NF-κB及其调控的miRNA在宫颈癌移植瘤及癌旁组织中的活化和表达

目的分析宫颈癌移植瘤小鼠的癌与癌旁组织中miR-15b和miR-16的表达状况以及NF-κB信号通路在宫颈癌癌旁组织活化情况,为宫颈癌的诊断和治疗提供新思路。方法建立小鼠宫颈癌移植瘤模型,取癌组织与癌旁组织,以及正常的脂肪组织,用实时荧光定量PCR方法检测miR-15b和miR-16的表达,用免疫组化检测NF-κB(P65)蛋白的表达及定位。结果移植瘤造模成功。miR-15b在宫颈癌组织中表达为32.21±3.67,明显高于癌旁组织的25.16±1.86和正常组织的1.00±0.12(P<0.05),癌旁组织也显著高于正常组织(P<0.05);miR-16在宫颈癌组织中表达为28.63±2.34,明显高于癌旁组织的22.16±1.76和正常组织的1.00±0.12(P<0.05),癌旁组织也显著高于正常组织(P<0.05)。在正常脂肪组织中,NF-κB(P65)蛋白主要定位于胞质,而在癌组织与癌旁组织中,NF-κB(P65)蛋白主要位于胞核。结论 NF-κB通路及其相关的miR-15b和miR-16可能参与了宫颈癌发生的早期分子事件。

结直肠癌程序性死亡分子配体-1表达的临床病理意义

目的探讨程序性死亡分子配体-1(PD-L1)在结直肠癌中表达的特征、临床意义和预后价值。方法应用免疫组化Envision二步法检测250例结直肠癌组织芯片中PD-L1的表达情况,同时对拥有完整资料的250例结直肠癌患者进行随访。结果 PD-L1阳性表达率为44%(110/250),在有淋巴结转移和有肝转移病例中,PD-L1阳性表达率明显高于无淋巴结转移病例(52. 2%vs 39. 2%)和无肝转移病例(55. 0%vs 41. 9%),差异有统计学意义(P <0. 05)。生存分析显示PD-L1阳性表达患者的生存时间显著低于PD-L1阴性者,差异有统计学意义(P <0. 05)。在单因素生存分析中,PD-L1是预后的不利因素,此外还发现肿瘤分化程度、淋巴结转移与生存相关;在多因素生存分析中,发现PD-L1与不良预后相关,此外还发现淋巴结转移与结直肠癌的预后相关,是延长生存期的不利因素。结论 PD-L1在结直肠癌组织中高表达。PD-L1阳性病例更易发生淋巴结转移、肝转移。PD-L1的表达差异与总体生存期相关,PD-L1阳性表达患者的生存期显著低于PD-L1阴性者,PD-L1可作为独立的判断结直肠癌预后的指标。

少见部位间叶性软骨肉瘤5例临床病理分析

目的分析间叶性软骨肉瘤(MC)的临床病理学和免疫组化特点,探讨其诊断、鉴别诊断依据和预后。方法采用HE及免疫组化En Vision两步法对5例MC进行观察,并随访。结果 5例中,女性3例,男性2例。1例原发于骨(左上颌骨),3例原发于软组织,部位分别位于盆腔后腹膜、大阴唇和右大腿;1例原发于脑组织(左颅底近舌下神经管区)。临床表现主要为疼痛、肿胀和局部肿块。主要影像学特点为溶骨性破坏或软组织肿块伴肿瘤内钙化和肿瘤边缘硬化。镜下肿瘤由未分化的小圆细胞和肿瘤性透明软骨小岛组成。软骨区的分化程度不等,可以是分化良好的软骨岛,也可以是不成熟的低级别软骨肉瘤。免疫组化:未分化小细胞CD99、Syn、CgA、NSE、vimentin和bcl-2(+);软骨区S-100(+);40%~70%的肿瘤细胞核Ki-67、p53(+)。结论 MC是一种罕见的高度恶性肿瘤,其组织学特点是小细胞原始间叶组织向幼稚软骨组织分化,其诊断要点是在未分化的小细胞区找到分化较成熟的软骨组织。活检小标本容易误诊,须结合组织学特征、影像学表现及免疫组化与其他肿瘤相鉴别。

