基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS代谢组学和16S rRNA基因测序探讨骨疏丹补肾机制

目的 整合代谢组学和肠道微生物组学的研究策略探讨骨疏丹(Gushudan, GSD)预防氢化可的松诱导的肾阳虚证(kidney-yang deficiency syndrome, KYDS)大鼠的补肾作用机制。方法 分别采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)的非靶向代谢组学和16S rRNA基因测序分析的肠道微生物组学方法,分析正常对照组、肾阳虚证模型组、骨疏丹给药组和阳性对照组大鼠粪便代谢物谱与肠道菌群组成,采用Pearson相关分析探讨内源性差异代谢物与差异菌群之间的相关性。结果 基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS的代谢组学方法在正负离子模式下共发现骨疏丹参与调控肾阳虚症的22种差异代谢物,如色氨酸、鹅去氧胆酸、肌酐和油酸酰胺等,主要涉及氨基酸代谢、胆汁酸代谢、能量代谢和脂质代谢。基于16S rRNA测序分析发现骨疏丹在属水平显著上调普雷沃氏菌(Prevotellaceae)的相对丰度(P<0.05),显著下调颤杆菌(Oscillibacter)的相对丰度(P<0.05)。相关性分析结果表明甘胆酸和鹅去氧胆酸与在属水平显著改变的普雷沃氏菌(Prevotellaceae)显著正相关(P<0.05),而与考拉杆菌(Phascolarctobacterium)显著负相关(P<0.05)。二十二碳六烯酸与毛螺菌(Lachnospiraceae)显著负相关(P<0.05)。结论 骨疏丹通过良性调节内源性代谢和肠道菌群结构发挥补肾作用,为中药通过肠-肾轴治疗疾病提供新的思路和方法。

分析化学的专业差别化教学设计与实践

通过从分析化学课程特点、专业差别化教学现状,进而从教学团队的建设、教学内容及教学形式的设计、过程性评价、缩减学时背景下的教学设计的实现等方面,探讨了分析化学专业差别化教学改革的设计与实践。分析化学专业差别化教学改革应注重“基础知识+专业氛围”及“线上线下混合式”教学,使学生们在课程学习流程导图的引导下,循序渐进地学习理论并巩固和拓展专业知识,建立学习自信及专业兴趣。对于相应的过程性评价,采用的评价模式能够促进学生达到自身的高标准、高水平即是实现了评价的目的。

基于频谱图的土壤有机碳含量高光谱反演

土壤有机碳含量关乎地力强弱、生态均衡及农业的永续经营,是精细农业实践中不可或缺的指标。高光谱定量分析技术以其高效性和成本优势成为评估该指标的首选方法。但当前研究多基于少量单一样本,且在光谱数据处理和建模关键技术等方面,仍需突破以提高有机碳检测的准确度。为此,本研究以欧盟统计局提供的LUCAS多种类型土壤光谱数据集作为分析对象,设计了一种基于频谱图的土壤有机碳(SOC)含量高光谱反演方法。将土壤高光谱数据进行预处理,去除光谱中的噪音和冗余信息;运用小波包变换(WPT)、短时傅里叶变换(STFT)将一维光谱数据分别转换成大小为33×34和128×36的二维频谱图,提高光谱特征信息维度,以更好适应卷积神经网络(CNN)学习结构,同时二维形式呈现了吸收率随波长变化的频率分布,可以更精确地显示不同频率或波长上的吸收率差异;将频谱图输入构建的CNN模型进行回归预测,估测SOC含量。对比偏最小二乘回归(PLSR)和一维卷积模型(1D-RDC)与STFT-CNN、WPT-CNN估测模型。结果表明,经小波包变换和短时傅里叶变换后得到的频谱图能够很好体现光谱中的特征信息,配合CNN模型的特征提取和学习能力能够有效地估测大规模土壤高光谱中SOC含量,WPT-CNN模型估测效果最优(决定系数R 2,0.84;均方根误差RMSE,11.2),STFT-CNN模型的回归预测效果次之(R 2,0.77;RMSE,13.29)。因此,基于频谱图的土壤有机碳含量高光谱反演方法对大型土壤高光谱数据集中的土壤有机碳含量估测有较好的效果,可为构建智能化的土壤属性预测技术提供参考。

