抗人内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体的研制和初步鉴定

运用B淋巴细胞杂交瘤技术 ,以人内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)蛋白为抗原 ,经PEG融合 ,有限稀释法筛选 ,获得了 7株稳定分泌抗人ESM 1的杂交瘤细胞株 ,其中 3A7细胞株特异性尤为显著 ,效价高达 1∶6 0 0 0。所分泌抗体亚型为IgG2b ,Westernblot结果表明对内皮细胞中的ESM 1蛋白及细胞培养上清中的ESM 1均可特异性识别。并观察到ESM 1主要分布在内皮细胞的细胞胞质伴胞核中。在肾组织中 ,ESM 1定位于血管内皮细胞 ,且肾癌标本中ESM 1阳性表达显著高于正常肾组织。免疫组化结果表明所获单抗具有一定的特异性和实用性。

肾癌组织中内皮细胞特异性分子-1 mRNA水平及其蛋白表达的关系

目的 探讨内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)mRNA及其蛋白在肾癌组织中的表达及其意义。方法 采用地高辛标记cDNA探针原位杂交方法、免疫组织化学S P法对 4 0例肾癌、2 9例癌旁正常肾组织中ESM 1mRNA及其蛋白进行检测。结果 ESM 1mRNA及其蛋白在正常肾组织和肾癌中均有表达 ,肾癌间质血管内皮中表达明显。肾癌组织中 ,肿瘤血管内皮的ESM 1mRNA和蛋白的高表达率显著高于正常肾组织血管内皮 ;而在肾小管上皮细胞与肾癌细胞中差异无显著性 ,ESM 1mRNA和蛋白表达具有较好的一致性。结论 ESM 1分子可能参与了肾癌的发生。

内皮细胞特异性分子1在肾癌组织的表达

[目的]探讨内皮细胞特异性分子1(ESM鄄1)在肾癌中的表达及其意义。[方法]应用免疫组织化学S鄄P法检测52例肾癌、32例癌旁正常肾组织中ESM鄄1的表达,并与CD34进行比较。[结果]ESM鄄1在正常肾组织与肾癌中均有表达。主要表达于血管内皮,部分表达在肾小管上皮和肾癌细胞。肾癌血管内皮的ESM鄄1表达率(50%)显著高于正常肾组织的血管内皮(0.06%)(P<0.001);ESM鄄1的表达在正常肾小管上皮细胞与肾癌细胞无显著差异;ESM鄄1在肾颗粒细胞癌中的高表达率为63.16%,明显高于在肾透明细胞癌中的表达(21.21%)(P<0.01),而与肿瘤的组织学分级、淋巴结转移和肿块大小无明显差异。肾癌间质血管ESM鄄1和CD34的表达呈正相关(r=0.452,P<0.001)。[结论]ESM鄄1表达可能与肾癌的血管生成及发生、发展有关,ESM鄄1可作为血管内皮的潜在标志物,并有可能作为肾癌的辅助诊断及预后判断的参考指标。

水稻磷肥合理用量及肥效研究

为进一步完善水稻高产平衡配套技术,优化施肥结构,提高肥料利用率与报酬率,促进水稻无公害发展,特设水稻磷肥参数试验研究.

肾癌组织中内皮细胞特异性分子ESM-1基因的原位检测和意义

目的确定ESM-1mRNA在肾癌中的定位,探讨其表达在肾癌生物学特性中的意义。方法采用地高辛标记的原位杂交技术检测ESM-1mRNA在50例肾癌、30例癌旁正常肾组织中的表达状况,并分析其与临床病理特征的关系。结果ESM-1mRNA主要定位于血管内皮细胞的胞质伴胞核中,在正常肾组织与肾癌中均有表达,部分表达在肾小管上皮和肾癌细胞。肾癌间质血管内皮的ESM-1mRNA高表达率(52.00%)显著高于正常肾组织的血管内皮(13.33%);肾透明细胞癌与颗粒细胞癌中ESM-1mRNA的表达差异有显著性,而与患者的性别、年龄、肿瘤的组织学分级、淋巴结转移和肿块大小无明显相关。结论ESM-1mRNA表达可作为新生血管内皮的标志物,可能与肾癌的血管生成及发生、发展有关。

侨校背景下生命科学类通识教育课程的改革和实践——以暨南大学“基因与生活”课程为例

生命科学教育是高校通识教育的重要领域,暨南大学是拥有境外生最多的高等侨校,其独特的生源结构和专业设置,使学生的教学背景和文化基础存在着很大差异,同时也给通识教育教学带来了难题。本文以"基因与生活"这门通识课程为例,从教学内容、教学方法与手段、考核形式等方面进行改革与实践,探索侨校生命科学通识教育的模式,为加强大学生生命科学的素质教育提供理论和实践依据。

无公害甜荞麦的栽培技术

甜养麦是我市沿江和高沙土地区的特种小杂粮之一,有悠久的种植历史.荞麦生育期短,适应性广,养分全,营养价值高,有预防和治疗糖尿病,增强人体免疫力和预防心血管疾病的作用;抗逆性强,是天然无公害食品.