PD-L1调节结直肠癌细胞生物学行为的作用研究

目的探讨PD-L1基因沉默对结直肠癌细胞生物学功能的影响。方法构建慢病毒转染系统下调PD-L1在直肠癌细胞系中的表达,然后进行流式、侵袭实验、划线实验和细胞毒实验。结果沉默PD-L1基因后,结直肠癌细胞凋亡率显著增加,细胞的增殖、侵袭和迁移能力在不同程度上受到抑制。结论 PD-L1表达下调可以在体外促进结直肠癌细胞的凋亡,抑制细胞的增殖、侵袭和迁移能力,可以有效抑制癌细胞的恶性生物学行为。

低度恶性子宫内膜间质肉瘤临床病理分析

目的探讨低度恶性子宫内膜间质肉瘤(LESS)的临床病理学特征、诊断和鉴别诊断。方法分析16例LESS的临床病理特点,通过网状纤维染色、免疫组化染色研究其病理学特征。结果患者年龄26～68岁,平均42.5岁。LESS临床上主要表现为不规则的阴道流血。肿瘤组织成舌状浸润肌层,肿瘤细胞类似增殖期子宫内膜间质细胞。肿瘤内内有大量的似螺旋小动脉血管。网状纤维染色见网状纤维丰富,围绕瘤细胞生长。肿瘤细胞15例CD10阳性,14例ER阳性,15例PR阳性,5例actin阳性,CD34、CD117、Melan-A肿瘤细胞均阴性。结论LESS易误诊,确诊主要依靠组织病理学和免疫组织化学;病理形态上看似良好的低度恶性子宫内膜间质肉瘤,预后不一定好。

c-Met作为肿瘤治疗靶点的特征及其抑制剂的应用前景

受体型酪氨酸激酶(RTK)靶向药物如西妥西单抗、依马替尼、贝伐单抗和吉非替尼等已经用于某些肿瘤的靶向治疗。c-Met是RTK家族中一独特成员,同样是肿瘤靶向治疗的潜在靶点。c-Met基因编码的糖蛋白属于酪氨酸激酶生长因子受体家族,其配体为间质起源的细胞产生的肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF),也称为离散因子(scatter factor),形成c-Met/HGF信号系统。其与配体的结合可使c-Met受体的酪氨酸磷酸化,促使细胞有丝分裂、细胞变形和向腺上皮细胞分化。因此。

免疫组化染色中某些抗体最佳修复方式探讨

目的以存档蜡块,选择最佳抗原修复液,而进行抗原修复,使抗原决定簇暴露,达到最理想染色结果。方法用柠檬酸缓冲液(pH6.0)、EDTA缓冲液(pH9.0),及高压加热法,胰蛋白酶消化对CD68、lysozyme、α-AT和S-100不同的抗体进行修复。消化,观查抗原决定簇暴露。结果3种抗原修复法的免疫组化切片,胰蛋白酶修复法阳性率显著高于高压加热法与微波加热法且染色背景清晰,高压加热法与微波加热法非特异性着色较深,阳性率低。结论对不同的抗体选用不同的修复方法可以达到最佳效果。

儿童颅内间叶性软骨肉瘤2例临床病理观察

目的探讨儿童颅内中枢神经系统间叶性软骨肉瘤(MC)的临床病理特征、免疫表型及鉴别诊断。方法对2例罕见的儿童颅内中枢神经系统MC的临床表现、影像学、组织学形态和免疫表型进行分析,并复习相关文献。结果 2名MC患儿均为9岁,男、女各1例,男性患儿病变位于颅底(左舌下神经管区),女性患儿病变位于左侧桥小脑角。影像学改变均提示"神经源性肿瘤"。镜下示肿瘤由未分化的小圆细胞和肿瘤性透明软骨小岛两种成分混杂组成。免疫组化:未分化小细胞SOX9、CD99、Syn、Cg A、NSE、D2-40、vimentin、Bcl-2及CD56呈(+);软骨区S-100及SOX9灶状(+)。结论原发于儿童颅内中枢神经系统的MC极为罕见,是一种高度恶性肿瘤,其组织学特点是小细胞原始间叶组织向幼稚软骨组织的分化。确诊需依靠病理检查。鉴别诊断包括去分化软骨肉瘤、化生型脑膜瘤、脑膜血管周细胞肿瘤、原始神经外胚叶肿瘤等。

