促内皮和抗炎的丹参酮ⅡA洗脱支架涂层研究

目的针对目前临床心血管支架存在的晚期血栓和支架内再狭窄等问题,通过超声雾化喷涂技术构建传统中药丹参酮ⅡA(TS)洗脱支架,探究其在动脉粥样硬化病变部位的治疗作用。方法采用超声雾化喷涂技术构建TS洗脱支架;利用水接触角(WCA)检测仪、傅里叶变换红外吸收光谱仪(FTIR)、球囊扩张实验及场发射扫描电镜(SEM)等对涂层表面的亲疏水性、化学成分及结构、涂层机械性能进行检测分析;采用紫外-可见光分光光度计(UV-Vis)对TS涂层药物释放行为进行检测;通过体外溶血率和血小板实验初步评价涂层的血液相容性;通过体外细胞相容性实验评估TS涂层对内皮细胞(ECs)和平滑肌细胞(SMCs)增殖的影响,以及对巨噬细胞炎症行为及表型的调节作用;通过半体内血液循环实验进一步探索涂层抗血栓形成效果。结果WCA、FTIR、SEM和UV-Vis等检测结果证实了TS洗脱支架的成功制备,涂层中TS在体外能够保持28 d持续释放;体外生物相容性结果表明,TS与聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)质量比为30%的涂层具有显著抑制血小板的黏附和激活、促进ECs及抑制SMCs增殖的作用,同时能够有效调节巨噬细胞的炎症行为;半体内血液循环实验结果表明,涂层具有良好的抗血栓形成的效果。结论制备的TS洗脱支架具有选择性促进内皮增殖,抑制平滑肌增生、调控炎症的作用,以及优异的抗血栓形成能力,能够为病变血管修复提供一种潜在的解决方案。

基于贻贝仿生构建高效抗菌及良好血液相容性的聚胺-酚表面

目的赋予血液接触类材料优异的表面抗菌性能。方法受天然贻贝黏附现象的启发,通过多巴胺(Dopamine,DA)、ε-聚赖氨酸(ε-Poly-L-lysine,ε-PL)、高碘酸钠(Sodium Periodate,NaIO4)构建一种简易、快速的聚胺-酚涂层(ε-PL@PDA),同时利用ε-PL丰富的氨基质子化形成的阳离子,实现表面高效抗菌的目的。其中DA和ε-PL通过共价交联形成酚胺聚合物,酚胺共同介导基底材料黏附形成涂层。通过傅里叶变换红外光谱(FTIR)、X射线光电子能谱(XPS)、场发射扫描电镜(SEM)、椭圆偏光、氨基定量、水接触角(WCA)等材料学表征评价ε-PL@PDA涂层的理化性能;通过菌落计数法、细菌活/死染、液体法等细菌实验评价涂层抗菌性能;通过内皮细胞黏附与增殖实验评价其细胞相容性;通过血小板黏附与激活及半体内血液循环实验验证其血液相容性。结果材料学表征结果证明,ε-PL@PDA富氨基涂层成功制备,同时ε-PL的浓度大小会影响涂层的沉积过程;细菌实验表明,ε-PL@PDA涂层具备优异的抗菌性能,当ε-PL质量浓度为3 mg/mL时,对大肠杆菌和表皮葡萄球菌的抑制率高达91%;细胞实验和血液相容性实验表明,相较于316不锈钢(316L SS),ε-PL的质量浓度为3、30 mg/mL时,涂层均不会促进细胞毒性增强、血小板黏附和激活以及血栓形成。结论ε-PL@PDA涂层能够在不影响细胞相容性和血液相容性的基础上有效提高表面抗菌能力,因此,该高效便捷且适用性强的表面抗菌策略或有助于解决临床血液接触类器械细菌感染等问题。

基于Notch信号通路抑制剂的多功能血管支架涂层制备及表征

炎症反应贯穿动脉粥样硬化(AS)全过程,且与AS病变部位血管支架植入后的一系列不良事件高度相关,包括支架内再狭窄(ISR)、晚期血栓(LST)以及支架内新生动脉粥样硬化(ISNA)等。在诸多炎性疾病(包括AS)的发生及进展过程中,Notch信号通路均被异常激活。因此,Notch信号通路抑制剂(NSPI)的装载有望减轻炎症,进而缓解支架植入并发症。基于此,本工作提出了以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体,采用超声雾化喷涂法将Notch信号通路抑制剂RO4929097装载于支架表面的改性策略,构建NSPI/PLGA多功能血管支架。研究结果表明,NSPI/PLGA血管支架的RO4929097有效释放长达30 d,可同时实现抑制炎症反应、促进内皮细胞增殖和抗平滑肌细胞增殖以及抗凝血等多种功能,在介入治疗领域具有极大的应用潜力。

