专一性脱硫菌脱硫活性比较与基因保守性研究

对几株能专一性脱除二苯并噻吩(DBT)中硫元素生成2-羟基联苯的细菌,即短芽孢杆菌(Bacillus brevis)R-6、德氏假单孢菌(Pseudomonas delafleldii)R-8、小球诺卡氏菌(Nocardia globerula)R-9、球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)R-16、红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)LSSE8-1和戈登氏菌(Gordonia nitida)LSSEJ-1展开研究。对照研究发现它们对DBT及其衍生物的代谢活性存在着一定的差异。为了从基因水平分析造成这些差别的原因,对这几株菌的脱硫基因展开了研究。根据Rhodococcus erythropolisIGTS8脱硫基因的保守区设计引物,PCR扩增了R-6、R-8的脱硫基因。测序结果表明脱硫基因高度保守,与IGTS8的相关脱硫基因相似性在99%以上。为了进一步验证不同专一性脱硫菌的脱硫基因的保守性,PCR扩增、克隆了LSSEJ-1和R-9的整个脱硫操纵子,结果表明脱硫基因在这两株菌中也是高度保守的。与IGTS8的相关脱硫基因相比较:R-9的dszA与IGTS8的dszA同源性为99.6%,LSSEJ-1的dszA与IGTS8的dszA的同源性为99.9%;R-9和LSSEJ-1的dszB的同源性与IGTS8的dszB都是99.9%;R-9的dszC与IGTS8的dszC同源性是99.9%,LSSEJ-1的dszC与IGTS8的dszC同源性为99.1%。对比研究认为专一性脱硫嗜温菌的脱硫基因的起源可能相同。

离子液体用于燃料油深度脱硫的研究进展

首先介绍了加氢催化脱硫和其他脱硫技术的特点,综述了近年来国内外利用离子液体在萃取脱硫、萃取脱硫与氧化脱硫耦合、萃取脱硫与生物脱硫耦合等方面的研究。认为离子液体萃取脱硫具有操作简便、可循环使用、无需氢气、环境友好、能深度脱硫等特点,是一项具有广阔发展前景的技术。若要实现该技术的工业化应用,还需进一步加强离子液体在合成工艺、脱硫选择性及回收再生等方面的研究。

吸附法脱除芳香含硫化合物的研究进展

吸附法可以脱除加氢汽油、柴油中的芳香含硫化合物,是超低硫油品的一种具有工业前景的脱硫方法。详细介绍了分子筛吸附剂、氧化物吸附剂、络合吸附剂、分子印迹吸附剂和化学吸附吸附剂等的设计、再生的最新研究进展。吸附脱硫目前的主要问题在于对硫化物的吸附选择性低和再生与重复使用效果不好。

脱硫工程菌的构建及其脱硫性能分析

以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,利用pPR9TT穿梭质粒构建脱硫操纵子表达载体,转化原始菌培养得到1株多拷贝脱硫基因的脱硫工程菌R-8-1,并对其脱硫性能进行了研究。结果表明,在同样的生物催化脱硫反应条件下,工程菌的脱硫活性达到6.25μmol DBT/g dry cell/h,是原始菌的2倍;柴油的脱硫试验表明,在12h内工程菌静息细胞能将柴油硫含量从310.8mg/L降至100.1mg/L,脱硫率达到68%,而原始菌为53%。进一步比较了重组质粒pPR-dsz在工程菌株中传代的稳定性,试验表明pPR-dsz在工程菌株R-8-1中具有良好的遗传稳定性。此研究为生物脱硫提供了1株优良的工程菌株,并为该技术的应用提供了参考。

π络合吸附剂吸附脱硫及其生物再生

提出了一种吸附剂生物再生循环使用的新耦合方法.通过离子交换再用He保护自动还原的方法制备了π络合吸附剂Cu(Ⅰ)/Y,Cu(Ⅰ)/MCM-41,Cu(Ⅰ)/ZSM-5,以萘和二苯并噻吩(DBT)为模型化合物考察了吸附剂的吸附性能.