P21活化激酶1在结直肠癌中的表达及临床病理意义

目的探讨P21活化激酶1(PAK1)在结直肠癌组织中的表达,分析其与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测250例结直肠癌组织中PAK1的表达状态,并对患者进行随访,获得随访资料。结果PAK1阳性率为48%(120/250),在有淋巴结转移和肝转移的病例中,PAK1阳性率明显高于无淋巴结转移病例(57.6%vs42.4%)和无肝转移病例(60.0%vs44.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。单因素生存分析显示PAK1阳性患者的生存时间较PAK1阴性者显著缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。在单因素生存分析中,PAK1与不良预后有关。此外,结果还显示肿瘤浸润深度、淋巴结转移和肝转移与生存期相关;多因素生存分析同样显示PAK1是预后的不利因素。并且,肿瘤浸润深度、淋巴结转移、肝转移与患者的预后相关,是延长生存期的不良因素。结论在结直肠癌中,PAK1存在过度表达状态。PAK1阳性病例更易发生淋巴结转移和肝转移。PAK1的表达差异与总体生存期相关,PAK1阳性患者的生存期较PAK1阴性者显著降低,PAK1可作为独立的判断结直肠癌患者的预后指标。

库肯勃瘤组织女性激素受体测定的临床意义

应用免疫组化酶联亲和一步法标记来源于胃、肠的库肯勃瘤组织中的雌激素受体（ＥＲ）和孕激素受体（ＰＲ）。结果显示胃源性库肯勃瘤ＥＲ阳性率（６０％）明显高于大肠源性库肯勃瘤（２３．５％），统计学上有显著意义（Ｐ＜０．０１）。表明胃癌比大肠癌更易转移到卵巢，且胃源性库肯勃瘤生存期较大肠源性库肯勃瘤要短。

胃肠道粘膜相关淋巴组织型边缘区B细胞淋巴瘤病理观察

目的 探讨胃肠道粘膜相关淋巴组织型边缘区B细胞淋巴瘤 (MALT MZL)的临床病理特点。方法 分析30例MALT MZL的临床资料 ,HE光镜特点 ,应用免疫组化S P法标记CD2 0、CD45RO、CD3、CD5、CD10、CD2 3、bcl 2以及bcl 10。结果 患者以中老年居多 ,平均 5 1.2岁。临床症状以腹部胀痛为主 (占 88.9%) ,病变粘膜呈脑回状或结节状 (5 0 %)、溃疡 (43.3%) ,活检弹性差 (93.3%)。组织学特点 :瘤细胞为边缘区B细胞、单核样B细胞 ,多少不等的小淋巴细胞、浆细胞及转化的大细胞 ;淋巴上皮病变 19例 ;滤泡克隆化 14例。 2 2例免疫组化中 ,瘤细胞均表达CD2 0 ,10例bcl 2 +,均不表达CD45RO、CD3、CD5、CD10、CD2 3。 16例bcl 10中 ,5例胞核阳性 ,11例阴性病例中 9例出现胞质着色。 12例获得随访资料 ,1例死于化疗后 4年 ,11例均健在。结论 胃肠道MALT MZL为低度恶性淋巴瘤 ,具有一定临床特征 ,病理以HE形态学为要点 ,结合免疫组化有助于正确诊断和鉴别诊断。

