基于miR-378探讨丹红注射液干预压力超负荷心力衰竭大鼠心肌纤维化机制

目的探讨丹红注射液对压力超负荷心力衰竭大鼠心肌纤维化的作用与机制。方法取50只大鼠并对其行主动脉弓缩窄术(transverse aortic constriction,TAC),造模9周后将其随机分为模型(TAC)组、丹红注射液(DH)组(6.0 mL·kg-1)、卡托普利(Captopril)组(8.8 mg·kg-1),另设立10只为假手术(Sham)组。药物干预15 d后对各组大鼠进行超声心动图检测;酶联免疫法测定血清氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro brain natriuretic peptide,NT-pro BNP)含量;HE、Masson染色观察心肌病理学及纤维化改变,Western blot检测心肌组织中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen-1,COL-1)、Ⅲ型胶原蛋白(collagen-3,COL-3)及α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达;qRT-PCR检测心肌组织中miR-378、TGF-β1 mRNA、Col-1 mRNA、Col-3 mRNA、ɑ-SMA mRNA表达。结果与Sham组比较,TAC组左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)、心肌组织miR-378下降,左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic dimension,LVEDD)、左室收缩末期内径(left ventricular end systolic diameter,LVESD)、血浆NT-pro BNP、TGF-β1、COL-1、COL-3及α-SMA mRNA及蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01);细胞排列紊乱,纤维化明显。与TAC组比较,DH组LVEF、LVFS、心肌组织miR-378上升,LVEDD、LVESD、血浆NT-pro BNP、TGF-β1、COL-1、COL-3及α-SMA mRNA及蛋白表达下降,差异均有统计学意义(P<0.01);细胞排列趋于整齐,胶原纤维沉积减轻。结论丹红注射液能够改善压力超负荷心力衰竭大鼠心肌纤维化,其机制与调控miR-378/TGFβ-1信号通路表达有关。

基于国家专利的中药复方治疗抑郁症用药规律研究

目的:借助中医传承辅助平台系统软件,分析抑郁症中药复方专利的用药规律,为临床遣方用药及新药开发提供依据。方法:登录国家知识产权局中国专利公布公告网站(http://epub.sipo.gov.cn/),检索2015—2020年治疗抑郁症的复方中药专利,借助中医传承辅助平台(V2.5),采用频数统计、关联原则、复杂系统熵聚类等数据挖掘方法对核心药物及其性味、归经、组方规律及新处方进行分析研究。结果:共纳入治疗抑郁症的中药复方专利126项,涉及药物176味;常用药物为柴胡、郁金、酸枣仁、白芍、合欢皮等;常用药对为白芍-柴胡,郁金-白芍,当归-柴胡,郁金-柴胡;药味以甘、苦、辛为主,药性以温药居多,归经多属肝、心、脾经,并得到药物之间的关联规则,置信度较高的关联规则有“当归,白芍->柴胡”“甘草,白芍->柴胡”等;共有20对核心组合;新处方10首。结论:借助中医传承辅助系统分析复方中药专利治疗抑郁症的用药规律,有助于为临床治疗提供新思路,并为选方用药提供参考依据。

基于数据挖掘的抑郁症中医证候分布及用药规律分析

目的:通过数据挖掘技术分析抑郁症中医证候分布及用药规律。方法:对近10年有关抑郁症的文献资料进行整理,建立文献数据库,运用频数法、聚类分析、因子分析等方法统计分析。结果:抑郁症中医证候共22种,其中高频证候分别为肝郁脾虚证、肝郁痰阻证、肝郁痰瘀证、心脾两虚证、肝郁血瘀证、肝气郁结证等;证候要素分析,气滞、脾虚、痰浊、血瘀、痰瘀等为其主要病机;病位以肝、脾、心为主;使用中药157味,其中高频中药26种,主要是补益药、理气药、化痰药、活血药及安神药;聚类分析可将中药分为6类;因子分析可将中药分为8类。结论:抑郁症病位主要在肝、脾、心;肝郁、脾虚、痰瘀为其主要病机;疏肝行气、健脾补虚、化痰通滞、安神定志为其主要治法。

