TSPOT.TB、Genechip、AFB及其联合应用在结核病中的诊断价值

目的 结核感染T细胞斑点实验(T cells spot test of tuberculosis infection, TSPOT.TB)与基因芯片(Genechip)是一种新型结核诊断检测方法,自2021年1月唐都医院开始常规应用TSPOT.TB、Genechip,评价诊断、分析联合诊断的可行性。方法 回顾性选取2021年1月至2023年4月我院收治的256例住院患者,行T-SPOT.TB、Genechip、抗酸杆菌涂片镜检(acid-fast bacilli smear microscopy, AFB),根据复合参考标准(compostie reference standard, CRS)考虑活动性结核病例。对三种检验方法进行比较和评价。结果 256例患者同时接受T-SPOT.TB、Genechip法、AFB法检测,其中105例(41.02%)确诊为活动性结核病。>60岁141例(55.08%),<60岁115例(44.92%)。>60岁患者,T-SPOT.TB法、AFB法、Genechip法检测结核的敏感性、特异性、AUC分别为:47.45%、82.93%、0.652;16.94%、98.78%、0.579;74.57%、98.78%、0.867;<60岁患者,分别为:44.65%、85.50%、0.656;10.86%、100.00%、0.554;73.91%、98.55%、0.862。联合检测中,>60岁患者,AFB+Genechip法检验价值最高,敏感性、特异性、AUC为84.74%、97.56%、0.912。<60岁患者,T-SPOT.TB+AFB+Genechip联合诊断价值最高,敏感性、特异性、AUC分别为:100.00%、84.05%、0.920。结论 Genechip检测具有高敏感性与高特异性,在结核病诊断中具有应用价值。TSPOT.TB、AFB、Genechip联合用于结核病的诊断率高,具有临床意义。