基于GIS的城中村改造规划绿地景观格局分析

城市绿地是改善生态环境,提高市民生活质量的公益性基础设施。武汉市城中村改造工作十分注重城市公共利益的保障,在改造规划中优先落实绿地、规划道路等强制控制用地的指标,因而必然对城市绿地空间格局产生影响。本研究以景观生态学基础理论为依据,利用地理信息系统技术,对武汉市中心城区城中村改造规划范围内的绿地空间信息进行处理,然后进行景观格局分析,进而依据分析结果对城市绿地布局规划进行评价,以期为今后的城中村改造规划编制提供一定的参考借鉴。

红平红球菌LSSE8-1中辅因子再生系统的构建

采用PCR方法从红球菌Rhodococcus sp.RHA1基因组中克隆了编码甲酸脱氢酶的基因(fdh),将该基因片段插入大肠杆菌-红球菌穿梭质粒pBS306,构建了甲酸脱氢酶表达质粒pBS-PFG,转入专一性脱硫菌R.erythropolis LSSE8-1,得到重组菌LSSE8-1-FDH.2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)显色反应测得重组菌LSSE8-1-FDH的总脱氢酶活(OD496)为0.464,原始菌LSSE8-1的总脱氢酶活(OD496)为0.353,重组菌比原始菌酶活增加了31%.考察了不同浓度甲酸根对R.erythropolis LSSE8-1与重组菌LSSE8-1-FDH生长的影响,当甲酸根浓度为25mmol/L时重组菌LSSE8-1-FDH的生长最佳.油水相静息细胞脱硫实验表明,重组LSSE8-1-FDH菌比宿主菌的脱硫速率增加了12.5%,总脱硫率增加了约20%.

铝蒙皮涂装施工用的水溶性脱漆剂

本文研究的是以苯甲醇替代二氯甲烷为主溶剂的水溶性脱漆剂 ,它和传统的二氯甲烷型脱漆剂相比 ,毒性更小、对使用者的安全及身体健康无不利影响 ,且脱漆速度相当。通过对脱漆剂使用性能的研究和对比 ,结果证明 ,它对环氧类涂料、环氧锌黄底漆等都适用 ,尤其对于飞机蒙皮漆有良好脱漆效果。该脱漆剂具有原材料易得、对基材腐蚀性小、适用范围广、不燃烧等特点 ,一般常温下在 3 0分钟内便可将漆膜溶胀。其配制工艺简单 ,涂覆方便、不易挥发、贮存较稳定 ,重涂性能好 。

脱硫菌Rhodococcus sp．LY822专一性脱硫活性及相关基因的研究

以专一性脱硫菌Rhodococcus sp.LY822质粒DNA为模板,利用已知的脱硫基因序列设计引物,PCR扩增得到了3个脱硫基因片段dszA,dszB和dszC.构建了相应的表达质粒pETA,pETB和pETC,在转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达,得到了dszA,dszB和dszC基因的融合表达产物.SDS-PAGE分析结果显示,蛋白带分子量分别为50,40和45kDa.3种重组菌BL21(DE3)(pETA),BL21(DE3)(pETB)和BL21(DE3)(pETC)的无细胞粗提液(2mL)的活性检测结果表明,DszC酶的粗提液反应30min能够将0.02mmol/L二苯并噻吩完全转化为二苯并噻吩砜,DszA酶的粗提液能够将0.01mmol/L二苯并噻吩砜完全转化为羟基联苯亚磺酸盐,DszA和DszB酶的粗提液联合作用能够将0.01mmol/L二苯并噻吩砜完全转化为2-羟基联苯,证明LY822对二苯并噻吩的降解符合专一性脱硫的'4S途径'.

Klebsiella sp.LSSE-H2的咔唑降解

从染料污染的土壤中分离出1株新的咔唑降解菌LSSE-H2,能以咔唑作为唯一的碳源、氮源和能源.依据16S rRNA基因序列的系统发育分析将该菌鉴定为Klebsiella sp.该菌在30℃、以咔唑为唯一的碳源、氮源的选择性培养基(CNFM)中,经过56h可将浓度为12mmol/L的咔唑几乎完全降解,在浓度为16mmol/L的咔唑中也同样表现出高的咔唑降解活性.对比分析不同营养成分培养基中对咔唑的降解情况表明,LSSE-H2可能存在独特的咔唑降解活性表达调控模式.按照已公布的car基因簇序列设计同源引物,PCR扩增出LSSE-H2的包含5个咔唑降解基因的car基因簇片断,测序结果表明,咔唑降解基因高度保守,与Sphingomonas sp.KA1和Sphingomonas sp.GTIN11相应的咔唑基因的同源性都达到100%,只在基因簇的非编码区上发现少数碱基不同.对比研究表明,LSSE-H2,KA1和GTIN11中car基因簇的起源可能相同,并能在不同的细菌之间水平转移.

