胆道闭锁患儿肝纤维化及炎症细胞浸润与Kasai术后胆管炎的关系

目的分析胆道闭锁(BA)患儿肝纤维化程度、炎症细胞浸润程度与Kasai术后胆管炎的关系。方法选取2015年1月—2016年12月在我院确诊为BA患儿92例,依照日本Ohkuma’s肝纤维化分级标准进行分组,分为肝纤维化Ⅰ级(8例)、Ⅱ级(31例)、Ⅲ级(35例)、Ⅳ级(18例)组。结合Kasai手术时日龄,分析肝纤维化与手术时日龄的关系。术中获取的肝组织标本采用苏木素/伊红(HE)、马松(Masson)染色评价其纤维化程度,免疫组化(IHC)染色检测白细胞共同抗原(LCA)、T淋巴细胞表面抗原(CD4、CD8)、巨噬细胞特异性抗体(CD68)等炎症细胞特异性标志抗体表达情况。结合Kasai术后随访资料,分析BA患儿肝组织炎症细胞浸润程度、肝纤维化程度与Kasai术后胆管炎的关系。结果 BA患儿手术时日龄越大,肝纤维化程度越重;常规病理染色结果显示肝组织以淋巴细胞浸润为主,Ⅰ级、Ⅳ级组LCA、CD4表达水平高于Ⅱ、Ⅲ级组,各组间CD68表达差异无统计学意义。92例BA患儿均获得随访,50例曾发生胆管炎,38例发生早期胆管炎,23例频发胆管炎;不同肝纤维化分级BA患儿Kasai术后胆管炎、早期胆管炎和频发胆管炎的发生率差异有统计学意义(P<0.05),Ⅰ级、Ⅳ级组胆管炎发生率高于Ⅱ级、Ⅲ级组。结论 BA患儿Kasai术后胆管炎的发生与肝纤维化程度和肝组织炎症细胞,尤其T淋巴细胞亚群的浸润有关。

胆管板畸形对胆道闭锁患儿自体肝生存的影响

目的分析胆管板畸形(DPM)与胆道闭锁(BA)患儿自体肝生存的关系。方法收集2008年1月—2017年12月在天津市儿童医院行Kasai手术,在天津市第一中心医院行肝移植(LT)的BA患儿40例。对Kasai术及LT时的肝组织进行HE染色及CK19免疫组化染色,按照不同时期DPM存在情况进行分组,Kasai术时无DPM组(27例),有DPM组(13例);LT时无DPM组(17例),有DPM组(23例)。分别比较不同阶段各组患儿自体肝生存时间差异。结果Kasai术时有DPM组和无DPM组BA患儿自体肝生存时间分别为230.0(190.5,276.5)d和336.0(218.0,757.0)d;LT时有DPM组和无DPM组BA患儿自体肝生存时间分别为230.0(185.0,285.0)d和527.0(288.0,817.0)d。无论是Kasai术还是LT时,有DPM患者的自体肝生存时间均较无DPM明显缩短(P<0.05)。结论胆道闭锁患儿伴发胆管板畸形可能会影响到自体肝生存时间。

胆道闭锁自体肝生存时间与胆管反应的关系研究

目的探讨胆道闭锁自体肝生存时间与Kasai手术时肝活检胆管反应相关指标间的关系。方法选取天津市儿童医院行Kasai手术后自体肝生存时间超过5年,且无严重并发症的BA患儿10例作为预后良好组(BA-A组),同期行Kasai手术后1年内死亡或行肝移植的BA患儿10例作为预后不良组(BA-B组);另选取胆总管囊肿患儿10例(CC组),胆汁淤积症患儿10例(CS组),尸检病例5例(尸检组)作为本研究的对照组。应用HE及免疫组织化学染色方法,对4组患儿肝组织病理学指标(肝纤维化程度、胆管增生、胆栓、汇管区炎症细胞浸润程度)进行评分,并检测CK7、CK19、CD56、Ep CAM抗体表达情况,计算四种蛋白的平均光密度值(AOD),分析BA自体肝生存时间与肝组织胆管反应的关系。结果 BA组肝组织肝纤维化程度、胆管增生、胆栓评分均高于3组对照组,差异有统计学意义(H=24. 208,P <0. 05; H=39. 779,P <0. 05; H=23. 119,P <0. 05); CK7、CK19、CD56、Ep CAM四种蛋白在BA组的表达量明显高于3组对照组,差异有统计学意义(F=111. 184,P <0. 05; F=1064. 972,P <0. 05; F=79. 054,P <0. 05; F=53. 858,P <0. 05); BA预后良好组CK7、CD56、Ep CAM表达量低于预后不良组,差异有统计学意义(t=12. 686,P <0. 05; t=9. 517,P <0. 05; t=5. 232,P <0. 05)。结论肝组织病理学评分可用于BA与其他梗阻性黄疸的鉴别诊断; Kasai手术时肝活检胆管反应与自体肝生存关系密切,CK7、CD56及Ep CAM蛋白可以作为BA预后的相关指标,其表达量越少,自体肝生存时间越长。

