绒毛白蜡耐盐生理与解剖结构研究

为选育绒毛白蜡耐盐品种提供依据,本研究以二年生长势一致的绒毛白蜡新品种‘金箭’、华雄’、‘盐蜡’、‘鲁蜡3号’为研究对象,用9‰NaCl溶液处理期28 d,并对其进行生理指标的测定,通过隶属函数法选择绒毛白蜡的耐盐品种和盐敏感型品种,并对其进行解剖结构的制片观察,为该树种的耐盐选育及利用提供依据。盐处理28 d由生理指标测定值综合分析得到4个品种耐盐性强弱的排序为:‘盐蜡’>‘鲁蜡3号’>‘金箭’>‘华雄’。选择盐敏感型的‘华雄’和耐盐性较强的‘盐蜡’2个品种进行解剖结构的观察和测定发现:盐处理之后2个品种叶厚度、栅栏组织厚度、角质层厚度、木质部厚度等显著增加,且‘盐蜡’的叶厚度、栅栏组织厚度、海绵组织厚度、木质部与韧皮部厚度比值显著高于‘华雄’;‘盐蜡’处理之后的茎的皮层厚度显著高于对照,且处理之后韧皮部厚度显著降低,木质部厚度和最大导管直径均显著高于‘华雄’,处理之后2个品种的髓直径都出现显著增大,髓面积也相应地增加;盐处理之后2个品种根的周皮厚度均显著增加,同时‘华雄’皮层厚度显著增加,且显著高于‘盐蜡’,处理之后‘华雄’的中柱直径/根直径比值显著降低,说明其抵抗盐胁迫的能力较差。可用解剖结构研究代替生理研究对绒毛白蜡等树种的耐盐机制进行探索。

元宝枫组织培养与快速繁殖技术

【目的】元宝枫是我国特有的木本油料植物,非常适合开发利用,但其组培离体繁殖生根非常困难,建立合理的完整组培离体再生体系,在短时期内获得大量种苗和当年生带芽茎段,为该树种优良种苗规模化生产提供新途径,为选育元宝枫良种、种质资源保存与推广等提供研究基础。【方法】以元宝枫当年生带芽茎段和种子为试材,通过正交设计筛选法和单因素筛选法对其灭菌方式及腋芽诱导、继代增殖、生根培养基进行设计筛选。在MS、1/2MS和NN69基础培养基中分别添加不同质量浓度的6-BA、NAA和TDZ激素,通过不同配比找出元宝枫各阶段的最适培养基。【结果】全年中4月份为带芽茎段最佳采集时间,经洗衣粉溶液轻刷表面并冲洗半小时后,以75%酒精30 s+0.1%HgCl_(2) 10 min浸泡处理的灭菌效果最佳。再生体系各阶段最适培养基均为MS基础培养基,在其基础上再添加不同质量浓度的激素可以诱导嫩芽分化成不同器官。启动培养阶段,6-BA对腋芽诱导影响最大,最适培养基诱导率可达73.33%;继代增殖阶段,TDZ对不定芽分化影响最大,增殖系数最高可达4.31;生根阶段,采用单因素筛选法,发现添加0.2 mg·L^(-1) IBA元宝枫生根率和生根条数均为最高,达93.33%和4.3。【结论】元宝枫最适培养基为:1)启动培养:MS+0.06 mg·L^(-1) 6-BA和0.06 mg·L^(-1) NAA,诱导率为73.33%;2)增殖培养:MS+0.30 mg·L^(-1) TDZ和0.05 mg·L^(-1) NAA;3)生根培养:MS+0.2 mg·L^(-1) IBA。

白蜡属植物的开花特性和动态观察

研究花器官形态结构和开花特性,为白蜡授粉受精提供理论依据。本研究选取了3个白蜡品种(‘鲁蜡2号’、‘鲁蜡5号’和‘金箭’),对其开花特性、花器官构造进行观察。结果表明,白蜡品种雄株花期为11~13天,开花时间比雌株早13~15天;雌株‘鲁蜡2号’的花期为5~6天。3个白蜡品种的小花密集,开花后苞片2裂,花萼钟状4深裂,无花冠。雄花开花后露出舟形花药,花丝极短。雌花苞片开裂后露出雌蕊,柱头成熟时两裂,呈粉红色,花柱极短。扫描电镜下的3个白蜡品种苞片和花萼表面均有盾毛分布,不同品种间盾毛的形态有差异;‘金箭’、‘鲁蜡5号’的花药与花粉结构无显著差异;‘鲁蜡2号’整个雌蕊表面都有不规则褶皱分布。本研究可为进一步开展白蜡属植物的育种和种质资源创新利用研究提供参考。