黄连温胆汤调控SCFAs-GPR41/43-GLP1信号通路干预2型糖尿病模型大鼠的作用机制

目的:基于SCFAs-GPR41/43-GLP1信号通路研究黄连温胆汤对2型糖尿病模型大鼠的干预机制。方法:选择SPF级SD雄性大鼠80只,先随机分10只为正常对照组,其余大鼠以高糖高脂乳剂10 mL/kg灌胃,监测血糖1次/w, 8 w后,腹腔注射STZ 35 mg/kg诱导2型糖尿病模型,5 d后选取空腹血糖值大于11.10 mmol/L造模成功的大鼠随机分为模型对照组、二甲双胍0.25 g/kg组和黄连温胆汤3、6、12 g/kg组。各组灌胃给予相应的药物或生理盐水,1次/d,连续给药4 w后,取材检测。生化试剂检测大鼠葡萄糖耐量(OGTT)、血脂全套指标;气相色谱法测定大鼠结肠内容物短链脂肪酸(SCFAs)含量;ELISA法检测大鼠结肠组织GLP1、PYY的含量;RT-qPCR法检测大鼠结肠组织G蛋白偶联受体41(Gpr41)、Gpr43、胰高血糖素样肽-1(Glp1)、肽YY(Pyy) mRNA的表达;Western blot法检测大鼠结肠组织GPR41、GLP1、PYY蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠OGTT试验中血糖含量明显升高,血脂中TC、TG、LDL-C、HbA1c含量显著升高,HDL-C含量显著下降(P<0.01);结肠内容物SCFAs中乙酸、丙酸、正丁酸的含量均显著下降(P<0.01);结肠组织GLP1、PYY含量显著降低,Gpr41、Gpr43、Glp1、Pyy mRNA和GPR41、GLP1、PYY蛋白表达显著下调(P<0.01);与模型对照组比较,黄连温胆汤3、6、12 g/kg组和二甲双胍0.25 g/kg组大鼠OGTT血糖含量明显降低,血脂中TC、TG、LDL-C、HbA1c含量明显降低,HDL-C含量明显升高(P<0.05或P<0.01);结肠内容物乙酸、丙酸、正丁酸的含量明显升高(P<0.05或P<0.01);结肠组织GLP1、PYY含量明显升高,Gpr41、Gpr43、Glp1、Pyy mRNA和GPR41、GLP1、PYY蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论:黄连温胆汤抗2型糖尿病作用机制可能与增加SCFAs,调控SCFAs-GPR41/43-GLP1信号通路,促进GLP1、PYY的分泌,降低体内血糖、血脂,改善机体胰岛素抵抗相关。

37例库肯勃瘤分析及女性激素受体研究

应用免疫组织化学酶联亲和一步法标记库肯勃瘤组织中的雌激素受体（ＥＲ）和孕激素受体（ＰＲ）。结果表明：胃源性库肯勃瘤ＥＲ阳性率（６０％）明显高于大肠源性库肯勃瘤（２３．５％），统计学上有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。胃癌比大肠癌更易转移到卵巢，胃源性库肯勃瘤生存期较大肠源性生存期要短。提出对双侧卵巢肿瘤患者应仔细对胃肠道等其它部位进行检查，以达到术前确诊，且对ＥＲ、ＰＲ阳性患者给予内分泌治疗，以求改善预后。

清燥救肺汤对乌拉坦诱导肺癌模型鼠TGF-β1、Smad2和p38 MAPK的影响

目的:研究清燥救肺汤对乌拉坦诱导肺癌模型鼠TGF-β1、Smad2和p38 MAPK的影响。方法:选择清洁级KM小鼠,随机分为6组,即正常组、模型组、六味地黄丸4.6g/kg组、清燥救肺汤33.6g/kg、16.8g/kg、8.4g/kg组。除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射乌拉坦800mg/kg,每周两次,连续五周,复制小鼠肺癌模型。给药与造模同时进行,1次/d,连续15周。清燥救肺汤33.6g/kg、16.8g/kg、8.4g/kg组、六味地黄丸4.6g/kg组分别给予等体积药物,正常组与模型组灌胃生理盐水。15周后,取肺脏检测。肉眼及镜下计数双肺小鼠肺肿瘤结节数,并计算小鼠肺肿瘤发生率;Western Blot测定肺组织TGF-β1、Smad2和p38 MAPK蛋白的表达;免疫组化检测肺组织TGF-β1、Smad2和p38 MAPK活性的表达。结果:清燥救肺汤(8.4、16.8、33.6g/kg)均能使肺肿瘤发生率从91.7%降至58.3~75.0%,平均肿瘤结节数从5降至3,明显降低肺癌模型鼠肺组织TGF-β1、Smad2和p38 MAPK蛋白的表达,并可使肺组织中TGF-β1、Smad2和p38 MAPK活性的表达也显著下降。结论:清燥救肺汤可能通过抑制TGF-β1、Smad2和p38 MAPK的过度表达,从而多靶点调控TGF-β1/Smad2及p38 MAPK等信号通路来实现延缓肺癌的发生发展及转移。