血小板计数、癌胚抗原和蛋白基因产物9.5对晚期非小细胞肺癌患者疗效和预后的价值

目的探究血小板计数(PLT)、癌胚抗原(CEA)和蛋白基因产物9.5(PGP9.5)水平对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者疗效和预后的预测价值。方法本研究为回顾性队列研究。采用非随机抽样的方法纳入2016年1月至2022年12月在空军军医大学唐都医院确诊并接受紫杉类+顺铂化疗方案治疗的62例晚期NSCLC患者。采用电话和门诊随访的方式对患者的预后情况进行追踪调查,随访时间至少半年,随访截止日期为2023年6月。评估所有患者化疗后6个月的疗效,根据实体瘤疗效评价标准将所有患者分为进展组(疾病进展,37例)和缓解组(完全缓解+部分缓解+疾病稳定,25例)。收集患者的一般资料(性别、年龄、吸烟史、手术史、临床分期和病理类型),化疗前1周PLT、肿瘤标志物[鳞状细胞癌相关抗原(SCC)、铁蛋白(FRT)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、CEA、肿瘤标志物糖类抗原50(CA50)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖类抗原125(CA125)]水平和肺癌自身抗体(抑癌基因53(P53)、PGP9.5、肿瘤/睾丸抗原G抗原7(GAGE7)、三磷酸腺苷结合RNA解旋酶自身抗体4-5(GBU4-5)、性别决定基因家族2(SOX2)、黑色素瘤抗原A1(MAGEA1)、肿瘤相关基因(CAGE))水平。比较2组患者一般资料,化疗前PLT、肿瘤标志物和肺癌自身抗体的水平。采用受试者操作特征(ROC)曲线分析化疗前PLT、肿瘤标志物和肺癌自身抗体对晚期NSCLC患者疗效的预测效能。采用多因素logistic回归分析确定影响晚期NSCLC患者疗效的独立危险因素。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Log-rank检验比较不同表达水平的各独立危险因素患者的生存状态。结果缓解组中男17例,女8例,年龄62.0(53.0,69.0)岁;进展组中男27例,女10例,年龄63.0(56.0,69.0)岁。2组患者的临床分期比较差异有统计学意义(χ^(2)=1.98,P=0.048);性别、年龄、吸烟史、手术史和病理类型比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。进展组患者化疗前PLT、CEA、CA125、PGP9.5、GBU4-5和CAGE的表达水平均高于缓解组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组患者化疗前FRT、NSE、CYFRA21-1、CA50、SCC、P53、SOX2、GAGE7和MAGEA1水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。ROC曲线分析显示,PLT、CEA、CA125、PGP9.5、GBU4-5和CAGE预测NSCLC患者疗效的曲线下面积分别为0.756(95%CI:0.614~0.874)、0.854(95%CI:0.746~0.947)、0.760(95%CI:0.633~0.887)、0.788(95%CI:0.664~0.912)、0.739(95%CI:0.604~0.875)和0.741(95%CI:0.608~0.875),最佳截断值分别为221.00×10^(9)/L、5.00 U/L、35.00 U/L、3.08 U/ml、9.91 U/ml和0.37 U/ml,预测效能良好。多因素logistic回归分析显示,PLT>221.00×10^(9)/L、CEA>5.00 U/L和PGP9.5>3.08 U/ml是影响晚期NSCLC患者疗效的独立危险因素(OR值分别为1.015、1.191、1.906,均P<0.05)。所有患者总体的中位生存时间为12.22个月(95%CI:9.02~15.43)。PLT高表达(>221.00×10^(9)/L)患者的中位生存时间为22.00个月(95%CI:18.65~25.35),PLT低表达(≤221.00×10^(9)/L)的中位生存时间为27.00个月(95%CI:19.28~34.73),化疗前PLT低表达患者的生存状态优于PLT高表达患者(χ^(2)=9.00,P=0.003)。CEA高表达(>5.00 U/L)患者的中位生存时间为18.80个月(95%CI:13.12~22.89),CEA低表达(≤5.00 U/L)的中位生存时间为27.30个月(95%CI:24.31~29.69),化疗前CEA低表达患者的生存状态优于CEA高表达患者(χ^(2)=7.29,P=0.016)。PGP9.5高表达(>3.08 U/ml)患者的中位生存时间为7.76个月(95%CI:4.76~9.24),PGP9.5低表达(≤3.08 U/ml)的中位生存时间为25.31个月(95%CI:22.81~27.16),化疗前PGP9.5低表达患者的生存状态优于PGP9.5高表达患者(χ^(2)=21.66,P<0.001)。结论PLT、CEA和PGP9.5的表达水平可用于晚期NSCLC患者化疗疗效预测和预后评估。

“丹蛇”组方对小鼠急性肺损伤的治疗作用

目的分析中药组方-丹参酮ⅡA+蛇床子素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的治疗作用。方法选择50只C57小鼠,随机分为对照组(生理盐水)、LPS组、丹参酮ⅡA组、蛇床子素组、丹参酮ⅡA+蛇床子素组,每组10只,气管内滴注LPS建立小鼠急性肺损伤模型,造模24 h后观察小鼠存活率、肺组织形态学变化,检测72 h左肺湿/干重比值(W/D)、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中总细胞计数,采用ELISA法检测总蛋白、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)。结果LPS组小鼠24 h存活率为0,丹参酮ⅡA组、蛇床子素组72 h存活率为50%,丹参酮ⅡA+蛇床子素组72 h存活率约75%,存活率提高;HE染色结果显示,丹参酮ⅡA组、蛇床子素组较LPS组肺部组织病理结构破坏减轻,丹参酮ⅡA+蛇床子素组肺部组织病理结构修复情况较明显;W/D结果显示,丹参酮ⅡA组、蛇床子素组较LPS组肺部水肿无改善、丹参酮ⅡA+蛇床子素组肺部水肿情况减轻(P<0.05)。BALF中总蛋白含量和细胞计数显示,与LPS组相比,丹参酮ⅡA组、蛇床子素组肺部蛋白渗出和炎细胞分泌减轻,丹参酮ⅡA+蛇床子素组明显减轻(P<0.05)。MPO活力结果与BALF中细胞计数结果类似;丹参酮ⅡA组、蛇床子素组较LPS组肺部炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1分泌减少(P<0.05)。丹参酮ⅡA+蛇床子素组肺部炎性因子分泌减少明显(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA+蛇床子素组方能减少对LPS致小鼠肺部炎症因子分泌,减轻炎性细胞浸润、肺泡蛋白渗出、炎细胞漏出和肺部水肿,改善肺部病理组织结构,提高小鼠存活率。丹参酮ⅡA+蛇床子素组方对LPS致小鼠急性肺损伤具有治疗作用。

