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GFP-mut2植物表达载体的构建及在甜菊愈伤组织中的表达 被引量:2
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作者 熊玲媛 陈亮 +2 位作者 沈明山 黄胤怡 陈睦传 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期546-550,共5页
构建了GFP mut2的植物表达载体 ,在农杆菌的介导下使GFP mut2基因整合到甜菊核基因组中并得到了表达 ,从而建立了以绿色荧光蛋白基因为报告基因的根癌农杆菌介导的甜菊转基因系统 .
关键词 GFP-mut2 植物表达载体 甜菊 愈伤组织 绿色荧光蛋白基因 遗传转化 基因表达 载体构建 转基因系统
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红树植物拟海桑钙调蛋白基因的克隆及分析 被引量:1
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作者 熊玲媛 林涛 +4 位作者 周涵韬 徐金森 葛运生 陈睦传 陈亮 《台湾海峡》 CAS CSCD 2002年第2期193-198,T002,共7页
钙调蛋白 (Calmodulin)是生物细胞内一种重要的调控蛋白 ,通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长和发育 .作者以高抗盐红树植物海桑属拟海桑 (Sonnera tiaparacaseolaris)总DNA为模板 ,参考GenBank上植物钙调蛋白基因序列合成 5′端... 钙调蛋白 (Calmodulin)是生物细胞内一种重要的调控蛋白 ,通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长和发育 .作者以高抗盐红树植物海桑属拟海桑 (Sonnera tiaparacaseolaris)总DNA为模板 ,参考GenBank上植物钙调蛋白基因序列合成 5′端和 3′端引物 ,利用多聚酶链式反应 (PCR)扩增了拟海桑钙调蛋白基因 ,与克隆载体pBsk(+)重组 ,转化EscherichiacoliDH5α得到重组克隆子 ,DNA序列分析表明 ,所得片段的编码区在核苷酸序列上与迄今已知的几种植物钙调蛋白基因有很高的同源性 ,同源率在 85%以上 ;与水稻、苹果、衣藻等相似 ,其基因编码区被一个位于第 75位核苷酸之后的内含子所中断 . 展开更多
关键词 红树植物 克隆 拟海桑 钙调蛋白基因 聚合酶链式反应 DNA PCR
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甜菊钙调蛋白基因的克隆及结构分析 被引量:1
3
作者 熊玲媛 徐金森 陈睦传 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期476-480,共5页
钙调蛋白 (Calmodulin)是生物细胞内一种重要的调控蛋白 ,通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长发育及细胞对外界环境变化的反应 .我们从甜菊顶芽和花芽中提取总RNA ,逆转录合成cDNA第一链 ,以此为模板 ,参考GenBank上已发表植物... 钙调蛋白 (Calmodulin)是生物细胞内一种重要的调控蛋白 ,通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长发育及细胞对外界环境变化的反应 .我们从甜菊顶芽和花芽中提取总RNA ,逆转录合成cDNA第一链 ,以此为模板 ,参考GenBank上已发表植物的钙调蛋白基因序列合成 5’端和 3’端引物 ,利用多聚酶链式反应 (PCR)扩增并克隆得到了甜菊钙调蛋白基因的两个异型基因 .序列分析表明 ,它们均由 4 5 0个核苷酸组成 ,编码 14 8个氨基酸 .在核苷酸序列上与迄今已知的多种植物钙调蛋白基因均有很高的同源性 ,同源率在 83%以上 ,编码的氨基酸序列同源性更高 ,同源率高达 95 %以上 .这两个基因之间存在差异 ,其核苷酸序列同源率为 85 % ,编码区的氨基酸序列的同源率为 99% ,仅在第 12 展开更多
关键词 结构分析 甜菊 钙调蛋白基因 CDNA克隆 聚合酶链式反应 基因克隆 氨基酸序列
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盐胁迫对甜菊细胞内游离Ca^(2+)浓度的影响(简报) 被引量:1
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作者 熊玲媛 徐金森 +1 位作者 洪付祥 陈睦传 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期151-154,共4页