浅析从痰湿体质论治冠心病

近年来我国冠心病发病率、死亡率逐年上升,内皮功能紊乱、代谢障碍成为其独立危险因素,痰湿体质者存在不同程度血管内皮功能紊乱及代谢功能障碍,是冠心病高危人群。基于“体质可调论”理论,认为痰湿壅闭是冠心病的发病基础和病机要点,从体质学角度提出化痰逐饮适用于冠心病,为临床提供新思路。

病证结合动物模型研究思路述评

病证结合动物模型是中西医结合基础研究的有效工具,在模型运用过程中仍有部分问题亟待解决。本文总结现阶段两类病证结合动物模型研究思路,对病因与证因的时序性关系、正向评价与逆向反证的可信度关系、不施加证因的合理性等研究中涉及的问题进行论述,提出相应的发展思路,以期为进一步研究提供借鉴。

中医病因型证候模型建立的思考

中医病因造模法是证候动物模型的经典研究思路,在促进中医药现代化进程的同时亦暴露出部分问题。文章概述中医病因造模法在脾气虚证模型研制中的研究现状,从中管窥出制备思路缺乏共识、病因模拟方法多样化、“病”与“证”相互独立等共性问题,现行思路指导下的病因型模型仍难以实现“因-证-症”统一。故基于多层次逻辑角度论证关键问题探讨相应对策,据此提出“因证关系”为逻辑基础,多病因法更具合理性;病因合理性评价是关键环节,基于“因果关联”逻辑思维遴选病因;遵循“以病统证”研究框架,构建病证一体化模型;或可引入体质因素,纯化病因因素等研究思路,以期为证候模型规范化发展提供新思路。

基于网络药理学探讨血府逐瘀汤治疗冠心病的作用机制

目的:分析血府逐瘀汤治疗冠心病的作用机制。方法:借助中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索血府逐瘀汤的化学成分和靶基因,利用GeneCards获得与冠心病相关的靶基因,采用Cytoscape 3.7.2绘制"中药成分-疾病靶基因"网络图,采用String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图,将PPI网络图导入Cytoscape 3.7.2,借助CytoNCA插件进行网络拓扑分析,采用R643.6.1软件对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果:筛选出血府逐瘀汤相关化合物224个,作用于冠心病的相关靶点3564个,PPI网络显示Degree值排名前10位的靶基因依次为IL6、AKT1、ALB、VEGFA、CCL2、EGF、IL1B、MMP-9、CASP3、MAPK1,拓扑分析结果显示Degree值排名前10位的靶基因依次为PTGS2、MMP2、VEGFA、AKT1、ALB、CASP3、STAT3、IL6、MMP9、SERPINE1。GO富集分析预测出此方对冠心病的治疗机制可能与调控营养水平反应、对氧含量的反应、膜筏、膜微域、磷酸酶结合等通路相关。KEGG富集分析预测出此方治疗冠心病可能是通过糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、流体剪切应力和动脉粥样硬化、HIF-1信号通路、TNF信号通路等几个关键的通路达到治疗效果。结论:本研究探讨了血府逐瘀汤治疗冠心病的活性成分及其作用机制,血府逐瘀汤可通过多靶点、多通路治疗冠心病,为进一步研究该方作用机制提供了理论依据。

慢性心力衰竭的微观指标辨证研究概况

慢性心力衰竭的典型外在症状与体征出现较晚,而传统四诊方法未能深入至微观层面,严重制约辨证的开展。借助现代检测技术获取的微观指标,可丰富直观的外象观测内容,弥补传统四诊方法的局限,已逐步成为慢性心力衰竭辨证的有益补充。本文归纳心功能分级及相关指标、心脏分泌的利钠肽、生物学标志物等微观指标在慢性心力衰竭辨证中的研究概况,分析不同微观指标与慢性心力衰竭证候演变规律的关联程度,探讨各微观指标的诊断价值及局限性。对现阶段存在的单一指标局限性、部分指标缺乏特异性等问题进行论述,据此提出引入权重量化概念、多指标联合运用、借助系统生物学等发展思路,以期为慢性心力衰竭辨证客观化提供新思路。