山东省22份元宝枫种质资源含油率及脂肪酸组分分析

【目的】筛选发掘元宝枫优异种质,为元宝枫良种选育提供理论支撑和物质基础。【方法】以22份元宝枫种质为材料,测定元宝枫种仁含油率,并利用气相色谱法测定籽油中脂肪酸组分及含量,利用隶属函数法和主成分分析法对各种质进行综合评价。【结果】22份元宝枫种仁的含油率为24.4%~39.2%,变异系数为13.9%;在元宝枫籽油中共检测到19种脂肪酸成分,脂肪酸含量的变异系数为14.9%~42.5%,其中神经酸含量的变化范围为4.49%~11.69%,变异系数为25.0%。8种主要脂肪酸成分的平均含量由高到低的顺序为亚油酸(22.93%)>油酸(20.09%)>花生四烯酸(17.44%)>花生一烯酸(7.74%)>神经酸(6.78%)>棕榈酸(3.82%)>硬脂酸(1.98%)>亚麻酸(1.24%)。相关性分析结果表明,含油率与亚油酸、硬脂酸、亚麻酸显著相关,与其他几种脂肪酸相关性不显著,8种主要的脂肪酸成分之间存着在不同程度的相关性。利用主成分分析法进行降维分析,根据累积贡献率不低于85%的原则,共提取到3个主成分,累积贡献率为87.939%。分别利用隶属函数法和主成分分析法对元宝枫各种质的含油率和8种主要脂肪酸含量进行综合评价,得到的评价结果基本一致。【结论】元宝枫各种质的含油率及脂肪酸含量间均存在丰富的变异,具备筛选高神经酸含量、高含油率等特定选育目标的物质基础。其中,22号种质含油率为38.9%,神经酸含量为9.68%,综合评价值位列第1,19号种质神经酸含量最高,达11.69%,综合评价值位列第2。根据评价结果筛选出22号、19号和1号共3份优良种质。

绒毛白蜡嫩枝扦插生根的解剖学特征与内源激素变化

【目的】研究绒毛白蜡嫩枝扦插生根过程中的形态解剖特征,分析内源激素含量变化,探讨其扦插生根机制,旨在为培育绒毛白蜡良种壮苗提供理论参考。【方法】以绒毛白蜡当年生嫩枝为材料,以200 mg·L^(-1) IBA浸泡20 min为处理组,以清水浸泡为对照组,通过石蜡切片技术观察根原基发源部位及生根过程,利用ELISA法测定插穗基部IAA、ABA、ZR及GA_3含量。【结果】处理组扦插生根率为96.7%,对照组生根率为80.7%,两者之间差异显著。绒毛白蜡茎段内未观察到潜伏根原基,属诱导生根类型,根原基来源于与形成层相邻的韧皮薄壁细胞,为皮部生根类型。其扦插生根的过程可以分为根原始细胞的形成和分化、根原基的形成及不定根的表达3个阶段。扦插生根过程中处理组和对照组的IAA含量始终处于上升趋势,且处理组的IAA含量始终高于对照组的IAA含量;处理组的GA_3含量先下降后升高,而对照组的GA_3含量变化趋势则恰好相反,且对照组的GA_3含量始终高于处理组的GA_3含量;处理组的ZR含量先上升后下降,对照组的ZR含量则一直处于上升状态;处理组的ABA含量变化趋势较复杂,呈现出上升—下降—上升的趋势,对照组的ABA含量则是先下降然后持续上升,且处理组的ABA含量始终高于对照组的ABA含量。【结论】绒毛白蜡为皮部诱导生根类型,根原基发源于形成层附近的韧皮薄壁细胞,在生根过程中处理组和对照组的IAA含量持续升高,与不定根的形成、发育关系密切,但两者体内的GA_3、ZR及ABA含量变化趋势不一致,说明外源IBA的使用对绒毛白蜡体内的激素有一定的调节作用,并使其朝着有利于生根的方向发展。