人内皮细胞特异性分子-1表达载体的构建、体外表达及初步纯化

目的 探讨人内皮细胞特异性分子 1(hESM 1)表达载体的构建、体外表达及表达产物的初步纯化。方法 从人脐静脉内皮细胞中提取总RNA ,用反转录 PCR扩增出hESM 1的cDNA。插入质粒 pET 2 8b中构建成表达载体 ,转化入大肠杆菌BL 2 1,经IPTG诱导表达 ,表达产物用电洗脱的方法初步纯化。结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为含hESM 1的重组质粒 ,经SDS PAGE分析证实获得产物为分子量 2 3 80 8u的融合蛋白 ,表达量约占菌体总蛋白的 2 4%。结论 成功构建了重组hESM 1表达载体 ,并在大肠杆菌中获得表达 ,为进一步研究及临床应用奠定了良好基础。

具有短水力滞留的小型富营养化水库浮游植物群落结构与动态

竹仙洞水库是珠海市对澳门直接供水的水库,也是拱北水厂的重要的水源地。于2006年4月到12月,每2月一次调查了竹仙洞水库水文、水质和浮游植物分布,分析了浮游植物群落季节动态特征。浮游植种类不多,5次采样共检到61种。在丰度上,浮游植物主要以衣藻(Chlamydomonas sp.)、小环藻(Cyclotella meneghiniana)、游丝藻(Planktonema sp.)和隐藻(Cryptomonas sp.)等优势种为主,在生物量上以绿藻和硅藻为优势类群。蓝藻在竹仙洞水库的相对优势并不明显。应用典范对应分析(CCA)对竹仙洞水库浮游植物与环境因子关系分析,环境因子中的pH值、水位、正磷和水力滞留时间对浮游植物的分布影响最大;而透明度和降雨量对其也有一定的影响。从种类分布状况看,衣藻、游丝藻、隐藻对水体中环境因子的敏感性明显高于其它种类,这些种类的相对丰度在低温、低水位和较长水力滞留时间的4月份较高;硅藻门的直链藻(Melosira spp.)、菱形藻(Nitzchia sp.)和裸藻门的梭裸藻(Euglena acus)3种细胞体积较大的种类分布主要受降雨量和透明度的影响,在6月、8月和12月具有较高的相对丰度。与其它热带-亚热带富营养型水库相比,竹仙洞水库的浮游植物群落具有种类相对较少、以绿藻丰度较大的特点;直径在20μm以上的鞭毛绿藻和丝状绿藻以及细胞较小的硅藻门的小环藻是生物量的主要贡献者,短水力滞留时间是浮游植物群落结构与动态变化的关键控制因子。

维生素E对动脉粥样硬化兔动脉肌球蛋白轻链激酶活性及内膜通透性的影响

目的 :探讨维生素 E(Vit E)对动脉粥样硬化兔动脉肌球蛋白轻链激酶 (ML CK)活性及内膜通透性变化的影响。方法 :复制兔动脉粥样硬化模型 ,用γ 32 P掺入法检测动脉 ML CK活性 ,免疫荧光检测内膜通透性 ,同时用苏木精伊红 (HE)染色观察动脉壁的形态结构。结果 :在喂饲胆固醇膳食 4周的动物组 ,动脉 ML CK活性与正常对照组比较显著升高 (P<0 .0 5 ) ;但在喂饲胆固醇膳食 12周或同时添加 Vit E后 ,动脉 ML CK活性与正常对照组比较升高不明显 (P>0 .0 5 )。荧光显微镜下观察显示 ,兔动脉内膜通透性在喂饲胆固醇膳食后 4周有所增加 ,12周后显著增加 ;12周组膳食中同时加 Vit E后 ,通透性有所下降。结论 :在动脉粥样硬化早期 ,内膜屏障完整性的改变可能与 ML CK活性增强有关 ,Vit E可能是降低动脉内膜 ML CK活性的因素 ,并能降低动脉粥样硬化模型兔动脉内膜通透性。

IgA类鼠抗人A血型单抗的研制和临床应用

应用Ｂ淋巴细胞杂交瘤技术，以Ａ血型物质ＭＳＳ１０％２×（Ａ１）为抗原，经ＰＥＧ细胞融合，获得两株分泌ＩｇＡ类鼠抗人Ａ血型单抗杂交瘤细胞，细胞培养上清液效价为１０２４～２０４８，亲和力２～３ｓ。其中２Ｈ１０Ｅ１１杂交瘤细胞经血凝特异性试验、血凝抑制试验、吸收放散试验、红细胞标准谱细胞试验，表明２Ｈ１０Ｅ１１单抗仅对Ａ血型红细胞特异。２Ｈ１０Ｅ１１细胞置液氮中贮存３年，复苏传代后分泌抗体能力不变。单抗置５６℃水浴３０ｍｉｎ，－２０℃和３７℃反复冻融３次，效价不变。临床试用近百万人次，无一例错型，准确率１００％。证明可以替代标准血清，用于临床血型定型。

人骨桥蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

目的 构建人骨桥蛋白 (hOPN)表达载体 ,体外表达及表达产物的纯化。方法 培养人脐静脉内皮细胞 ,提取总RNA ,反转录合成cDNA第一链 ,以此cDNA为模板经PCR合成插入片段 ,连接至载体 pGEX 6P 1,转化到XL1 blue中进行诱导表达。表达产物经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳后 ,切下目的蛋白进行洗脱纯化。结果 构建的表达载体经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA测序 ,证明所构建的质粒是 pGEX 6P OPN。SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳发现该重组质粒经IPTG诱导后表达一种新的蛋白 (表达量为 16 7% ) ,这种蛋白不存在于诱导后的pGEX 6P 1表达产物中 ,纯化后蛋白纯度为 99%。结论 成功构建了hOPN表达载体 ,并进行体外表达。