钙离子不仅是植物生长发育所需的一种大量元素,而且起了偶联细胞外刺激与胞内反应第二信使的作用,是多种受体激动后信息传递过程的中心环节。近年的研究表明:高温、干旱、触摸、低渗、低温、风、机械刺激、病原菌感染等多种环境胁迫均... 钙离子不仅是植物生长发育所需的一种大量元素,而且起了偶联细胞外刺激与胞内反应第二信使的作用,是多种受体激动后信息传递过程的中心环节。近年的研究表明:高温、干旱、触摸、低渗、低温、风、机械刺激、病原菌感染等多种环境胁迫均能引起胞质Ca^(2+)水平的改变。这种变化被认为是植物细胞感受环境胁迫的原初反应之一,它通过启动基因表达和胞内一系列生理生化过程调节细胞对环境改变的适应反应。胞质Ca^(2+)水平的改变有两种来源:胞外Ca^(2+)跨膜内流和胞内钙库如内质网中的Ca^(2+)释放。 展开更多
关键词 盐胁迫 甜菊 细胞内游离Ca^2+浓度 胞质Ca^2+ LSCM 肌醇磷脂调节系统
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鹤望兰基因组DNA的提取方法 被引量:22
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作者 洪付祥 徐金森 +3 位作者 熊玲媛 蔡邦平 王振忠 陈睦传 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2002年第4期366-370,共5页
由于鹤望兰组织内含有大量多糖类及多酚类物质 ,严重干扰DNA的抽提 ,利用常规的SDS法、CTAB法和高盐低pH值法都难以抽提出高质量的鹤望兰基因组DNA .本文报道了在进行若干预处理之后 ,再用常规的SDS、CTAB、SDS裂解的高盐低pH值法和CTA... 由于鹤望兰组织内含有大量多糖类及多酚类物质 ,严重干扰DNA的抽提 ,利用常规的SDS法、CTAB法和高盐低pH值法都难以抽提出高质量的鹤望兰基因组DNA .本文报道了在进行若干预处理之后 ,再用常规的SDS、CTAB、SDS裂解的高盐低pH值法和CTAB裂解的高盐低pH值法提取基因组DNA的改进方法 .根据外观、琼脂糖凝胶电泳检测、D2 60nm/D2 80nm比值的测定、限制性酶切反应、PCR扩增的结果表明 ,用改进方法提取的基因组DNA无论在纯度上还是在完整性上都比常规方法要好 .其中改进SDS裂解的高盐低pH值法是提取鹤望兰基因组DNA的最好方法 .图 3表2参 展开更多
关键词 鹤望兰 基因组DNA 提取方法 改进方法 限制性内切酶酶切
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查尔酮合酶基因的克隆及双元载体的构建 被引量:1
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作者 黄胤怡 沈明山 +2 位作者 陈亮 熊玲媛 陈睦传 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期541-545,共5页
以中国水仙为材料 ,利用RT PCR方法克隆查尔酮合酶基因 (CHS)的cDNA ,核酸序列分析表明 ,该基因的编码区长 116 7bp ,编码 389个氨基酸 .通过进一步的中间克隆 ,将CHS连上CaMV35s启动子和Tnos终止子 .进一步将重组片段插入植物表达载体 ... 以中国水仙为材料 ,利用RT PCR方法克隆查尔酮合酶基因 (CHS)的cDNA ,核酸序列分析表明 ,该基因的编码区长 116 7bp ,编码 389个氨基酸 .通过进一步的中间克隆 ,将CHS连上CaMV35s启动子和Tnos终止子 .进一步将重组片段插入植物表达载体 pCAMBIA130 1,PCR及测序结果都证明植物双元表达载体p130 1BΩC构建获得成功 . 展开更多
关键词 查尔酮合酶基因 植物表达载体 载体构建 基因克隆 花色形成 类黄酮
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无瓣海桑Sonnerati aapertala钙调蛋白基因的克隆及序列分析
7
作者 陈亮 杨大林 +3 位作者 熊玲媛 邵寒娟 林涛 王鸣刚 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期796-799,共4页
用高等植物钙调蛋白的保守序列设计两端引物 ,以红树植物海桑属无瓣海桑Sonneratiaapertala总DNA为模板 ,扩增出无瓣海桑钙调蛋白基因 ,并以之构建重组质粒pT ACaM .经测序分析比对 ,发现无瓣海桑钙调蛋白基因全长 1418bp ,其中第 1外显... 用高等植物钙调蛋白的保守序列设计两端引物 ,以红树植物海桑属无瓣海桑Sonneratiaapertala总DNA为模板 ,扩增出无瓣海桑钙调蛋白基因 ,并以之构建重组质粒pT ACaM .经测序分析比对 ,发现无瓣海桑钙调蛋白基因全长 1418bp ,其中第 1外显子 76bp ,第 2外显子 371bp ,中间为一 946bp的内含子所隔开 .编码 148氨基酸的蛋白质 ,其编码区序列与已知的其他高等植物的钙调蛋白基因核苷酸序列同源性高达 85 %以上 .而蛋白质序列同源性达95 展开更多