“教考”分离模式下色谱分析课程的教学改革

随着高等教学改革的不断推进,教考分离模式逐步替代传统的教考合一方式。笔者以教考分离为背景,深入分析传统评价机制的弊端,从教学实践出发,通过重教、实学,培养学生将知识学以致用,通过严考、综评来保证结果的公平性与客观性。笔者对色谱分析专业中开展教考分离的必要性及实践进行分析,同时为教学改革提供参考与借鉴。

青娥丸提取物对成骨样细胞UMR106增殖分化作用的研究

目的 :研究青娥丸提取物对成骨样细胞UMR10 6增殖分化的作用 ,筛选青娥丸防治骨质疏松的有效部位。方法 :利用MTT法和对硝基磷酸盐法 ,考察青娥丸不同提取液对UMR10 6的增殖和分化作用。结果 :青娥丸乙醇提取物在 4.8× 10 -4mg/ml和 4.8× 10 -3 mg/ml浓度时 ,有最强的促细胞增殖和分化的活性 ,萃取后的各个部分均有显著地促细胞增殖作用 ,而只有乙酸乙酯层具有显著的促细胞分化作用。结论 :青娥丸乙醇提取物具有显著促细胞增殖和分化的活性 ,乙酸乙酯层是青娥丸促细胞增殖和分化的主要活性部位。

RP-HPLC Determination of Pinoresinol Diglucopyranoside in Qing′e Pill Extract

Aim To develop and determine pinoresinol diglucopyranoside in Qing'e Pill, atraditional Chinese compound preparation containing Eucommia ulmoides Oliv. as the principal drug,by a reverse-phase high-performance liquid chromatographic method (RP-HPLC) . Methods The extract ofQing'e Pill was refluxed with 75% ethanol, purified on an AB-8 macroporous adsorption resin columnand then injected into HPLC system. The HPLC assay was performed on an ODS analytical column with amixture of methanol-acetonitrile-water (24:3:78, V/V/V) as the mobile phase at a flow-rate of 1.0mL·min^(-1), and a UV detector set at 227 nm. Results Good linearity between peak area andconcentration was found in the range of 5.5 - 170 μg·mL^(-1) for pinoresinol diglucopyranoside ( r> 0.9998) . The average recovery was 99.3%. The intra-day assay RSD and the inter-day assay RSDwere 1.3% and 2.8%, respectively (n = 5). The content of pinoresinol diglucopyranoside in Qing'ePill was determined to be 0.446 +- 0.012 mg·g^(-1) (n = 10). Conclusion The RP-HPLC method wasproved to be sensitive, specific, accurate and precise for the determination of pinoresinoldiglucopyranoside in Qing' e Pill.

成骨细胞的骨形成调控机制

成骨细胞在骨的形成、发育、改建、修复过程中发挥重要作用 ,多种生长因子可影响成骨细胞的增殖、分化及其合成细胞外基质的作用。多种生长因子对成骨细胞的作用既有相同之处 ,也有不同点。寻找一种或联合应用几种不同的生长因子达到既能促进成骨细胞增殖又保持其成骨活性将是今后研究的热点。

药学教育中分析化学实验规范化教学的改革与实践

"分析化学实验"是为药学类专业学生开设的一门专业基础课程,该课程建设是培养学生综合实验能力的重要组成部分。从实验教学视频和课件的制作、教学考核评分体系、实验基本操作规程、教师培训以及教学制度等方面,探讨了规范化教学在"分析化学实验"课程中的作用,以期提高教学质量和人才培养质量,增强学生创新素质和实践能力,完善分析化学实验课程体系的建设。

分析化学线上实验教学的研究与实践初探

人们在一起可以做出单独一个人所不能做出的事业;智慧+双手+力量结合在一起,几乎是万能的——【美】韦伯斯特。没有一个冬天不会过去,没有一个春天不会到来。面对突如其来的疫情,我们共克时艰,一定能打赢这场疫情防控的大仗。2月底接到教务处通知,3月16日“分析化学”课程将面向全校各专业的50个班级,全面开启理论课和实验课双重线上授课任务,这对于完全没有在线授课经验的老师们来说无疑是一次前所未有的挑战和考验。