基于网络药理学探讨炙甘草汤治疗心律失常的作用机制

目的:运用网络药理学方法探讨炙甘草汤治疗心律失常的作用机制。方法:运用中药系统药理数据库与分析平台(TCMSP)和BATMAN-TCM数据库,筛选出炙甘草汤有效成分及其作用靶点。通过GeneCards、OMIM数据库筛选出心律失常的疾病靶点,并与中药靶点合并取交叉靶点,采用String数据库构建靶点蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并运用Cytoscape 3.7.2筛选关键基因,同时借助CytoNCA插件进行拓扑分析;运用Bioconductor数据库及RX644.0.0软件对交集基因进行基因本体(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。利用swissdock在线分子对接工具对蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络中的核心蛋白与核心化合物分子进行分子对接。结果:筛选出171个化合物及4090个靶点,得到关于心律失常疾病靶点435个;PPI结果显示,Degree值排名前6的基因分别为:INS、KCNH2、SCN5A、CAV3、GJA1、TNNI3;拓扑分析显示Degree排名前5的基因分别为:EGFR、HSPA8、NTRK1、ESR1、HSP90AA1;分子对接结果显示:炙甘草汤的大多数活性成分和关键靶点的结合率较强,其结合能最低为SCN5A与Lysine、KCNH2与Gamma-Aminobutyric Acid;GO富集分析显示炙甘草汤治疗心律失常与心脏收缩、心脏肌肉收缩、心的过程、横纹肌收缩、心脏收缩调节等有关。KEGG富集分析显示心肌细胞的肾上腺素能信号、肥厚型心肌病、cGMP-PKG信号通路、扩张型心肌病相关。结论:炙甘草汤治疗心律失常具有多成分、多靶点、多途径的特点。

冠心病不同证候的蛋白质组学研究进展

从冠心病血瘀证、痰证、痰瘀互结证、气虚证、心肾阴虚证的蛋白差异表达进行评价,筛选出差异蛋白,探讨其诊断价值及证候发展规律;对冠心病蛋白质组学实验提出规范检测标准、优化实验设计、创新技术手段等建议。冠心病与正常组的差异蛋白为CD41、视黄醇结合蛋白、结合珠蛋白、血清白蛋白等;痰证以脂质代谢异常所导致的"高脂"为主要特点,其与血瘀证主要差异蛋白为载脂蛋白E、载脂蛋白H及巨噬细胞刺激蛋白1等;痰瘀互结证的特点为"高脂、高凝",其与痰证差异蛋白为纤维蛋白原β链、补体C4、载脂蛋白AI前体、载脂蛋白E、白蛋白等。心肾阴虚证与血瘀证的差异蛋白为补体C3、补体C1、载脂蛋白A-1、载脂蛋白4前体、载脂蛋白E等;气虚证与血瘀证的差异蛋白为补体C3、补体C4-A、补体C7、血浆血管舒缓素、血红素结合蛋白等。以上差异蛋白可作为辨别中医证型的依据。

主动脉弓缩窄术诱导心力衰竭大鼠的肠道菌群变化特征

目的探讨主动脉弓缩窄术(TAC)诱导心力衰竭(简称心衰)大鼠的肠道菌群变化特征。方法将30只SD大鼠分为空白组(Norm组)、模型组(Mod组)和假手术组(Sham组),每组6只。Mod组大鼠采用TAC术制备为慢性心衰大鼠,对Sham组大鼠仅予开胸后缝合处理,Norm组则不予任何处理。造模10周后,采用超声心动图测量三组大鼠心功能情况,ELISA法检测血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平,心肌和小肠组织行HE染色,收集肠道内容物行16S rRNA测序。结果与Sham组相比,Mod组左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)明显下降(P<0.01),NT-proBNP明显升高(P<0.01)。α−多样性分析显示,与Sham组比较,Mod组大鼠的OTU数量增加。PCoA分析显示,Mod组和Norm组菌群明显分开,Norm组和Sham组菌群分离不明显。在属水平上,与Sham组相比,Mod组埃希菌−志贺菌属(Escherichia-Shigella)、Burkholderia-Caballeronia-Paraburkholderia、棒状杆菌属(Corynebacterium)丰度升高,罗姆布茨菌属(Romboutsia)丰度下降(P<0.05)。结论TAC诱导的慢性心衰大鼠肠道菌群结构发生了变化。