E3泛素连接酶COP-1在脂多糖致小鼠急性肺损伤中的意义

目的 分析E3泛素连接酶组成型光形态发生蛋白1(constitutive photomorphogenetic protein 1, COP-1)全身敲除后的杂合子小鼠在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)致急性肺损伤(acute lung injury, ALI)中的表现及作用机制。方法 选择48只雄性C57小鼠,随机分为4组:已敲除COP-1:COP-1+/--PBS(KOPBS组)、COP-1+/--LPS(KOLPS组);未敲除COP-1:WT-PBS(WTPBS组)、WT-LPS(WTLPS组),每组12只。KOLPS组、WTLPS组给予LPS 10 mg/kg气管内滴注进行ALI造模,KOPBS组、WTPBS组用同等体积的PBS处理相同时间。造模24 h后,取肺组织,HE染色观察肺组织形态学改变,测定湿/干重比值(W/D),ELISA法测定肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)和肺组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、白介素-6(interleukin-6, IL-6)、肺组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)活力。结果 形态学观察表明KOLPS组肺组织和WTLPS组、KOPBS组肺组织和WTPBS组比较炎性细胞浸润、充血、水肿显著。KOPBS组和WTPBS组,KOLPS组和WTLPS组比较,炎症因子水平以及肺组织中MPO活力和肺W/D比值升高(P<0.05)。结论 敲除小鼠E3泛素连接酶COP-1加重LPS致ALI,探讨COP-1在肺炎中治疗作用,具有临床意义。

丹参酮ⅡA及苦参碱组方对脂多糖致小鼠急性肺损伤的协同保护作用

目的 分析丹参酮ⅡA(tanshinone ⅡA, TⅡA)与苦参碱(matrine, MAT)组合用药对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)致小鼠急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的预防及治疗作用,探讨作用机制。方法 选择60只雄性C57小鼠,随机分为五组:对照组,LPS组,TⅡA+LPS组(TⅡA组),MAT+LPS组(MAT组),TⅡA+MAT+LPS组(TⅡA+MAT组),每组12只。TⅡA组给予TⅡA 10 mg/kg剂量灌胃,MAT组给予MAT 40 mg/kg灌胃,TⅡA+MAT组给予TⅡA 10 mg/kg+MAT 40 mg/kg灌胃,灌胃3 d,对照组及LPS组用同等体积的无菌生理盐水灌胃处理相同时间。末次给药1 h后除对照组外每组给予LPS 5 mg/kg腹腔注射行急性肺损伤造模,对照组注射同等体积的无菌生理盐水。造模6 h后,取肺组织,HE染色观察肺组织形态学改变,测定湿/干重比值(W/D),ELISA法测定肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6),试剂盒法测定肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)活力及肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量。结果 形态学观察表明LPS组肺组织明显充血、水肿,有大量炎性细胞浸润,在TⅡA组、MAT组、TⅡA+MAT组内毒素致肺损伤减轻,TⅡA+MAT组表现明显,肺W/D比值降低(P<0.05)。单独应用TⅡA或MAT时肺泡灌洗液中IL-1、IL-6、TNF-α有不同程度下降(P>0.05),TⅡA+MAT组肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6较LPS相应时相点下降(P<0.05)。BALF中蛋白浓度LPS组较对照组升高,应用TⅡA或MAT后有不同程度下降(P<0.05),TⅡA+MAT组中蛋白浓度较LPS组降低(P<0.01)。肺组织匀浆MPO活力LPS组较对照组升高,单独应用TⅡA或MAT有轻度下降,无统计学意义(P>0.05),TⅡA+MAT组较LPS组MPO活力降低(P<0.05)。结论 丹参酮ⅡA及苦参碱能减轻LPS致小鼠急性肺损伤,两者配合使用效果较单药使用效果佳。