K-ras基因状态及ras蛋白表达在胃印戒细胞癌免疫表型分类中的意义

目的探讨K-ras基因状态及ras蛋白表达在胃印戒细胞癌免疫表型分类中的意义。方法应用组织芯片免疫组织化学技术检测180例胃印戒细胞癌组织中ras蛋白的表达;PCR扩增和DNA直接测序法检测癌组织中K-ras基因12、13密码子的突变情况。结果 ras蛋白阳性50例(27.8%),ras蛋白阳性表达率在肠型印戒细胞癌中显著高于胃型和混合型印戒细胞癌(P<0.05)。在淋巴结转移阳性组织中,ras蛋白阳性表达率明显高于无淋巴结转移组织(P<0.05);随着肿瘤侵袭、演进及临床分期的升高,ras蛋白阳性表达率明显增高(P<0.05)。K-ras基因突变型22例(12.2%)。所有突变位点均位于12密码子,突变类型包括:GGT→AGT 1例,GGT→TGT 1例,GGT→GCT 2例,GGT→GTT 8例,GGT→GAT 10例。13密码子未发现突变。肠型印戒细胞癌K-ras基因突变率显著高于胃型和混合型印戒细胞癌(P<0.05)。K-ras基因突变型病例ras蛋白阳性表达率明显高于K-ras基因野生型病例(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示,ras蛋白表达与K-ras基因突变呈正相关(r=0.61,P<0.05)。结论 ras蛋白的过表达可能与胃印戒细胞癌侵袭潜能、淋巴结转移相关,ras蛋白表达和K-ras基因突变与肿瘤的免疫表型变化存在相关性,它们在癌细胞表型转化过程中可能起到一定作用。

二冬膏对急性肺损伤模型鼠TNF-α,IL-6含量及AQP-5蛋白表达的影响

目的:研究二冬膏对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)模型鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6)含量及水通道蛋白5(AQP-5)表达的影响。方法:将72只清洁级SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、二冬膏高、中、低剂量组、地塞米松组,每组12只。除正常组外,其余各组采用一次性尾静脉注射LPS 6 mg·kg-1复制ALI大鼠模型。首次给药在造模后0.5 h,1次/d,连续4 d。二冬膏高、中、低剂量组分别ig二冬膏10,5,2.5 g·kg-1;正常组与模型组ig生理盐水10 m L·kg-1,地塞米松组ip地塞米松0.01 g·kg-1。4 d后处死大鼠,取血清和肺组织检测。采用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ABC-ELISA)法检测大鼠血清TNF-α,IL-6的含量,Western bloting测定大鼠肺组织AQP-5蛋白的表达,苏木素和伊红(HE)染色观察肺组织病理形态。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α,IL-6含量明显升高(P<0.01),肺组织AQP-5蛋白表达水平显著降低(P<0.01)且肺部病理炎症增加。与模型组比较,二冬膏各组均能明显降低TNF-α,IL-6含量(P<0.05,P<0.01),显著升高肺组织AQP-5蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)并且减轻肺部病理炎症。结论:二冬膏通过降低ALI模型鼠促炎因子TNF-α,IL-6含量,升高肺组织AQP-5蛋白的表达,改善肺部病理炎症,减轻肺水肿状态,从而有效防治急性肺损伤。

温胆汤对精神分裂症模型鼠血清TNF-α,IL-6及海马组织Glu活性表达的影响

目的:研究温胆汤对精神分裂症模型鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)及海马组织谷氨酸(Glu)活性表达的影响。方法:将72只清洁级SD大鼠随机分为6组:正常组(A)、模型组(B)、温胆汤高剂量组(C)、温胆汤中剂量组(D)、温胆汤低剂量组(E)、氯氮平组(F),每组12只。在造模前,C,D,E组分别ig温胆汤生药40,20,10 g·kg-1;F组ig氯氮平20 mg·kg-1;A,B组用等量生理盐水ig,1次/d,共21 d。在最后1次给药2 h后,B,C,D,E,F组一次性ip MK8010.6 mg·kg-1,建立精神分裂症模型,并进行刻板行为学观察;3 d后处死大鼠,取血清和海马组织检测。HE染色光镜下观察海马组织CA1区的病理改变,采用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ABC-ELISA)法检测血清中TNF-α,IL-6的含量,免疫组化检测海马组织中Glu活性的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠出现刻板行为;血清TNF-α,IL-6含量明显升高(P<0.05或P<0.01);海马组织Glu蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,温胆汤各剂量组均不同程度改善了模型鼠的刻板行为和海马CA1区的病理改变,并可明显降低血清TNF-α,IL-6的含量(P<0.05或P<0.01),使海马组织Glu活性的表达也显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:温胆汤通过调节免疫功能、减少炎症因子产生和提高Glu活性的表达来减轻精神分裂症模型鼠海马组织的病理损害。