肠外营养（PN）组（6例）,所有患者均置入鼻空肠管,分别于第1 d、3 d、7 d行葡萄糖氢呼气试验（GHBT）,计算患者每次GHBT的总产氢量.EN组患者于首次GHBT后即开始行EN,PN组患者于第二次GHBT后改行EN.结果：两组患者首次GHBT的总产氢量差异无统计学意义（P〉0.05）,EN组第一、二次GHBT总产氢量下降值显著大于PN组（33.0对4.0,P〈0.05）;两组间第一、三次GHBT总产氢量下降值相当,差异无统计学意义（P〉0.05）.结论：EN可能对SAP患者的SIBO有抑制作用.

微生态制剂在重症急性胰腺炎中应用的meta分析

背景:近年来关于微生态制剂治疗重症急性胰腺炎(SAP)的研究较多,然而其效用尚存在争议。目的:系统评价微生态制剂应用于SAP的效用。方法:检索The Cochrane Library、PubMed、维普、CNKI和万方数据库,选取关于微生态制剂应用于SAP的随机对照试验(RCTs),以RevMan 5.1软件进行meta分析。计数资料和计量资料的评价分别采用比值比(OR)和加权均数差(WMD)。结果:共6项RCTs满足纳入和排除标准,包括SAP患者444例。Meta分析显示干预组与对照组间死亡率(OR=1.55,95%CI:0.83~2.88,P=0.17)以及感染性坏死(OR=1.19,95%CI:0.61~2.30,P=0.61)、全身性炎症反应综合征(SIRS)(OR=0.91,95%CI:0.29~2.84,P=0.87)、多器官功能衰竭(MOF)(OR=1.72,95%CI:0.98~3.01,P=0.06)发生率差异均无统计学意义,但干预组住院时间(WMD=-6.72,95%CI:-9.16^-4.28,P<0.000 01)以及血淀粉酶、CRP恢复时间和腹部症状缓解时间均显著短于对照组,总体并发症发生率显著低于对照组(OR=0.39,95%CI:0.16~0.95,P=0.04)。结论:目前研究表明添加微生态制剂并不能降低SAP患者的死亡率以及感染性坏死、SIRS、MOF发生率,但能显著缩短患者的住院时间,降低总体并发症发生率。尚需开展大样本、高质量的RCTs对微生态制剂应用于SAP的效用作进一步评估。

沙利度胺对人胰腺癌细胞细胞动力学和VEGF表达的影响

背景:研究显示沙利度胺及其类似物具有免疫调节、抗血管生成、抗炎等多方面的作用,其对多发性骨髓瘤和一些实体瘤的抗肿瘤作用与其免疫调节活性以及抗血管生成、抗增殖和促凋亡特性有关。目的:观察沙利度胺对人胰腺癌细胞细胞动力学和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨其用于胰腺癌临床辅助治疗的可能性。方法:以沙利度胺干预人胰腺癌细胞株Patu-8988 48 h,MTT实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,RT-PCR检测VEGFmRNA表达。结果:经不同浓度沙利度胺干预的Patu-8988细胞,生长抑制率、G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率均显著高于溶剂对照组(P<0.05),VEGF异构体VEGF121、VEGF165 mRNA表达显著低于溶剂对照组(P<0.05)。结论:沙利度胺能从多方面对胰腺癌生长产生抑制作用,包括直接抑制癌细胞增殖、诱导细胞周期G0/G1期阻滞和早期凋亡,以及通过抑制VEGF转录而抑制肿瘤血管发生。

川芎嗪联合内镜下曲张静脉套扎术预防食管静脉破裂出血的临床研究

目的 探讨川芎嗪联合内镜下曲张静脉套扎术 (EVL)预防肝硬化食管静脉曲张破裂再出血的疗效。方法 对 45例联合治疗组 (EVL联合口服川芎嗪 )和 41例对照组 (单用EVL)患者进行前瞻性对照研究 ,治疗后随访 2年观察两组食管静脉曲线破裂再出血率和病死率 ,两组治疗前后门脉高压性胃病 (PHG)的发生情况 ,并用彩色多普勒超声仪检测门静脉系统血流动力学的变化。结果 随访 2年 ,对照组再出血率显著高于联合治疗组 ,分别为 48.8%和 2 2 .2 % ,病死率也高于联合治疗组 ,分别为 39%和 2 0 % ,两组中ChildC级患者的再出血率和病死率无显著差异。曲张静脉经治疗闭塞后 ,在对照组PHG的发生明显增加 ,而联合治疗组则不然。用川芎嗪 4周后门静脉血流量、脾静脉血流量、门静脉内径和脾静脉内径分别下降 ( 114 6 .2± 391.2 )ml/min、( 5 31.1± 32 1.2 )ml/min、( 1.4± 0 .3)cm及 ( 1.0± 0 .2 )cm ,与用药前相比有显著差异 ,临床上未见明显不良反应。结论 川芎嗪联合EVL可有效预防食管静脉破裂出血 ,并能减少门脉高压性胃病的发生率 ,这是一种安全有效的治疗方法 ,可供临床推广应用。

