叶酸对酒精所致肝脏损害保护作用的实验研究

酒精对肝脏有损害作用是众所周知的。本文重点研究叶酸对酒精所致的肝损害是否有保护作用。实验用68只NIH小鼠并分成三组,正常组20只(A组),酒精组24只(B组)、叶酸酒精组24只(C组)分别用上述物质灌喂1、2、3、4周后,分期处死动物。用组织化学、电镜等方法观察。结果表明:叶酸可使肝脏SDH、Mg^(++)—ATPase、G-6-Pase的活性明显增强,并使糖原合成增加;使ACP活性降低。对线粒体、内质网等超微结构无损害。这提示叶酸对已受酒精损害的肝细胞的功能和结构有明显的保护作用。

铝对肝、肾、心、脑所致损害的实验研究

240只Wistar大鼠,体重(150～300g)分为四组,A组(正常对照)60只、B组(柠檬酸组)60只每天给AlCl_3与柠檬酸盐混合饲料(按1:11)、C组和D组各60只,每天被摄入含500ppm/kg、2500ppm/kg的Alcl_3混合饲料,分别在3个月、6个月、12个月后处死,然后观察铝对其肝、肾、心肌、脑影响的组织化学及超微结构等变化。组织化学结果显示:上述器官的SDH、Mg^(2+)—ATPase、ChE、G-6-Pase的活性及糖原(PAS反应)C组及D组明显低于A组。而LDH及ACP活性较A组高(P<0.01)。超微结构变化为C组与D组的肝、肾、心肌、脑细胞内线粒体及内质网受损,大鼠神经细胞变性,而且突触囊泡聚积在突触前膜;A组(正常组)没有上述变化。同时铝沉积于脉络丛和神经细胞内。综上所述,铝可造成肝、肾、心肌、脑细胞的功能和结构的损害。

铝对大白鼠海马所致损害的实验研究

为探讨铝对海马的损害，用３０只健康大白鼠，体重２００～３００克，分为Ａ组（正常对照）１０只，Ｂ组（低铝组饲料中加５００ｍｇ／ｋｇＡｌＣｌ３）１０只，Ｃ组（高铝组饲料中加２５００ｍｇ／ｋｇ／ＡｌＣｌ３）１０只。分别饲养１２个月后，分组断头取脑海马，按组织化学及酶组织化学常规做“铝定性”反应，琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、硫胺素焦磷酸酶（ＴＰＰａｓｅ）、镁激活三磷酸腺苷酶（Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ）、胆碱酯酶（ＣｈＥ）测定。按电镜常规做超微结构的观察。结果提示：Ｃ组，海马ＳＤＨ、Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ、ＣｈＥ活性明显减弱（由强阳性（）下降为阳性（＋），铝反应增强（在海马的神经细胞内强阳性（）；同时海马神经元内线粒体嵴断裂、肿胀、空泡样变，神经纤维髓鞘变性（如不规则卷曲、松散）。

胆道阻塞对肝脏酶的组织化学变化的研究

结扎胆总管的情况下,阻塞上端胆管内压不断增高,当胆管内压达20～25cm水柱时,胆汁即逆流到体循环。本文分别在结扎胆总管后1、2、3、4周,观察肝脏酶的组织化学变化。随着结扎时间的延长,肝脏琥珀酸脱氧酶(SDH)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Paso)、三磷酸腺苷酶(ATPase)的活性明显减弱,分别由强阳性变成可疑阳性,而酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)的活性明显增强,由阳性变成强阳性。实验结果提示胆道阻塞时间延长,肝脏酶的功能发生明显的紊乱。

扫描电镜研究大白鼠胰岛的特点

为验证大白鼠胰岛结构的特点,用Karnovski-Dithizon溶液进行灌注,扫描电镜观察。其结果为:胰岛被膜由两层致密的网状纤维和胶原纤维所组成。A细胞多位于胰岛的外周部,呈圆形,平均约8×5×5μm大小,单极分泌;B细胞位于胰岛的中心部分,多角形,平均直径为10μm大小,表面胞浆伸出许多突起和泡状物、颗粒,多极分泌。相邻的B细胞表面,可见纵横交织的“分泌小管”和“分泌小孔”,“分泌小管”与胰岛内毛细血管网相通。A细胞没有这些特点。