中药质量控制的研究策略和色谱技术

综述了色谱技术作为现代高效分离分析技术在中药药效物质基础研究和中药质量控制中的重要作用。提出中药药效物质组学研究策略,以实现中药药效物质基础与作用机理研究的一体化,进而从深层次揭示和全面控制中药的内在质量。论述结果表明,现代色谱及其联用技术是中药质量研究的重要技术平台之一。

HPLC-MS^2鉴定大青叶水提液中的5种化学成分

目的:鉴定大青叶水提液中的化学成分。方法:大青叶的水提液经HPLC分离后,收集各色谱峰的馏分进行二级质谱分析,并和胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤对照品的水溶液进行比较。结果:大青叶水提液HPLC中的5个色谱峰分别与胞苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤和次黄嘌呤对照品的t_R和UV光谱一致,并具有相同的二级质谱碎片离子。结论:大青叶中含有胞苷、次黄嘌呤、尿苷、黄嘌呤和鸟苷等5种成分。

无梗五加果化学成分的研究(英文)

从无梗五加(Acanthopanax sessiliflorus(Rupr.et Maxim.)Seem.)果70%乙醇提取物中分离鉴定了12个化合物。经波谱鉴定为东莨菪内酯(1),原儿茶酸甲酯(2),槲皮素(3),无梗五加苷B(4),金丝桃苷(5),(-)-pinoresinol-4,4′-di-O-β-D-glucopyranoside(6),chiisanoside(7),22α-hydroxychiisanoside(8),niduloic acid(9),胡萝卜苷(10),东莨菪苷(11)和无梗五加苷D(12)。其中化合物9为新天然产物,化合物1,2,6和11是首次从五加科植物中分离得到,化合物3是首次从五加属植物中分离得到。

高效液相色谱法测定中药材补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的含量

建立了测定中药材补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素含量的高效液相色谱法。采用的色谱条件为:HypersilODS色谱柱(150mm×4 6mmi d ,5μm),以乙腈 水(体积比为30∶70)为流动相,检测波长为245nm。在此条件下,补骨脂素、异补骨脂素和内标物联苯苄唑获得了较好的分离。补骨脂素和异补骨脂素质量浓度分别为0 50～10 0mg/L时,组分与内标的峰面积比值与质量浓度之间的线性关系良好(r=1 000),最低检测限为10μg/L(S/N=3)。所建立的方法用于不同产地的补骨脂素药材分析,结果令人满意。

基于主成分分析的骨碎补药材乙醇和环己烷提取物的高效液相色谱指纹图谱及指标成分的定量分析

建立了骨碎补药材乙醇和环己烷提取物的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并利用主成分分析法(PCA)对指纹图谱进行统计分析,以各主要色谱峰的保留时间和峰面积为变量得到score图和loading图。在score图和loading图中,骨碎补的正品和非正品可明显区分,且揭示出对此区分贡献最大的4个潜在指标成分,其中已知成分为柚皮苷、新北美圣草苷和E-4-O-β-D-葡萄糖酰咖啡酸。同时测定了这3种成分在19批正品和非正品骨碎补药材中的含量,其中10批骨碎补药材正品中3种成分的含量为:柚皮苷6.36～10.1mg/g,新北美圣草苷5.14～9.21mg/g,E-4-O-β-D-葡萄糖酰咖啡酸1.87～3.19mg/g。该方法更全面地反映了药材的化学成分信息,并能从定性和定量两方面控制骨碎补药材的内在质量。

HPLC同时测定骨碎补药材中新北美圣草苷和柚皮苷的含量

目的:建立同时测定骨碎补类药材中新北美圣草苷和柚皮苷含量的反相高效液相色谱法。方法:采用 Hypersil ODS2色谱柱(5μm,250mm×4.6mm),以乙腈-0.4%醋酸水溶液(20:80)为流动相,流速为1.0mL·min^(-1),柱温为室温,检测波长为283nm。结果:样品中新北美圣草苷和柚皮苷平均回收率分别为100.1%和99.4%;新北美圣草苷和柚皮苷的线性范围分别为12～480μg·mL^(-1)(r=0.9997)和10～400μg·mL^(-1)(r=0.9999)。结论:该方法可用于骨碎补药材的质量控制,方法简便,准确,重现性好。