基于贻贝灵感和点击化学构建的高效抗菌涂层

目的通过对材料表面进行改性,形成一层具有抗菌肽(ABP)分子的涂层,使得材料具有高效抗菌的功能。方法利用多巴胺(DA)邻苯二酚结构的黏附能力以及己二胺(HD)的多胺化学结构,将DA与HD按照一定的配比混合,通过简单的一步分子自组装,在材料表面构建多巴胺-己二胺(DA/HD)基底涂层。通过DA/HD涂层表面丰富的氨基与叠氮化的NHS(NHS-N_(3))发生酰胺反应,从而在DA/HD涂层表面引入叠氮基团,得到N_(3)涂层。再通过点击反应在N_(3)涂层表面接枝ABP,得到ABP涂层。通过在多种不同材质表面制备DA/HD涂层与进行氨基量密度测定,对DA/HD涂层的广谱适用性进行分析。利用水接触角测量仪(WCA)、傅里叶变换红外仪(FTIR)、X射线光电子能谱仪(XPS)、耗散型石英晶体微天平(QCM-D)以及椭圆偏振光谱仪等,对涂层亲疏水性、成分及结构等进行检测分析。通过细菌试验检测以及与多种已报道抗菌涂层的抗菌率进行综合比较来评价ABP涂层的抗菌性能。结果在多种不同材质表面都能成功制备DA/HD涂层,且具有较高的氨基量密度,表明DA/HD涂层具有广谱的适用性。通过WCA、FTIR、XPS、QCM-D以及椭圆偏振光谱仪的检测结果,证实了基于DA/HD基底涂层的ABP涂层制备成功且接枝量高达352.7 ng/cm^(2)。表面抗菌试验以及与多种抗菌涂层的抗菌率比较结果表明,ABP涂层对大肠杆菌和表皮葡萄球菌都具有高效的抗菌率,且抗菌率分别高达(89.0±9.9)%和(97.3±1.7)%。结论DA/HD涂层具有广谱的适用性。对基底表面进行改性后,成功在其表面形成一层具有高效抗菌功能的ABP涂层。该涂层与细菌直接接触,能够破坏菌膜,对革兰氏阴性菌和阳性菌具有高效的抑制作用。

儿茶酚-(胺)表面化学介导的一氧化氮催化释放涂层研究

目的在316L不锈钢(SS)表面构建原位一氧化氮(NO)催化释放涂层,使其能特异选择性地抗凝血、抑制平滑肌细胞(SMCs)增生,从而促进内皮细胞(ECs)生长。方法在弱碱性水溶液中,选用多巴胺(DA)和己二胺(HD)为前驱体,利用多巴胺邻二苯酚结构自聚合沉膜的能力、多巴胺与己二胺的酚-(胺)表面化学,通过简单的一锅法在316L SS表面构建富氨基粘附涂层DA/HD。再通过碳二亚胺化学交联反应,共价接枝螯合Cu^(2+)的1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四羧酸(DOTA),最后获得均匀且稳定的NO催化释放涂层(命名为Cu-DOTA@DA/HD)。结果DA/HD涂层表面的氨基密度高达22 nmol/cm^(2),实现了Cu-DOTA的有效固定,其NO催化释放速率可达5.2×10^(-10)mol/(cm^(2)·min)。Cu-DOTA@DA/HD涂层显著地抑制了血小板的粘附和激活,也能有效抑制血栓的形成,其表面血栓总质量由316L SS的(40.3±10.3)mg降低至(3.0±0.4)mg。Cu-DOTA@DA/HD涂层催化释放的NO赋予了316L SS选择性地抑制SMCs粘附和增殖,从而促进了ECs生长的功能。结论基于儿茶酚-(胺)表面化学构建的NO催化涂层,成功地实现了316L SS表面持续、稳定的NO催化释放,赋予了其抗凝血、选择性抑制SMCs增殖和促进EC生长等多重生物学功能,在血液接触类器械(如体外循环导管和血管支架表面)应用方面具有潜在价值。