钉螺一氧化氮合酶分布的酶组织化学研究

目的 定位研究一氧化氮合酶 (NOS)在日本血吸虫中间宿主—钉螺体内分布及活性。方法 用还原型尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸硫辛酰胺脱氢酶 (NADPH- d)酶组织化学技术 ,对钉螺软体的整体连续切片作系统观察。结果 头足部肌纤维间含丰富 NOS阳性神经元 ;中枢神经节纤维区、心脏壁、雌雄生殖细胞、咽管等呈 NOS强阳性 ;腮管壁呈 NOS阳性。结论 NO作为重要生物信使 ,直接参与钉螺神经肌肉运动。

春季温度变化对钉螺酶活性的影响

目的 了解春季气候变暖影响钉螺活动性及繁殖能力的作用机理。方法 春季采集的钉螺放入不同温度的恒温培养箱,模拟外界气候变暖。用酶组织化学技术观察不同温度下钉螺中枢神经节、雌雄生殖腺中的一氧化氮合酶(NOS)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)及乙酰胆碱脂酶(AchE)的变化。结果 各酶的平均灰度值随着温度升高呈下降趋势。在神经节中25℃组NOS、SDH及AchE的平均灰度值明显低于对照组(P<0.01);25℃组卵集及搴丸组织NOS、SDH及LDH的平均灰度值显著低于对照组;各实验组神经节LDH的平均灰度值与对照组相比无显著性差异(P>0.01)。结论 春季温度变化对钉螺的NOS、SDH、LDH及Ache活性均产生明显影响,温度升高使这些酶活性增强,提高了钉螺的活动性及繁殖力,为进一步研究全球气候变化对血吸虫病传播的影响提供了理论基础。

冬季温度变化对钉螺一氧化氮合酶的影响

目的 了解冬季气候变暖影响钉螺生存繁殖的作用机理。方法 冬季采集的钉螺放入不同温度的恒温培养箱 ,模拟外界气候变暖。用酶组织化学技术观察不同温度下钉螺中枢神经节、雌雄生殖腺一氧化氮合酶 (NOS)的变化。结果 中枢神经节 NOS的含量 0℃组及 - 4℃组明显高于对照组 (P<0 .0 5 )。睾丸组织 NOS的平均灰度值随着温度的降低呈上升的趋势 ,- 2℃以下的实验组同对照组相比差异有显著性 (P<0 .0 5 )。卵巢组织 NOS的平均灰度值变化较为复杂 ,其平均灰度值呈先上升后下降 ,然后再上升的变化趋势。结论 温度变化对钉螺的生存和繁殖都产生较大的影响 ,生殖腺对外界温度的变化敏感度明显大于神经节。冬季温度升高会使钉螺体内的 NOS发生变化 。

不同纬度地区钉螺生殖腺组织学 组织化学酶组织化学和超微结构观察

现场观察证明,钉螺在北纬33°15′以北地区生殖腺发育受到抑制,生殖力下降。为探索其机制,本文采用组织学、组织化学、酶组织化学与透射电镜技术,对放养在山东济宁、江苏徐州及镇江钉螺的生殖腺作了观察。结果显示:北移钉螺雌、雄生殖腺均萎缩,被空泡样结构取代;糖原、DNA和组蛋白含量减少;CEO、5′-NT、LDH和G-6-Pase活性降低;睾丸内SDH活性增高;精子数量减少,并呈不同程度的变性等。观察提示,北移钉螺生殖腺代谢障碍是导致腺体萎缩。生殖机能减退的重要原因。

铝对大鼠学习记忆神经递质脑结构形态的损害

通过240只Wistar大鼠,观察喂养不同剂量氯化铝鼠和对照组鼠,在3、6、12个月时大鼠学习记忆及神经递质和组织化学、超微结构的变化。结果表明500mg/kg铝可使大鼠学习记忆成绩减退,2500mg/Kg铝可使大鼠脑去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量明显低于正常对照组(P<0.05或<0.01);超微结构变化:C、D组的肝、肾、心肌及脑细胞内线粒体嵴断裂、溶解、崩溃及内质网表面颗粒减少,神经细胞变性,且突触囊泡聚积于突触前部,提示神经末梢释放的神经递质明显受阻。

冬季水淹后洲滩钉螺组织化学与超微结构的变化

实验表明，冬季持续水淹６０天以上，湖沼地区洲滩钉螺死亡率增高、繁殖力下降。为探索其机制，运用组织化学与透射电镜技术观察了受淹钉螺软体组织。结果显示：水淹３０、６０天螺体内糖原含量减少；ＡＬＰ、Ｍｇ＋＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｇ－６－ｐａｓｅ活性下降；ＳＤＨ．ＬＤＨ．ＡＣＰ活性增高；ＣＨＥ活性无明显变化。水淹６０天螺头足部软体与肝脏组织细胞肿胀并伴有线体肿胀、嵴断裂或空泡状变，粗面内质网脱颗粒，高尔基体囊状化、胞核增大或固缩，染色质凝集等。