关键词 SONNERATIA apertala 序列分析 钙调蛋白基因 无瓣海桑 同源性 基因克隆 红树植物
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神经生长因子研究与药物开发进展 被引量:2
8
作者 熊玲媛 赵萍 +1 位作者 黄平 林瑜斌 《生物产业技术》 2018年第5期32-38,共7页
神经生长因子(NGF)是最早被发现的神经营养因子,广泛分布于中枢神经系统和周围神经系统中,不仅在神经系统中具有重要功能,同时,在非神经系统中也发挥至关重要的作用。目前,NGF相关产品的临床应用已经受到研究者和临床医师的广泛关注。... 神经生长因子(NGF)是最早被发现的神经营养因子,广泛分布于中枢神经系统和周围神经系统中,不仅在神经系统中具有重要功能,同时,在非神经系统中也发挥至关重要的作用。目前,NGF相关产品的临床应用已经受到研究者和临床医师的广泛关注。为了全面深入认识NGF,更好地指导临床应用,就NGF研究和药物开发进展作简要综述。 展开更多
关键词 神经生长因子 神经修复 创伤修复 骨折愈合 免疫调节
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Cloning and Structural Analysis of Calmodulin Gene from the Mangrove Plant Sonneratia Paracaseolaris
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作者 熊玲媛 林涛 +4 位作者 周涵韬 徐金森 葛运生 陈睦传 陈亮 《Marine Science Bulletin》 CAS 2002年第2期83-89,共7页
Calmodulin is a calcium binding protein that modulates the activity of diverse groups of protein including some protein kinase, adenylate cyclases and ATPase. Here we use the total DNA of Sonneratia paracaseolaris as ... Calmodulin is a calcium binding protein that modulates the activity of diverse groups of protein including some protein kinase, adenylate cyclases and ATPase. Here we use the total DNA of Sonneratia paracaseolaris as the template of the polymerase chain reaction (PCR). The PCR primers have been designed and synthesized according to the 5-and 3-terminal oligonucleotide sequences of Calmodulin gene of plants in Genbank and ligated with cloning vector pBsk(+).The recombinant clones have been obtained from the selected medium. The results of DNA sequences analysis show that the nucleotide sequences of ORF share more than 85% homologies as compared with those of calmodulin genes of several other plants.Similar to rice and apple, the ORF is interrupted by an intron behind the 75th nucleotide. 展开更多
关键词 Sonneratiaparacaseolaris CALMODULIN gene POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)
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