不同元宝枫优树含油率与脂肪酸含量分析

【目的】分析元宝枫单株间含油率和脂肪酸组分的差异,筛选优良单株进行良种繁育。【方法】以22株10年生初选优树的种子为研究材料,测定分析种子含油率和脂肪酸组分含量,采用多重比较、相关分析和主成分分析进行研究。【结果】1)优树种仁含油率为25.35%~50.11%,变异系数为0.19。其中WYZ-5和SYZ-5含油率最高,为50.11%;其次WYZ-1为48.79%,优树XYZ-3和XYZ-2含油率最低,仅为25.35%和28.42%;2)种仁油共鉴定出13种脂肪酸组分,优树脂肪酸组分间以γ-亚麻酸变异系数最大,为0.38;其次花生二烯酸为0.37,α-亚麻酸为0.36,硬脂酸0.35,花生酸0.29;神经酸、芥酸和花生一烯酸变异系数较小,分别为0.17、0.18和0.18;功能性成分神经酸的占脂肪酸总量的6.23%;3)元宝枫含油率和脂肪酸相关性分析表明,种仁含油率与脂肪酸组分间存在极显著的正相关关系(P<0.01),神经酸分别与不饱和脂肪酸、油脂含量弱正相关,亚油酸与脂肪酸组分间呈极显著性正相关关系;4)通过主成分分析,将13个性状综合为2个主成分因子,累计贡献率达到93.247%,同时也逐个分析了每个主成分中主要的特征向量,选取主成分及权重,建立了元宝枫综合品质得分数学模型,根据综合得分进行单株优良度排序。【结论】元宝枫单株含油率和脂肪酸组分差异显著,具有筛选高油、高神经酸元宝枫的遗传潜能;脂肪酸成分分析发现元宝枫籽油中芥酸含量高达17.60%,因此如何选育高神经酸,低芥酸优良单株是元宝枫品种选育的方向。

生长调节剂对5个白蜡属新品种嫩枝扦插的影响

为实现白蜡属植物优良品种的规模化生产,以5个白蜡属植物新品种当年生半木质化嫩枝为材料,采用随机区组试验方法,研究IBA、ABT1、NAA 3种植物生长调节剂对嫩枝扦插的影响。结果表明,品种不同所适用的处理也不同。利用隶属函数法对各品种扦插苗的生根率、总根数及不定根长进行综合评价,1号处理(200 mg/LIBA浸泡20 min)最适于‘金箭’和‘盐蜡’嫩枝扦插育苗,3号处理(200 mg/L ABT1浸泡20 min)最利于‘鲁蜡5号’,4号处理(1000 mg/L ABT1浸泡1 min)最适用于‘青碧’,而‘华雄’则最适合用5号处理(200 mg/L NAA浸泡20 min)。对5个白蜡新品种的扦插苗各指标进行比较,不同品种间的生根率、总根数及不定根长之间的差异均达极显著水平,其中平均生根率由高到低为‘盐蜡’>‘青碧’>‘金箭’>‘华雄’>‘鲁蜡5号’;总根数以‘青碧’最多,平均总根数为13.1条;不定根长以‘鲁蜡5号’最长,为9.4 cm。

索拉非尼联合放疗治疗肝癌的临床有效性研究

目的探究肝癌患者应用索拉非尼联合放射治疗(放疗)的临床治疗效果。方法76例肝癌患者,利用随机盲选法分为试验组与参照组,各38例。参照组给予单纯放疗治疗,试验组在对照组基础上联合索拉非尼治疗。比较两组治疗前后的血小板衍生生长因子(PDGF)及血管内皮生长因子(VEGF)水平,1年疾病控制率(DCR)、1年生存率,不良反应发生情况。结果治疗后,试验组PDGF(3.97±1.08)ng/ml、VEGF(62.74±10.57)pg/ml低于参照组的(9.64±3.27)ng/ml、(129.51±12.32)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组1年DCR为86.84%(33/38),1年生存率为84.21%(32/38);参照组1年DCR为65.79%(25/38),1年生存率为63.16%(24/38)。试验组1年DCR、1年生存率高于参照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论肝癌患者接受放疗联合索拉非尼治疗能有效改善PDGF及VEGR水平,有助于控制肿瘤转移,提高生存期,值得应用推广。