大黄HPLC指纹图谱分析

目的采用高效液相色谱法建立大黄药材的指纹图谱,为其质量控制提供依据。方法KromasilC8(4.6mm×200mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.4%冰醋酸溶液梯度洗脱,流速0.8mL·min-1,检测波长254nm。结果通过聚类分析,14个正品大黄样品被聚为2类,非正品被分为4类。通过相似度计算,14个正品大黄样品的相似度均在0.7以上,其余非正品的相似度均小于0.60。结论本方法可用于大黄的真伪鉴别和质量评价。

无梗五加根中苯丙素类化合物的研究(英文)

从无梗五加(Acanthopanax sessiliflorus(Rupr.et Maxim.)Seem.)根70%乙醇提取物的乙酸乙酯层中提取分离得到8个苯丙素类化合物。经理化和波谱分析鉴定为(+)-表芝麻脂素(1)、(-)-芝麻脂素(2)、赛菊芋黄素(3)、洒维宁(4)、咖啡酸甲酯(5)、对羟基桂皮酸(6)、(-)-丁香脂素(7)、(+)-松脂素(8)。化合物8是首次从五加科植物中分离得到,化合物1和5是首次从五加属植物中分离得到,化合物3、6和7是首次从该植物中分离得到。

RP-HPLC法同时测定雪莲注射液中3种成分的含量

目的建立雪莲注射液中绿原酸、芦丁和紫丁香苷的含量测定方法.方法采用Hypersil BDS C-18色谱柱,以乙腈(流动相A)和50 mmol·L-1 KH2PO4缓冲溶液(含体积分数为0.2%的三乙胺,H3PO4调pH=3.6)(流动相B)进行梯度洗脱,流速为1 mL·min-1,检测波长为260 nm.结果样品中绿原酸、紫丁香苷和芦丁的回收率分别为w=99.6%、99.5%和99.0%,RSD分别为0.76%、0.86%和0.96%,绿原酸、紫丁香苷和芦丁的线性分别为0.018～0.360 g·L-1、0.008～0.150 g·L-1和0.007～0.130 g·L-1.结论该方法可用于雪莲及其注射液的质量控制.

补骨脂中两个黄酮类成分的高效液相色谱测定

目的 :同时测定补骨脂中的两个黄酮类成分。方法 :以实验室制备的补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮为对照品 ,采用反相高效液相色谱法测定含量。TechsphereODS色谱柱 (4.6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ;流动相为甲醇 2 0mmol·L-1醋酸铵缓冲液 (pH 4 .0 ) (6 7∶33) ;检测波长 2 4 0nm。 结果 :补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮浓度为 1.2 5～ 2 0 μg·mL-1,线性关系良好 ;补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮的平均回收率分别为 94 .9%和 96 .2 % ;RSD分别为 3.1%和 3.6 %。结论 :首次建立了同时测定补骨脂中补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮的HPLC分析方法 ,本方法结果准确 ,重现性好 ,适用于补骨脂黄酮类成分的分析测定。

RP-HPLC法同时测定北五味子中五味子甲素与五味子乙素含量

目的 建立同时测定北五味子中五味子甲素与五味子乙素含量的方法。方法 RP-HPLC法。色谱柱为Thermo Hypersil BDS C18柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇-乙腈-水（体积比为45：30：25），流速1．0mL·min^-1，检测波长254nm。结果 以峰面积为纵坐标，以对照品溶液质量浓度（mg·L^-1）为横坐标，进行线性回归：五味子甲素的回归方程为A=2．701×10^7 ρ-1．396×10^4，r=0．9999，表明五味子甲素在10．1-202mg·L^-1线性关系良好；五味子乙素的回归方程为A=2．797×10^7 ρ＋1．570×10^4，r=0．9998，表明五味子乙素在12．2-244mg·L^-1线性关系良好。平均回收率分别为102．0％、100．5％，RSD均小于3．1％。结论 该方法可用于北五味子药材质量控制。