钉螺经不同药物浸泡后酶组织化学变化的观察

目的 为研究槟榔碱 (Arecoline)灭螺增效的作用机制。方法 用加入和未加入增效剂的灭螺药物浸泡钉螺 2 4h后 ,观察不同浓度的Are单用或与杀螺剂合用对钉螺中枢神经节Mg2 + -ATPase、ChE、SDH、LDH的变化。结果 6 2 5mg/LAre浸泡钉螺 2 4h后 ,其中枢神经节Mg2 + -ATPase被明显破坏 ,ChE轻度破坏 ;1 5 6mg/LAre与 1 2 5mg/LNaPCP、 0 2 5mg/LNic、 15 6 2 5mg/LSG合用时 ,对钉螺中枢神经节Mg2 + -ATPase的破坏作用大于后三种药物单用时的作用 ;各实验组SDH、LDH无明显改变 ,与正常对照组无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 槟榔碱的增效作用机制在于增强其它杀螺药的药效作用 ,药物的杀螺位点在于阻断氧化磷酸化偶联生成ATP ,进而影响能量代谢 ,可能最终因ATP生成和利用障碍而使钉螺丧失机械运动及生物合成等生命功能而死亡。

不同死后时间骨骼肌运动终板乙酰胆碱酯酶(AChE)降解变化的研究——酶组织化学定量分析(英文)

为进一步了解骨骼肌的死后变化特点和规律及其与死后时间 (PMI)的关系 ,本文选用成年实验大鼠 ,系列观察了死后 0 - 96小时 (0 - 96 hpm)骨骼肌运动终板和肌纤维在不同温度条件下 ACh E(乙酰胆碱酯酶 ) ,SDH(琥珀酸脱氢酶 ) ,L DH(乳酸脱氢酶 ) ,Ca2 + - ATPase(钙激活三磷腺苷酶 )的酶组织化学变化 ,并使用图象处理系统对上述酶反应结果进行了定量分析和比较。结果发现 ,上述改变与 PMI有明显的相关关系 ,其中运动终板 Ach E因位于突触间隙的特殊位置以及自身的耐活性质 ,故反应明确 ,稳定性高 ,降解缓慢显示更清晰和持久的降解曲线 ,可作为藉肌肉组织降解变化用于推断死亡时间的标志酶。

B002对氯硝柳胺杀螺增效机理的研究

目的 探讨氯硝柳胺和 o,o'-二乙基 - o''- (邻氯苯乙腈肟 )硫代磷酸酯 (代号 B0 0 2 )合用的灭螺增效机理。 方法 采用肉眼观察、组织学、组织化学、酶组织化学方法对经氯硝柳胺和 B0 0 2分别处理后的钉螺软体进行了观察。 结果 氯硝柳胺对钉螺肝、睾丸、卵巢等各组织、器官都有损伤作用。B0 0 2使钉螺软体肿胀、外伸 ,失去附着能力 ,对外界反应能力降低 ,呈麻痹状态 ;头足部呈现明显病理性改变 ,糖元含量减少 ,神经节和足肌中的胆碱酯酶 (CHE)、一氧化氮合成酶 (NOS)活性降低。 结论 B0 0 2干扰钉螺神经介质的传递 ,使得头足部肌肉失去张力 ,对外界刺激反应消失 ,增加与氯硝柳胺接触介面 ,导致钉螺对氯硝柳胺的吸收增加 。

增产菊胺酯对小鼠睾丸间质细胞-氧化氮合酶和3β-羟基甾体脱氢酶影响的酶组织化学研究

本文用ＮＡＤＰＨ－黄递酶法研究了ＮＯＳ在小鼠睾丸的分布与活性，用ＮＢＴ法研究了３β－ＨＳＤＨ的活性，以探讨新型植物生长调节剂增产菊胺酯的生殖毒作用机理。光镜观察和图像分析表明，ＮＯＳ主要存在于睾丸间质细胞，而支持细胞和生精细胞未见或仅见弱阳性反应产物。进一步观察表明，随着剂量的增加，ＮＯＳ和３β－ＨＳＤＨ活性均明显减弱，睾丸内睾酮含量也随之减少。结果提示。