胆道闭锁Kasai手术加速康复外科理念实施

胆道闭锁并非罕见,围术期管理较复杂。日前,ERAS理念已在小儿外科诸多疾病中得到广泛开展。本文论述Kasai手术过程中引用ERAS理念,在不影响Kasai手术效果前提下,优化胆道闭锁患儿治疗流程,可以达到快速康复的目的。

胆道闭锁胆管细胞破坏与修复的研究进展

胆道闭锁(BA)是一种由肝内外胆管系统堵塞引发的小儿肝胆外科疾病,如不及时治疗将引起胆汁性肝硬化,最终发展为肝衰竭而导致患儿死亡。胆管上皮细胞破坏,胆管管腔逐渐狭窄,最终形成纤维条索是BA主要病理改变。胆管上皮细胞不仅是被动受害者,也被认为是胆管病理学中潜在的效应物。目前,随着国内外对于BA胆管上皮细胞的研究越来越深入,胆管上皮细胞破坏与修复方面取得了一些进展,本文就胆管结构改变、胆管上皮细胞破坏、胆管增生与修复、上皮间质转化与肝纤维化的关系等方面作一综述。

MMP-7在胆道闭锁肝纤维化患者中的表达及临床意义

目的研究基质金属蛋白酶7(MMP-7)与胆道闭锁(BA)患者肝纤维化分级、胆管反应程度之间的关系,探索其在肝纤维化进程中的作用及临床意义。方法选取2017年6月—2018年4月我院收治的15例胆道闭锁患儿行Kasai手术时的肝活检组织(G1组),另选取2015年1月—2016年1月因行Kasai术后肝脏功能衰竭而行肝移植术的病肝组织41例(移植组),将移植组按Kasai手术与肝移植的间隔时间分为2组:G2组(28例,间隔时间<2年)和G3组(13例,间隔时间≥2年)。采用HE染色观察3组患者肝脏纤维化程度,免疫组化染色检测MMP-7和CK-19蛋白在肝脏中的表达情况并进行半定量分析。结果 (1)免疫组化结果显示,MMP-7主要表达于胆管上皮细胞、增生的胆管、汇管区周围肝细胞,随着肝纤维化程度进展,胆管细胞及肝细胞MMP-7表达强度增加,且胆管细胞比肝细胞表达更为强烈。MMP-7在G1～G3组中的表达水平分别为(0.068±0.017)vs.(0.093±0.017)vs.(0.084±0.016),差异有统计学意义(F=10.541,P<0.001),CK-19在3组的表达水平分别为(0.119±0.036)vs.(0.157±0.040)vs.(0.110±0.044),差异有统计学意义(F=7.296,P<0.001),G2组MMP-7、CK-19蛋白表达水平明显高于其余2组(P<0.05),G1组与G3组之间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)3组的肝纤维化程度分别为2(2,3)vs. 4(3,4)vs. 4(2,4)(H=17.785,P<0.001),G2组纤维化程度明显高于其余2组,差异具有统计学意义(P<0.017)。(3)相关性检验示:MMP-7蛋白表达量与肝纤维化程度呈弱正相关(r_s=0.609,P<0.001),但与胆管反应程度(CK-19)无明显线性相关性(r=0.007,P=0.962)。结论MMP-7在BA患儿Kasai术后肝组织中高表达,并且随肝纤维化程度加重而表达升高,其可能参与并促进了BA肝纤维化进程,提示自体肝生存不佳。

遗传代谢性肝脏疾病的诊断思维

遗传代谢性疾病是各种遗传缺陷导致代谢物质合成和分解障碍的一类疾病,其种类繁多,目前能确诊的遗传代谢性疾病已有600余种。而遗传代谢性肝病通常指由于遗传性的酶缺陷引起的物质中间代谢紊乱所导致的一系列疾病,目前临床上最常见的有以下几种类型:①肝豆状核变性:又称Wilson病;②血色病:又称遗传性血色病;③遗传性高胆红素血症:即体质性黄疸;④α1-抗胰蛋白酶缺乏症:常染色体显性遗传;⑤肝性卟啉病:常染色体显性遗传。该类疾病的单一病种患病率低,但总体发病率并不低,有家族聚集的特点[1]。

同卵双胞胎胆道闭锁患儿染色体核型和全外显子组测序分析

目的:以临床表型不同的同卵双胞胎胆道闭锁(BA)患儿为研究对象,分别进行染色体G显带核型分析和全外显子组测序,检测该组双胎儿是否存在染色体核型异常和差异基因型,初步探讨胆道闭锁发生的遗传学背景。方法:采集3对同卵双胞胎BA患儿外周静脉血作为实验样本,分别进行染色体G显带核型分析和全外显子组测序分析。结果:临床表型不同的同卵双胞胎BA患儿,其染色体G带核型分析结果均无异常,为46,XX或46,XY。全外显子组测序结果显示,未检测到该组同卵双胞胎BA患儿的任何差异基因型。结论:同卵双胞胎BA患儿具有不同的临床表型,其染色体G显带核型正常,提示胆道闭锁的发生与染色体异常无关;双胎儿全外显子组测序检测不存在差异基因型,提示胆道闭锁不是单纯的遗传性疾病,可能与遗传表型或外显率以及其他因素等有关。

