人心肌红蛋白多肽单抗原表位基因的克隆、原核表达及抗体制备

目的本研究以原核表达单抗原表位的人心肌红蛋白(MB)肽段,制备不同表位的多克隆抗体。方法利用软件分析人心肌红蛋白的抗原表位,获得4个肽段(片段1、2、3、4);PCR扩增其基因序列,连接到表达载体p ET-GST,转化至E.coli BL21进行诱导表达。结果 GST-Sepharose 4B亲和层析柱进行MB-GST融合蛋白纯化,获得Mr28 000左右的融合蛋白,质量浓度为15 mg/L。免疫新西兰大白兔获得高效价的多克隆抗体。结论 4种多肽抗体均具有较好的特异性。