枯草芽孢杆菌联产纳豆激酶和γ-聚谷氨酸

利用实验室保存的纳豆激酶生产菌Bacillus subtilis Natto NLSSe进行了γ-聚谷氨酸合成研究,在不添加谷氨酸的培养基中合成了分子量在200～300万Da的γ-聚谷氨酸,表明该菌是谷氨酸非依赖型菌.合成纳豆激酶的合适碳、氮源分别是蔗糖和大豆蛋白胨,合成γ-聚谷氨酸的合适碳、氮源分别是柠檬酸和NH4C1.通过正交实验研究了碳、氮源对纳豆激酶和γ-聚谷氨酸联产的影响,结果表明,增加培养基中大豆蛋白胨及柠檬酸的浓度能分别促进纳豆激酶和γ-聚谷氨酸的合成,而不抑制另一产物的合成,有利于纳豆激酶和γ-聚谷氨酸的联产.在大豆蛋白胨10g/L,NH4C19g/L,柠檬酸15g/L时,纳豆激酶酶活为121.2U/mL,γ-聚谷氨酸产量为1.1g/L,均达到了单独合成时的水平.

2类组合数学问题的算法形式化推导

组合数学问题算法的研究是计算机科学的重要研究内容,但在许多相关文献中,许多组合数学问题的算法只是经过简单分析得到,并未给出算法程序的详细设计过程,导致读者无法理解算法本质,更无法保证算法程序的正确性.该文在以组合数学中连续子序列最大乘积和第2类斯特林数变形问题为例的基础上,通过形式化描述问题的程序规约,使用规约变换规则,对程序规约进行一系列等价变换,获得问题求解序列的递推式,并以此为基础得到问题求解的算法程序,清晰地展示了从问题的需求到算法程序的详细推导过程.通过对相关组合数学问题的进一步深入研究,提炼了2类组合数学问题的求解策略,为提高组合数学问题算法程序的正确性提供了有效途径.

不动产登记与房屋交易、税费缴纳“一网受理”平台研究

自2016年全国不动产统一登记改革以来,不动产登记一直是社会各方和群众关注的焦点,为提升企业和群众办证便捷性、持续优化城市营商环境,以“信息多跑路,群众少跑腿”为原则,提出建设不动产登记与房屋交易、税费缴纳“一网受理”平台,对不动产、房管、税务业务流程和收件材料进行梳理,研究制定不动产涉税登记统一受理模式和规则,分析平台建设的核心问题及其解决办法,形成平台具体实现的解决方案。最后基于解决方案完成了平台的建设实现,平台已经应用于武汉市不动产日常登记工作中,受理时间明显减少、审批流程大幅优化、工作效率显著提高,还节约了工作成本,受到各方好评。

不动产存量数据清理整合重难点的分析与探讨

自2015年起全国各地陆续正式启动不动产统一登记,并开展了不动产存量数据清理整合工作。不动产存量数据清理整合项目实施过程中,会遇到基础资料薄弱、资料来源众多、数据体量大、登记业务复杂、与日常业务不协同等各种各样的问题。基于此,结合多地实际工作情况,针对最典型的几种重难点问题进行了分析,提出了有效可行的解决办法。

