本文建立了液相色谱-高分辨质谱鉴定玛卡中蛋白的方法。从缓冲液浓度、提取料液比、提取温度、提取pH以及提取时间5个因素优化了提取条件,通过响应面试验预测其蛋白提取最优方案并验证。最终确定在1 g样品中,加入45 mL pH=10的Tris-HCl...本文建立了液相色谱-高分辨质谱鉴定玛卡中蛋白的方法。从缓冲液浓度、提取料液比、提取温度、提取pH以及提取时间5个因素优化了提取条件,通过响应面试验预测其蛋白提取最优方案并验证。最终确定在1 g样品中,加入45 mL pH=10的Tris-HCl缓冲液,提取温度70℃,时间40 min,酸沉pH=2.5,提取率为45.69%,与预测值46.69%基本一致。以UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用仪分析,所得肽段在Uniprot上进行Blast序列对比,其中明确生物来源与分子功能的有6条。本文建立的方法提取效率高,可为玛卡多肽的结构与活性功能之间的研究提供技术手段。展开更多
文摘本文建立了液相色谱-高分辨质谱鉴定玛卡中蛋白的方法。从缓冲液浓度、提取料液比、提取温度、提取pH以及提取时间5个因素优化了提取条件,通过响应面试验预测其蛋白提取最优方案并验证。最终确定在1 g样品中,加入45 mL pH=10的Tris-HCl缓冲液,提取温度70℃,时间40 min,酸沉pH=2.5,提取率为45.69%,与预测值46.69%基本一致。以UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用仪分析,所得肽段在Uniprot上进行Blast序列对比,其中明确生物来源与分子功能的有6条。本文建立的方法提取效率高,可为玛卡多肽的结构与活性功能之间的研究提供技术手段。