改善胆道闭锁生存状况，提高Kasai手术比率

胆道闭锁（biliary atresia，BA）是小儿外科最严重的消化系统疾病之一，以肝内和肝外胆管进行性炎症和纤维性梗阻为特征，从而导致胆汁淤积及进行性的肝纤维化和肝硬化，如未接受治疗，患儿常在2岁内死亡。胆道闭锁患儿的生存状况一直令人担忧，尤其是在偏远地区几乎得不到合理地治疗就离开了这个世界。

Notch-1、Jagged-1、Hes-1在胆道闭锁患儿肝纤维化中的表达及意义

目的探讨Notch信号通路在胆道闭锁(biliary atresia ,BA)肝纤维化进程中的作用。方法根据Ohkuma’s肝纤维化分级标准选取2014年6月至2017年12月就诊于天津市儿童医院普外科的胆道闭锁患儿40例作为BA组,并将其分为4个亚组;另选取先天性胆管扩张症(CBD)患儿5例作为CBD组;采用正常肝脏组织样本5例作为对照组。用免疫组化方法检测肝脏组织中的Notch通路元件(包括Notch1受体、Jagged1配体、Hes1靶基因)的表达量。结果①免疫组化定性结果:Notch1在BA组强阳性表达,CBD组阳性表达,对照组弱阳性表达;Jagged1在BA组阳性表达,CBD组和对照组弱阳性表达;Hes1在BA组和CBD组阳性表达,对照组弱阳性表达;②免疫组化半定量结果:Notch-1、Jagged-1、Hes-1在BA组与对照组表达情况分别是(0.174±0.037比0.054±0.004,P<0.001)、(0.182±0.055比0.048±0.010,P<0.001)、(0.148±0.050比0.050±0.023,P<0.001),BA患儿肝组织表达均高于对照组,差异具有统计学意义。Notch-1、Jagged-1、Hes-1在BA组与CBD组的表达情况是(0.174±0.037比0.191±0.318,P>0.05)、(0.182±0.055比0.260±0.061,P>0.05)、(0.148±0.050比0.108±0.018,P<0.05),Notch-1与Jagged-1在两组的差异无统计学意义,Hes-1在两组中的差异具有统计学意义。而在BA组中,Notch通路元件的表达量均随纤维化程度加重而升高(Notch-1: F=31.215, P<0.001;Jagged-1: F=13.914, P<0.001;Hes-1=66.127, P<0.001)。结论Notch信号通路元件在肝组织内异常活化可能参与胆道闭锁肝纤维化进程。

胆道闭锁Kasai术后肝内胆管囊性扩张的形成特点与病理研究

目的分析胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿Kasai术后肝内胆管囊性扩张(intrahepatic biliary cysts,IBC)的形成特点及病理学表现,探索其与预后之间的关系。方法选取2017年1月至2018年12月天津市儿童医院Kasai术后行肝移植手术的BA患儿179例(男75例,女104例),收集患儿的临床资料和影像学资料,用以判断是否存在IBC,其中36例CT检查结果提示存在肝内胆管扩张,作为IBC(+)组,143例未检测到肝内胆管扩张,作为IBC(-)组,比较两组的自体肝生存状况及肝功能指标。同时收集到上述患儿中50例患儿的肝移植时的病肝组织,其中IBC(+)组18例,IBC(-)组32例,进行HE染色,观察肝脏纤维化程度、胆管增生程度、淤胆以及胆管板畸形的发生情况。结果①IBC(+)组女患儿有27例,占75.0%(27/36),IBC(-)组女患儿有77例,占53.8%(77/143),两组中女患儿占比的差异具有统计学意义(P=0.021),两组患儿在行Kasai术时的日龄及术后胆管炎的发生率的比较中,差异无统计学意义(P>0.05);②IBC(+)组患儿的中位生存期为11.5个月,明显高于IBC(-)组患儿的9.0个月。Log-Rank检测发现,IBC(+)组术后自体肝生存状况优于IBC(-)组患儿,且差异具有统计学意义(P=0.038);③肝功能的比较结果发现IBC(+)组除胆汁酸(total bile acids,TBA)外,均低于IBC(-)组患儿,其中总胆红素(total bilirubin,TBI)、结合胆红素(direct bilirubin,DBI)水平在两组的差异具有统计学意义(P<0.05);④IBC(+)组患儿的肝纤维化程度、胆管增生程度及胆管板畸形发生率均较IBC(-)组略低,差异无统计学意义;但IBC(+)组淤胆程度明显低于IBC(-)组,差异具有统计学意义(P=0.013)。结论BA患儿Kasai术后发生IBC可能是肝脏代偿的积极表现,短期内不会导致胆汁淤积的加重,相反扩张的胆管可以减轻胆汁淤积的程度,改善肝功能及病理分级,从而延长自体肝生存时间。