p53、E-cadherin和MMP7在胆囊癌中的表达及意义

目的检测p53、E-cadherin和MMP7在胆囊癌组织中的表达情况,探讨它们与胆囊癌的发生、发展、局部浸润、远处转移及预后的关系,以及它们之间的相关性。方法用免疫组化法(SP法)检测54例胆囊癌组织中p53、E-cadherin和MMP7的表达情况。结果54例原发性胆囊癌组织中p53、E-cadherin和MMP7阳性表达率分别为48.1%、59.3%和94.4%。p53过度表达与胆囊癌分化程度、临床分期有关;E-cadherin表达下降或完全丧失与临床分期、神经浸润及淋巴结转移有关;MMP7表达升高与临床分期、分化程度、肝脏浸润、神经浸润及淋巴结转移有关。相关分析表明MMP7与E-cadherin的表达呈负相关。生存分析提示MMP7的阳性表达、肿瘤TNM分期、肝脏浸润、神经浸润及淋巴结转移与术后生存率有关,Cox多因素分析表明TNM分期、神经浸润与胆囊癌患者的预后有关。结论p53、MMP7及E-cadherin可作为胆囊癌重要的恶性生物学指标;MMP7与E-cadherin的表达呈负相关;MMP7的表达可提示胆囊癌患者的预后,并可为胆囊癌患者抗基质金属蛋白酶治疗提供依据。

雌、孕激素受体和p53在胆囊癌中的表达及其临床意义

目的:探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和p53在原发性胆囊癌发生、发展中的作用及相互关系,研究它们的表达与胆囊癌的组织学类型、分化程度、临床分期及预后的关系。方法:用免疫组织化学法检测54例原发性胆囊癌组织中ER、PR和p53的表达水平。结果:54例原发性胆囊癌组织中ER、PR和p53阳性表达率分别为38.9%、37%和48.1%。p53的阳性表达与胆囊癌分化程度、临床分期密切相关,ER与PR的表达呈正相关,PR阳性的患者的累积生存率明显高与阴性者,临床分期和神经浸润与胆囊癌患者的预后有关。结论:p53的表达与胆囊癌分化程度、临床分期有关,ER与PR的表达呈正相关,PR的表达与临床分期和神经浸润与胆囊癌患者的预后有关。

抑癌基因DPC4与胰腺癌的研究进展

目的介绍抑癌基因胰腺癌缺失基因(DPC4)的改变与胰腺癌的发展及预后的关系。方法复习近几年的相关文献,进行综述。结果抑癌基因DPC4位于18号染色体上,其编码产物为Smad4蛋白。Smad4蛋白是转移生长因子β信号传导通路的中心分子,所有生物学效应都是Smad4蛋白与不同的Smads蛋白相互作用的结果。约有50%的胰腺癌发生DPC4基因的缺失或失活,DPC4基因的表达缺失与胰腺癌的发展及预后有密切关系。结论抑癌基因DPC4的改变与胰腺癌的发展及预后有密切关系,但仍需进行深入研究。

双烷基二苯醚二磺酸钠的制备与性能

以二苯醚和溴代十二烷为原料合成了由刚性基团连接的Gemini阴离子表面活性剂———双十二烷基二苯醚二磺酸钠(C12-DADS),用硅胶柱对其分离纯化,考察了该物质的性能,并与单烷基苯磺酸钠(C12-LAS)的性能进行了对比性的研究。结果表明:Gemini表面活性剂DADS的临界胶束浓度为6.32×10-6mol/L,比C12-LAS的临界胶束浓度低两个数量级;表面张力为42.02 mN.m-1,与C12-LAS相当;泡沫稳定性长达24 h,钙皂分散力为10.5,分解温度大于400℃,性能远优于C12-LAS。该表面活性剂具有较好的应用前景。

烷基二苯醚的合成

分别以烷基化剂溴代十二烷、溴代十四烷、溴代十六烷与二苯醚反应,制得系列烷基二苯醚产品。通过正相高效液相色谱法监测烷基系二苯醚的合成,优化其合成工艺。色谱条件为:色谱柱,C18kromasil(5μm,250×4.6mm);流动相,体积比V正己烷∶V异丙醇=18∶1;流速,1mL/min。最佳合成工艺为:各反应物的摩尔比n二苯醚∶n催化剂∶n溴代烷=1∶2∶5;反应温度为75℃,反应时间为6h。双十二烷基二苯醚、双十四烷基二苯醚、双十六烷基二苯醚的产率分别为79.62%、72.38%、66.83%。