埃索美拉唑和奥美拉唑联合抗生素根除幽门螺杆菌疗效对比:荟萃分析

背景:一些随机对照试验比较了埃索美拉唑(Eso)和奥美拉唑(Ome)联合抗生素根除幽门螺杆菌(H.pylori)的疗效,但结论不尽一致。目的:对Eso和Ome联合抗生素根除H.pylori的疗效进行荟萃分析,以客观评价其疗效。方法:通过Medline和中国生物医学文献数据库检索有关Eso和Ome根除H.pylori疗效的随机对照试验入选荟萃分析。计算成功根除H.pylori的患者百分数,并以加权平均数表示。采用随机效应模型分析各研究中两组H.pylori根除率的比值比(OR),荟萃分析总OR值。结果:共有11项研究被纳入本荟萃分析,Eso和Ome联合抗生素的加权平均H.pylori根除率[意向处理分析(ITT)]分别为85.6%和81.6%(OR:1.30,95%CI:1.02～1.65,P=0.04),差异有统计学意义。结论:Eso联合抗生素较Ome联合抗生素具有更高的H.pylori根除率。

人胰腺癌吉西他滨耐药细胞株的建立及其耐药机制初步探讨

背景:吉西他滨是胰腺癌的一线化疗药物,但由于存在原发性和获得性耐药,其改善胰腺癌患者预后的作用并不明显。因此,探讨吉西他滨获得性耐药机制具有重要临床意义。目的:建立人胰腺癌吉西他滨耐药细胞株,初步探讨胰腺癌对吉西他滨的耐药机制。方法:在体外以0.5μmol/L吉西他滨持续刺激人胰腺癌细胞株SW1990,获得耐药细胞株SW1990-0.5。以CCK-8实验检测SW1990-0.5细胞株的耐药指数,细胞群体倍增实验和划痕实验分别检测亲本和耐药细胞株在体外的生长和侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,real-time PCR检测多药耐药相关基因MDR-1、MRP-1、BRCP和吉西他滨代谢相关酶基因dC K、RRM1、RRM2表达。结果:SW1990-0.5细胞株的耐药指数为9.32。与亲本细胞株相比,耐药细胞株体外增殖能力减弱,体外侵袭能力无明显变化;经吉西他滨作用后,耐药细胞株细胞周期无明显变化,但细胞凋亡率显著降低,MRP-1、BRCP、dC K mRNA表达降低,MDR-1、RRM1、RRM2 mRNA表达无明显变化。结论:成功建立了稳定的人胰腺癌吉西他滨耐药细胞株SW1990-0.5;胰腺癌对吉西他滨获得性耐药可能与拮抗细胞凋亡和dC K表达下调有关。

舒林酸对人胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响及机制探讨

目的以人胰腺癌细胞系PANC-1为研究对象,利用不同浓度舒林酸处理PANC-1细胞,观察其对PANC-1细胞增殖、凋亡影响,并探讨舒林酸通过抑制Wnt/β-catenin信号通路杀伤PANC-1细胞的可能机制。方法实验分为阴性对照组(加入不含舒林酸的DMSO)和实验组(分别加入舒林酸浓度为0.25、0.5、1、1.5、2 mM的培养液,分别为:阴性对照组、0.25 mM组、0.5 mM组、1.0mM组、1.5 mM组、2.0 mM组,总计6组)。MTT法检测PANC-1细胞生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR和免疫细胞化学技术检测细胞内β-Catenin的表达。结果 MTT结果显示:PANC-1细胞经舒林酸干预后生长均受到不同程度抑制,且随着舒林酸浓度增加,抑制作用越强。流式细胞术检测凋亡结果显示PANC-1细胞早期凋亡率干预后均有不同程度增加,与对照组相比,0.5、1.0 mM组早期凋亡率差异无统计学意义,而1.5、2.0 mM组差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示可见各组β-catenin mRNA表达量随着舒林酸浓度增加而降低,0.5、1.0 mM组与对照组相比差异无统计学意义,而1.5及2.0 mM组差异有统计学意义(P<0.05);应用2.0 mM的舒林酸处理PANC-1细胞0、12、24、48、72 h,随着处理时间延长,β-catenin mRNA表达量逐渐降低,各处理组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ICC结果证实干预后PANC-1细胞内β-catenin表达量及核聚集降低,与对照组相比,0.25、0.5 mM组差异无统计学意义,而1.0、1.5、2.0 mM组差异有统计学意义(P<0.05)。结论舒林酸对PANC-1细胞具有生长抑制及促凋亡作用,这种作用具有浓度-时间依赖性,舒林酸抑制Wnt/β-catenin信号通路可能是其杀伤PANC-1细胞的可能机制之一。