死后大鼠骨骼肌运动终板和肌纤维酶、免疫组化研究

为进一步了解骨骼肌组织的死后变化特点和规律及其与死后时间(PMI)的关系,本文选用成年实验大鼠。系列观察了死后0～96小时(0～96hpm)骨骼肌运动终板和肌纤维在不同温度条件下AChE(乙酰胆碱酯酶),SDH(琥珀酸脱氢酶),LDH(乳酸脱氢酶),Ca^(2+)-ATPase(钙激活三磷酸腺苷酶)的酶组织化学变化及运动终板突触素(synaptophysin,SYN)的免疫组织化学变化,并使用图像处理系统对上述酶反应结果进行了定量分析和比较。结果发现,上述改变与PMI有明显的相关关系,其中运动终板AChE因位于突触间隙的特殊位置以及自身的耐活性质,反应明确,稳定性高,降解缓慢显示更清晰和持久的降解曲线,可用作为推断死亡时间的标志酶。

肝缺血再灌流损伤和复方丹参保护作用的实验研究

观察大鼠肝脏缺血后再灌流时酶组织化学及超微结构的变化，同时观察复方丹参的保护作用。结果显示：肝缺血２小时后再灌流３小时，肝ＳＤＨ、Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｇ－６－Ｐａｓｅ的活性明显降低，ＬＤＨ、ＡＣＰ的活性明显增强。超微结构变化表现为肝细胞内线粒体肿胀、嵴断裂、空泡样变，粗面内质网颗粒明显减少，肝窦扩大、窦壁内皮细胞肿胀，胆小管扩张，微绒毛减少、断裂。

肝炎平对D－氨基半乳精所致肝损害保护作用的酶组织化学研究

本实验采用Ｄ－氨基半乳糖（Ｄ－ＧａｌＮ）诱导的大鼠急性肝损伤模型，观察大鼠肝脏组织化学的变化，探讨肝炎平对急性肝损伤的保护作用。实验分为四组，即正常对照组、模型组、肝炎平及肝得健保护组。结果表明：肝炎平对肝细胞膜系统有一定的保护作用。肝炎平组和肝得健组ＳＤＨ、ＣＣＯ及ＣｈＥ活性明显高于模型组，且与正常对照组相近。本实验模型组ＡＣＰ的活性明显高于正常组，而肝炎平组ＡＣＰ的活性明显低于模型组，与正常对照组无显著性差异。提示：肝炎平可显著改善因Ｄ－氨基半乳糖所致肝损害的作用。且其对肝细胞的保护作用与肝得健一致。

实验性肝硬化酶组织化学变化的研究

实验选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠１５只，随机分为正常组５只，实验组（４０％ＣＣｌ４植物油皮下注射组）１０只，同时喂养９周。断头法快速处死动物，立即取肝，冰冻切片，用酶组织化学和图像分析法观察肝内主要代谢酶活性变化。结果显示：实验组肝内ＳＤＨ、ＣＣＯ活性降低，ＬＤＨ、ＮＯＳ活性升高。

急性肾功能衰竭对肝损害的实验研究

探讨急性肾功能衰竭 (以下简称为 ARF)时尿毒症毒素对肝的损害情况 ,为临床防治提供形态学依据。Wistar大白鼠 32只 ,随机分成正常对照组 ,14只 ;双输尿管结扎结扎组 ,18只。模型建成后 2 3- 37小时内将动物处死 ,取肝组织作NOS、 MAO、 SDH、 L DH、 Ch E、 ATPase、 ACP等项酶组织化学显色及超微结构观察。结果显示 :实验组 SDH、 Mg2 + -ATPase 的活性均由正常的强阳性 ( )下降为阳性 (+) ;MAO、 Ch E的活性均由正常的中等阳性 ( )下降为阳性(+) ;ACP、 L DH的活性均由阳性 (+)增强到中等阳性 ( ) ;NOS活性由正常的弱阳性 (± )增强为阳性 (+) ;肝细胞器结构受损。结果表明 :ARF的尿毒素的大量淤积通过影响肝脏酶的活性来干扰和抑制糖代谢、三羧酸循环、蛋白质合成及解毒等功能 ,并导致肝损害发生。 2用改良的 NADPH-黄递酶法可显示肝组织 NOS的存在 ,该法操作简便 ,经济 ,特别适用于同时需要留取活组织做其它检查者。当输尿管结扎时 。