基于数据挖掘的治疗慢性胃炎中药复方用药规律研究

目的借助中医传承辅助平台软件,分析治疗慢性胃炎中药复方用药规律,为临床遣药组方及新药开发提供依据。方法检索2015—2020年国家专利数据库中治疗慢性胃炎的中药复方专利,借助中医传承辅助平台(V2.5),对中药频次、中药归经及药性药味进行统计,运用关联规则方法分析中药复方的配伍规律,运用熵聚类获得核心中药组合及候选新处方。结果共纳入治疗慢性胃炎中药处方126首,涉及中药157味,使用频次≥20的中药共21味,频次较高的有白芍、黄连、白术、木香、枳壳、陈皮等。中药归经以脾经、胃经、肝经为主。中药药性主要为温性、寒性,药味主要为苦味、辛味、甘味。对药出现频次较高的有白术、白芍,延胡索、木香,白芍、木香,白术、木香等。角药出现频次较高的有白术、白芍、木香,白术、白芍、砂仁,白术、砂仁、枳壳等。应用关联规则方法共得到中药组合15组,置信度较高的有"延胡索→枳壳→白术""砂仁→茯苓→白术""白芍→砂仁→白术""砂仁→枳壳→白术"等。基于复杂系统熵聚类,共得到核心中药组合24组;基于无监督熵层次聚类,得到治疗慢性胃炎候选新处方12首。结论中药治疗慢性胃炎用药灵活,核心中药组合及候选新处方涉及理气健脾、化湿和胃、活血止痛、消食护胃等方面。

基于“方证对应”理论探讨主动脉弓缩窄致心力衰竭大鼠模型的中医证型与代谢标志物

目的:观察3种中药注射液对主动脉弓缩窄(TAC)致心力衰竭大鼠模型的疗效差异,基于“方证对应”理论探讨模型的中医证型,从代谢角度揭示方证的生物学基础。方法:对大鼠进行TAC术,造模成功将其后分为模型组、丹红注射液组(6.0 mL·kg^(-1))、参麦注射液组(6.0 mL·kg^(-1))、参附注射液组(6.0 mL·kg^(-1))和曲美他嗪组(10 mg·kg^(-1)),另设立假手术组作对照。药物干预15 d后,对各组进行超声心动图、血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)与心肌组织病理染色检测,对比疗效以遴选有效注射液;运用比色法检测有效注射液干预后的血清糖脂代谢指标,利用超高效液相色谱-质谱法观察心肌组织代谢产物与关联代谢通路。结果:与假手术组比较,模型组左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(FS)显著下降(P<0.01),左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)和NT-proBNP水平显著上升(P<0.01)。与模型组比较,丹红注射液组LVEF和FS显著上升(P<0.01),LVIDd、LVIDs、NT-proBNP水平明显下降(P<0.05,P<0.01);参附注射液组的NT-proBNP水平明显下降(P<0.05);参麦注射液组的LVIDd明显上升(P<0.05),NT-proBNP水平显著上升(P<0.01);曲美他嗪组LVEF和FS显著上升(P<0.01),LVIDs和NT-proBNP水平明显下降(P<0.05,P<0.01)。丹红注射液组与曲美他嗪组的血清葡萄糖、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平明显回调(P<0.05,P<0.01);丹红注射液组的9种心肌产物回调,涉及甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,乙醛酸和二羧酸酯代谢,甘油磷脂代谢;曲美他嗪组的10种心肌产物回调,涉及甘油磷脂代谢。结论:丹红注射液对TAC致心力衰竭模型的疗效显著且优于参附注射液与参麦注射液,推测该模型与心血瘀阻证密切关联;丹红注射液干预模型的生物学机制涉及调节糖脂代谢、氨基酸代谢、丁酸代谢紊乱。