钛表面固定特异性识别内皮祖细胞的多肽适配子

在钛表面固定可与循环血液中的内皮祖细胞(EPC)特异性结合的多肽适配子,构建内皮祖细胞的特异性识别表面,用于心血管材料的表面改性.首先,采用固相合成法合成可与EPC特异性结合的多肽适配子,其序列为TPSLEQRTVYAK,并在羧基端进行生物素修饰;然后,采用磷酸处理钛表面,在钛表面获得化学键合的羟基,该羟基化表面与3-氨丙基三乙氧基硅烷反应,在钛表面获得游离的氨基,进一步通过碳二亚胺(EDC)介导,在钛表面接枝上生物素;最后,通过生物素-亲和素识别体系,实现EPC特异性多肽适配子在钛表面的固定.采用场发射扫描电子显微镜(SEM)、漫反射红外光谱(DR-FTIR)和免疫荧光分析等手段对样品进行了表征.本研究为多肽适配子在材料表面的固定提供了一种有效的方法,为进一步的生物医学应用研究提供了基础.

双子双酯硫酸钠的合成及性能

以十二醇、乙二醇二环氧甘油醚和氯磺酸为原料,以BF3-乙醚为催化剂,通过三步法制备阴离子型双子表面活性剂双十二烷基乙氧基二硫酸酯钠;红外光谱对其结构进行了表征,测定了其表面活性和发泡力等性能。结果表明:该双子表面活性剂有良好的水溶性,室温下溶解度大于40%(质量分数),Krafft点低于-5℃;cmc为0.17 mmol.L-1,γcmc为29.9 mN.m-1;溶液浓度为1 mmol/L时,即时泡沫高度为146 mm;具有良好的去污、润湿和乳化性能。

胆囊癌肉瘤的临床及病理学观察

目的通过观察3例胆囊癌肉瘤的临床病理学特点及免疫组化表型,结合文献探讨胆囊癌肉瘤的发生、组织学特点、鉴别诊断及预后。方法采用光镜及免疫组化LSAB法对3例胆囊癌肉瘤标本进行观察分析。结果3例胆囊癌肉瘤患者均为成年女性。肿瘤呈菜花状或息肉状突入腔内,表面有坏死出血,肿瘤平均直径为55cm。光镜下胆囊癌肉瘤由上皮源性恶性肿瘤及间叶源性恶性肿瘤混合组成,上皮成分多表现为腺癌或鳞状细胞癌,间叶成分则表现多样。免疫组化显示上皮源性恶性成分表达上皮细胞标记(如CK),而不表达间叶组织标记(如vimentin、SMA、CD68),间叶成分根据构成不同而表达不同的间叶组织标记,但不表达上皮细胞标记。术后随访,2例复发,3例存活时间分别为20天、8个月和9个月。结论胆囊癌肉瘤是一罕见的高恶性肿瘤,多发生于中、老年女性,由癌和肉瘤两种成分混合组成,需要与肉瘤样癌及癌伴间叶成分化生鉴别,其预后主要与肿瘤分期有关。

以肾病综合征为表现的毛细血管内增生性肾小球肾炎的临床与病理

目的探讨毛细血管内增生性肾小球肾炎并发肾病综合征的临床病理特点与发病机制。方法12例患者肾穿刺术后,标本经常规固定、包埋、切片,进行HE、六胺银、Masson和免疫荧光染色,其中3例予以电镜观察。结果肾小球系膜细胞、内皮细胞增生;小球内可见中性多核白细胞渗出。10例毛细血管襻和(或)灶性系膜区有免疫复合物沉积。3例上皮细胞足突融合消失,上皮下电子致密物沉积。结论EPGN发生大量蛋白尿的机制与肾小球滤过膜状态的改变关系密切,使其对蛋白的通透性大大增加。

