蛙皮肤来源抗菌肽Brevinin-2GHk的抗菌作用机制

目的探讨Brevinin-2GHk(BR2GK)的二级结构、理化性质及抗菌活性,并揭示其抗菌作用机制。方法合成并鉴定BR2GK;圆二色谱测定BR2GK的二级结构和理化性质;二倍稀释法测定BR2GK的抗菌活性;共聚焦激光扫描显微镜(LSCM)和扫描电子显微镜(SEM)研究BR2GK的杀菌方式;小鼠红细胞检测BR2GK的溶血活性;等温滴定量热实验和表面等离子共振成像检测BR2GK与脂多糖的结合;生化试剂盒检测BR2GK的抗氧化能力。结果合成的BR2GK经高效液相色谱(HPLC)纯化,纯度≥95%,并通过质谱进行确定。圆二色谱分析显示BR2GK具有阳离子抗菌肽的基本特征,在SDS溶液中以α-螺旋结构为主。抗菌活性测定显示BR2GK对多种菌株均具有抑制和杀灭活性,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)达到2.76μmol/L。LSCM和SEM观察到BR2GK使细菌细胞膜受损,细菌肿涨、收缩和变形,并渗出大量内容物,但在具有抗菌活性的浓度下对红细胞无溶血作用。等温滴定量热实验显示BR2GK与脂多糖的结合亲和力KD为18.2±0.8μmol/L。抗氧化测试结果显示,BR2GK以浓度依赖的方式清除NO(P<0.01)。BR2GK对ABTS和DPPH自由基清除的反应快速,当浓度为40μmol/L时,在1 min内分别清除了73.51%的ABTS和90.32%的DPPH。结论BR2GK具有良好的广谱抗菌活性,且不会导致溶血,此外还能结合脂多糖,并具有较强的抗氧化能力;BR2GK对设计合成具有更强抗菌活性和更低细胞毒性的抗菌肽具有重要的指导意义。

基于网络药理学的半夏抗炎活性成分及作用机制研究

目的构建半夏抗炎的"成分-靶点-通路"网络,探究半夏可能活性成分及其潜在作用机制。方法通过文献和TCMSP数据库查找半夏化学成分,采用类药性(DrugLikeness,DL)以及口服生物利用度(Oral Bioactivity,OB)评估筛选活性成分;通过Drugbank、Pharmmappe数据库筛选半夏活性成分潜在靶点基因,通过GeneCards和MalaCards数据库得到炎症相关基因靶点;将活性成分的潜在靶点基因与炎症相关基因进行比对,得到半夏抗炎的潜在靶点基因;使用DAVID数据库对靶点基因功能进行GO富集,KOBAS 3.0数据库对相关通路进行KEGG通路注释;采用Cytoscape 3.6.1软件构建半夏抗炎作用的"成分-靶点-通路"网络;将筛选得到的部分活性成分和关键靶点进行分子对接。结果从半夏中共筛选出11个活性成分,涉及包括MAPK14、TEK、IGF1、AKT1等53个基因靶点,影响了与炎症相关的TNF signaling pathway、PI3K-Akt signaling pathway及Ras signaling pathway等32条信号通路;分子对接试验结果显示,筛选得到的两个活性成分与关键靶点的结合能力与阳性药物接近。结论构建的"成分-靶点-通路"网络图揭示了半夏通过多成分、多靶点、多通路的形式发挥抗炎作用,分子对接试验间接证实了网络药理学预测结果的可靠性与准确性。为进一步阐释半夏抗炎作用机制提供了科学依据。

不同生长形态的爵床植株鉴别及其化学成分含量比较

目的:鉴别垂直生长(V类)和横向生长(L类)两类爵床并比较其地上部分及不同器官中化学成分含量的差异。方法:使用试剂盒提取两类爵床叶中的DNA,经聚合酶链式反应(PCR)扩增和双向测序得内部转录间隔区2(ITS2)序列,psb A-trn H序列;采用HPLC,测定两类爵床地上部分及花穗、叶和茎中爵床脂定B和金不换甲醚的含量;通过独立样本T检验和配对样本T检验,比较两类爵床地上部分及其不同器官中的爵床脂定B和金不换甲醚的含量差异。结果:将2个序列经过剪切后比对,V类和L类爵床的DNA序列完全一致;独立样本T检验结果表明,爵床脂定B的含量在两类爵床的地上部分中不存在显著差异,而金不换甲醚的含量为V类爵床显著高于L类(P <0. 05);配对样本T检验结果表明,爵床脂定B和金不换甲醚的含量在同类爵床的花穗、叶和茎中均存在显著性差异(P <0. 05),花穗和叶中的含量远大于茎;且金不换甲醚在V类爵床的花穗和叶中的含量要高于L类。结论:DNA条形码技术鉴别序列一致,表明两类不同生长形态的爵床为同种植物;不同生长形态的爵床植株中金不换甲醚的含量存在差异,V类爵床含量更高;同时,爵床茎中有效成分的含量极少,故在爵床的花穗和叶多的花、果期采收为佳。

气相色谱法检测多廿烷醇中的残留溶剂

随着人民生活水平的提高,一些如肥胖、高脂血症等心血管疾病,严重威胁着人类的生命安全,血脂水平偏高也是引起动脉粥样硬化、冠心病等疾病的重要因素之一。目前主要的降脂类药物有他汀类、贝特类、烟酸类等,但长期服用这些化学药物对肝肾功能有极大的副作用,因此开发更加安全有效的植物类调脂药十分重要。