主动脉弓缩窄术建立心力衰竭大鼠模型的病理过程观察与非靶向代谢组学分析

目的:研究主动脉弓缩窄(TAC)致大鼠心力衰竭的病理过程与心肌组织代谢产物变化规律。方法:对大鼠进行TAC术,术后分为TAC-30 d组与TAC-60 d组,另设立同时段的假手术组作对照。对各组大鼠进行超声心动图和心肌组织病理染色;利用酶联免疫吸附测定法检测血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)和三磷酸腺苷(ATP)含量;液相色谱-质谱联用技术观察心肌组织代谢产物与关联通路的变化特征,流动相水(A,含25 mmol·L^(-1)乙酸铵和25 mmol·L^(-1)氨水)-乙腈(B)梯度洗脱(0~0.5 min,95%B;0.5~7 min,95%~65%B;7~8 min,65%~40%B;8~9 min,40%B;9~9.1 min,40%~95%B;9.1~12 min,95%B),电喷雾离子源,正、负离子检测模式,采集范围m/z 70~1050。结果:与假手术30 d组比较,TAC-30 d组的左室收缩末期内径(LVIDs)显著下降(P<0.01),左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(FS)、左室后壁舒张末期厚度(LVPWd)、左室后壁收缩末期厚度(LVPWs)显著上升(P<0.01);心肌细胞排列紊乱、水肿,胶原纤维增生;NT-proBNP含量显著上升、ATP含量显著下降(P<0.01);15种代谢产物表达异常,涉及嘧啶代谢通路、泛酸和辅酶A生物合成通路。与假手术60 d组比较,TAC-60 d组的LVEF、FS显著下降(P<0.01),左室舒张末期内径(LVIDd)、LVIDs、LVPWd明显上升(P<0.05,P<0.01);心肌细胞水肿明显增大,肌纤维变性,出现凝固性坏死,大量胶原纤维沉积;NT-proBNP含量显著上升、ATP含量显著降低(P<0.01);21种代谢产物表达异常,涉及嘧啶代谢通路、淀粉和蔗糖代谢通路。结论:TAC术后30 d为心肌肥厚阶段,脂代谢障碍,嘧啶代谢紊乱,能量失衡;TAC术后60 d为心力衰竭阶段,脂代谢障碍加重,糖代谢过度激活,嘧啶代谢持续紊乱。

表观遗传学在缺血性脑卒中中的研究进展

缺血性脑卒中是世界范围内导致死亡和长期残疾的主要原因之一,不仅严重影响患者的生活质量,而且给家庭和社会带来沉重的经济负担,流行病学研究表明,脑卒中已成为全球范围内第二大致死以及主要致残性疾病,伴有高发病率、高复发率、高病死率的特点。表观遗传机制是指动态调节体内每个细胞内的基因表达和功能,且相互关联的分子过程,是在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现的一种生物机制,包括DNA甲基化、组蛋白修饰以及非编码RNA等,但有关表观遗传学的研究目前较集中于肿瘤等其他疾病,最新的研究发现,其作为参与缺血性脑卒中病理生理过程的一类重要关键因素,在过去的几十年里受到了广泛的关注。在该文中,着重介绍表观遗传如何介导脑卒中诱导的过程,也总结了卒中治疗中针对这些机制的一些可能存在的药物靶点,深入探讨了针对脑卒中中医分型中医药治疗抗脑缺血损伤机制的意义。

基于微观辨证体系探讨“无证可辨”的对策

辨证论治是中医诊察疾病的精髓,但随着现代医学的发展,各种“无症状疾病”或者疾病无症状阶段”造成的“无证可辨”给中医辨证施治带来了新的难题。本文试通过分析“无证可辨”产生的原因,微观辨证带来的启示及存在的问题,并探讨如何借助微观辨证体系解决中医“无证可辨”的局面。