π络合脱硫吸附剂Cu(I)-Y的生物再生

吸附与生物技术的耦合是实现燃料油品清洁生产的新发展方向,提出了一种吸附剂生物再生循环使用的新耦合方法,首先用吸附剂吸附脱除油品中的含硫化合物,然后用微生物脱附吸附剂表面吸附的硫化物,实现吸附剂再生.利用Y型分子筛通过离子交换再用He保护自动还原的方法制备了π络合吸附剂吸附Cu(I)-Y,以DBT为模型化合物考察了吸附剂的吸附性能.以选择性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonasdelafieldii)R-8为生物催化剂,考察了细胞浓度、油相体积、水相/吸附剂比对吸附剂脱附率的影响.加入油相可以大大提高DBT脱附量和生成2-HBP的量.增加水相中脱硫菌R-8的浓度、增大水相/吸附剂比,可以实现DBT脱附,促进DBT转化为2-HBP.在水相脱硫菌株R-8浓度为75g·L?1、水相/吸附剂比为300mL/g、油相/水相比1/3(V/V)的条件下,脱附的DBT在6h内转化率达到89%,24h内转化率为100%.生成2-HBP的量主要由吸附剂吸附硫化物的量、水相中微生物细胞的浓度、油相/水相体积比、水相/吸附剂比决定.吸附剂经过正辛烷洗涤、100℃下干燥24h、He保护450℃还原活化3h,再生吸附剂的吸附能力为新鲜吸附剂的95%.

血红蛋白基因在脱硫菌R-8中的表达及其在柴油脱硫中的应用

【目的】旨在构建一株优良的工程菌株,对血红蛋白基因在柴油的生物脱硫领域的应用做初步的探索。【方法】以德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,通过基因工程的手段,构建透明颤菌(Vitreoscilla)血红蛋白基因表达质粒并电击导入原始菌株,得到重组菌P.delafieldiiR-8-2。【结果】R-8-2菌株的CO差光谱在419nm处有特征峰出现,表明血红蛋白在脱硫菌中得到了有效表达。R-8-2菌株和R-8菌株相比,生长得到改善,相同培养条件下菌体密度比R-8提高了20%,最大脱硫活性能够达到R-8的2.4倍。在实际柴油脱硫实验中,R-8-2菌株能将柴油的硫含量降至96.6mg/L,脱硫率达到69.9%,而R-8仅为57.2%。【结论】R-8-2是在较低溶氧条件下仍能保持较高的菌体密度和脱硫活性的基因工程菌株,具有良好的应用前景,该研究为血红蛋白基因在生物脱硫工业的应用提供参考。

吸附-微生物脱硫原位耦合工艺的吸附剂选择

吸附-生物原位耦合脱硫工艺是耦合了吸附脱硫的速率快和生物脱硫的选择性高的优点的新型油品脱硫工艺.该耦合工艺通过在脱硫微生物表面组装脱硫吸附剂来实现.比较了常用脱硫吸附剂γ-Al2O3、Na-Y分子筛和活性炭在与德氏假单胞杆菌R-8进行吸附-微生物催化原位耦合脱硫工艺中的应用效果.其中,Na-Y分子筛抑制细胞的脱硫活性,活性炭吸附了底物二苯并噻吩(DBT)之后难以解吸,因此,二者均不适用于耦合脱硫工艺.γ-Al2O3由于能够快速地从油相中吸附DBT,然后将DBT解吸下来传递给R-8细菌进行生物降解,加快了DBT的传质速率,从而有效地提高了脱硫速率.研究还发现纳米结构的γ-Al2O3与R-8耦合脱硫的效果优于普通尺寸的γ-Al2O3,所以认为纳米γ-Al2O3是原位耦合脱硫较好的吸附剂选择.

软件工程中的形式化方法研究概述

软件工程中的形式化方法是以数学理论为基础,建立的一种用来解决软件工程领域问题的系统性分析方法。形式化方法通过具有明确语义的形式语言来描述目标软件系统的行为和特征,为目标系统开发提供了一个模型化的有效设计和分析途径,保障了系统的安全性和可靠性。本文简单介绍了形式化方法的研究内容及分类,在软件方法学的研究背景下,对形式化方法在软件系统开发每一个阶段的应用进行了详细分析和综合评价。

基于形式化分析法的情报模式研究

网络信息环境下大数据的兴起为情报学领域带来新机遇和新挑战,该文简述了情报与情报分析的概念,指出情报分析员面临的现实挑战,对情报分析法的特点优势进行了概述,归纳了形式化情报分析法的5种应用模式,为弥补情报界在分析技术方面的不足提供了借鉴,帮助分析人员克服思维误区,为明智决策、任务成功提供更优化的情报支持。