E-cadherin和MMP7在胆囊癌组织中的表达及其临床意义

目的检测E-cadherin和MMP7在胆囊癌组织中的表达情况,探讨其与局部浸润、远处转移及预后的关系以及两者的相关性。方法用免疫组化SP法检测63例胆囊癌中E-cadherin及MMP7的表达,10例慢性胆囊炎作为对照。结果癌组织中MMP7阳性率明显增高,其阳性表达与胆囊癌的TNM分期、肝浸润及淋巴结转移有关(P<0·05);癌组织中E-cadherin阳性表达率下降,阳性信号紊乱,呈点状、短线状,其表达降低与肿瘤分期、淋巴结转移及神经浸润有关(P<0·05)。Spearman相关分析表明,MMP7与E-cadherin在胆囊癌组织中的表达呈负相关(P<0·05)。生存分析提示MMP7阳性表达、肿瘤TNM分期及神经浸润与术后生存率有关。结论MMP7表达升高与E-cadherin表达降低是胆囊癌恶性生物学指标之一;MMP7与E-cadherin的表达呈负相关;MMP7的表达可以提示胆囊癌患者的预后,并可为胆囊癌患者的抗基质金属蛋白酶治疗提供依据。

Gemini表面活性剂的结构特点及在采油中的应用

文章简要地介绍了Gemini表面活性剂的结构特点;从表面活性剂的作用原理出发,介绍了Gemini表面活性剂的优良性能:如表面张力、泡沫力、润湿力、优异的协同效应、耐温抗盐性等;在此基础上,阐述了该类表面活性剂在油田三次采油上的应用前景。

酯交换法合成聚甘油丙烯酸酯

以聚甘油、丙烯酸甲酯为原料,利用酯交换法,以硫酸为催化剂,对苯二酚为阻聚剂,无溶剂,在共沸温度下,合成了一种水溶性聚甘油丙烯酸酯破乳剂。考察了催化剂用量、阻聚剂用量、反应时间、聚甘油申羟基与丙烯酸甲酯之摩尔比、不同聚合度聚甘油合成的聚甘油丙烯酸酯对原油乳状液脱水率的影响。实验表明,考察的影响条件均存在最佳值,即在催化剂用量占反应物总量的2%(W),阻聚剂用量占丙烯酸用量的2%(w),反应时间6h,聚甘油申羟基与丙烯酸甲酯之摩尔比为2.6:1,聚甘油聚合度为6.3,在破乳剂用量为300mg/L时,破乳脱水率达69%。

“一步法”构建基于Zn^(2+)的抗菌表面

不依赖于抗生素的抗菌表面是生物材料及器械设计领域的重要研究内容,可以避免耐药性细菌问题。现有材料表面抗菌策略仍然存在步骤较为繁琐、反应条件过于苛刻等不足,因此,本研究以多巴胺和硫酸锌(ZnSO_(4))为原料,在常温、水相条件下采用“一步法”构建广谱性含锌聚多巴胺抗菌涂层(PDA@Zn)。水接触角、涂层厚度和X光电子能谱等结果证实PDA@Zn涂层成功构建。涂层中的锌以Zn^(2+)的形式与PDA中邻苯二酚官能团配位结合;涂层的表面Zn^(2+)密度可以通过改变ZnSO_(4)投料的浓度来调控。抗菌实验的结果表明ZnSO_(4)投料浓度为1 mg/m L时所构建的PDA@Zn涂层(PDA@Zn/1)具有优异的杀菌效果,对大肠杆菌和表皮葡萄球菌的抗菌率分别为99.7%和99.3%。体外细胞培养试验结果表明,PDA@Zn/1涂层上L929的24 h和72 h相对增殖率分别为63.63%及48.32%,具有一定的细胞毒性。该方法提供了一种高效、简单的表面抗菌策略,但该策略的生物相容性还有待进一步提升。

酚–胺表面化学构建一氧化氮催化涂层

一氧化氮(NO)作为内皮功能关联因子,因其具有多重生物学功能,被广泛应用于多学科领域。发展先进的表面涂层技术固定NO催化功能分子是构建NO-催化型材料的常用手段。然而,材料表面实现功能分子的修饰往往涉及到复杂的表面预处理工艺以及功能分子接枝所需的多重步骤和昂贵试剂。因此,本研究发展“酚–胺”表面化学,选用具有邻苯二酚结构的酚类化学物质和具有类NO催化活性的分子胱胺(CySA)为涂层制备原材料,在弱碱性有氧的简单水溶液体系,基于“酚–胺”化学交联反应,通过“一步浸涂”法在材料表面构建以双硫键为NO催化活性中心的聚合粘附涂。该涂层通过催化内源性NO供体亚硝基硫醇实现NO持续释放,从而赋予材料抗凝、抑制平滑肌细胞增殖和促进内皮细胞生长的多重生物学功能。该简单、低成本、绿色的NO-催化型表面涂层方法显示出在血液接触类植入/介入器械表面改性上的广阔应用前景。