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题名自诱导系统在酶促合成2’-脱氧胞苷中的应用
被引量:6
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作者
王玺
段胜林
熊舒莉
郑桂兰
张贵友
王洪钟
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机构
清华大学生命科学学院
中国食品发酵工业研究院
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期225-232,共8页
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基金
国家自然科学基金项目(21176138)
国家自然科学基金国家基础科学人才培养基金项目(J1103506
+1 种基金
J1030622
J1310020)
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文摘
旨在高效合成2’-脱氧胞苷(d Cyd)。DCyd作为一类重要的药物中间体,能够用于合成吉西他滨(d Fd C)、扎西他滨(dd C)等多种抗病毒或抗肿瘤的药物。采用ZYM-Fe-5052自诱导培养基对含有N-脱氧核糖转移酶II(NDT)的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导,所得完整菌体直接用于催化合成d Cyd。结果表明,自诱导系统不仅无需额外添加诱导剂,还能够达到较高的菌体密度,且与LB诱导系统所得菌体在合成d Cyd方面具有同样高效的催化活性。2’-脱氧胸苷(d Thd)和胞嘧啶的浓度比为1∶3时,产物转化率可高达86.5%。合成d Cyd的最适反应条件为:2’-脱氧胸苷(d Thd)和胞嘧啶的浓度比为1∶1.5,p H6.5的磷酸缓冲液,1 mg/m L的菌体量,终体系10 m L,30℃条件下反应1 h,产物转化率可达71.9%。此方法还可用于制备其他核苷类似物,具有广泛的适用性和应用前景。
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关键词
生物催化
N-脱氧核糖转移酶
2’-脱氧胞苷
自诱导系统
核苷类似物
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Keywords
Biocatalysis
N-deoxyribosyltransferase
2’-deoxycytidine
Auto-induction system
Nucleoside analogues
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分类号
TQ460.1
[化学工程—制药化工]
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题名生物转化法合成16α-羟基泼尼松龙的发酵工艺研究
被引量:6
- 2
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作者
张文权
崔励
郑桂兰
熊舒莉
王玺
王洪钟
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机构
清华大学生命科学学院
大连工业大学化工与材料学院
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出处
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期81-86,共6页
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基金
国家自然科学基金项目(No.20876088
No.21176138)资助
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文摘
目的:研究1株玫瑰产色链霉菌(Streptomyces roseochromogenes)的发酵培养基和底物转化条件,以提高16α-羟基泼尼松龙的转化率。方法:采用紫外与氯化锂复合诱变获得目的菌株TS-58,利用正交实验等方法考查摇瓶发酵条件,研究不同浓度的碳源、氮源对玫瑰产色链霉菌生长的影响,以及不同底物浓度、底物加入时间、装液量、金属离子和添加助溶剂等条件对转化生成16α-羟基泼尼松龙能力的影响。结果:获得最佳转化培养基为葡萄糖10 g/L、可溶性淀粉50 g/L、蛋白胨10 g/L、黄豆饼粉25 g/L、磷酸二氢钾0.2 g/L、硫酸镁0.5 g/L硫酸锌0.5 g/L。在底物投料量5 mg/mL添加0.8 mg/ml PEG助溶剂的最优条件下,16α-羟基泼尼松龙的转化率达到了13.8%。结论:突变株Streptomyces roseochromogenes TS-58能有效地在泼尼松龙上引入16α-羟基羟基,为工业生产16α-羟基泼尼松龙奠定了基础。
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关键词
玫瑰产色链霉菌
泼尼松龙
生物转化
羟化反应
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Keywords
Streptomyces roseochromogenes
prednisolone
microbial transformation
hydroxylation
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分类号
TQ467.6
[化学工程—制药化工]
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