基质和生长调节剂对3个刺槐新品种嫩枝扦插的影响

探索刺槐新品种扦插繁殖技术,加快实现良种的规模化生产。以‘蜜源1号’‘绿满青山’‘多彩青山’3个刺槐新品种为材料,采用四因素三水平正交试验设计,研究了植物生长调节剂的种类、质量浓度、处理时间和基质类型对刺槐嫩枝扦插的影响。结果表明,植物生长调节剂可显著提高3个刺槐品种的嫩枝扦插生根率,但生长调节剂的种类、质量浓度和处理时间对3个刺槐品种的生根率、最长根长、平均根长及总根数的影响均不显著;扦插基质是影响刺槐嫩枝扦插生根率的关键因素,基质类型对3个刺槐品种生根率的影响均达到了极显著水平,且3个刺槐品种均以珍珠岩上的生根率为最高。不同刺槐品种,适用的最佳处理也不同。隶属函数评价结果表明,‘蜜源1号’‘多彩青山’这2个品种均以9号处理(500 mg/L ABT1号生根粉处理0.5 h,基质为珍珠岩)下的综合评价值最高,‘绿满青山’以2号处理(200 mg/L IBA处理1 h,基质为珍珠岩)下的综合评价值最高。但适宜3个品种的最优组合仍需进一步试验验证。

基于SSR标记的白蜡群体遗传多样性和群体结构分析

【目的】白蜡是北方重要的盐碱地造林树种,了解白蜡居群的遗传多样性和群体结构对于白蜡种质资源的有效保护和开发利用至关重要。【方法】利用筛选的SSR标记,对来自9个不同地理区域的共380份白蜡种质资源进行遗传分化分析、分子变异分析(AMOVA)、非加权组平均法(UPGMA)聚类、主坐标(PCoA)与群体结构分析。【结果】12对SSR引物在所有白蜡中都能进行扩增,等位基因(Na)共51个,平均每对引物观察到4.287个等位基因,PIC为0.1197~0.7509,平均为0.5329,高于0.5;白蜡居群的群体内近交系数(Fis)平均为0.016,群体近交系数(Fit)平均为0.091,显示杂合频率高,居群近交较多,群体分化率(Fst)平均为0.095,存在中度程度的遗传分化,基因流(Nm)平均为4.199,居群间基因交流非常丰富;AMOVA分析结果表明9个白蜡居群的遗传差异主要来源于个体间(91%);群体结构分析结果显示,9个来自不同地理区域的白蜡居群中存在3个不同的基因库,居群间在进化上相对独立,存在一定程度的遗传混合,遗传组分相对单一,与UPGMA和PCoA分析的结果基本一致。【结论】12个SSR标记多态性较好、稳定性较高,能有效鉴别来自9个不同地理区域白蜡居群的380份种质资源,并揭示种质的遗传多样性和群体遗传结构,可为白蜡的种质保存和育种提供有价值的科学依据。

山东元宝枫天然种群种实的表型多样性

【目的】通过分析山东各地不同种群元宝枫种实的表型性状,以期揭示元宝枫表型变异程度及变异规律,为元宝枫优良种质资源的遗传改良、优良选种、保护和开发利用提供理论基础。【方法】采用巢式方差分析、相关性分析、主成分分析和聚类分析等方法,对14个元宝枫种群的12个种实表型性状的变异特征、变异来源、表型分化、表型性状之间以及表型性状与地理环境因子之间的相关性、对种源的聚类特征进行统计和分析。【结果】元宝枫各种实表型性状均在种群间和种群内呈极显著差异,种群间的遗传分化显著。元宝枫平均表型变异系数为11.18%,变异范围为6.56%~17.51%,其中最小值为种仁千粒重(0.29%),最大为果实千粒重(41.85%)。12个种实表型性状的平均相对极差为44.23%,变化范围在0.53%~96.93%。元宝枫12个表型性状在种群间和种群内的平均方差分量百分比分别为7.74%和86.34%,元宝枫种群间的表型分化系数为86.34%,种群内的表型分化系数为13.66%。种实表型性状相关性结果显示,果实形态中除张开角之外,其余性状与种子形态之间呈现极显著的正相关。元宝枫各表型性状除翅果宽,其余性状与均经纬度呈显著或极显著的正相关,大部分表型性状与海拔和年降水量呈负相关。主成分分析结果表明,前三个主成分累积贡献率为67.441%,第1主成分主要反映果实和种子的形态大小,第2和第3主成分主要反映了果实形态特征。利用欧式平方距离将14个元宝枫种群分为两大类,YYSL单独归为一大类,其余种群聚为另一类。【结论】元宝枫14个种群种实表型性状变异丰富,能够进行基于表型性状的种质资源筛选;元宝枫果实性状与种子性状的遗传变异稳定性相当;元宝枫主要变异来源为种群间变异;翅果张开角与其余性状均呈负相关或不相关,推测其为独立因子;元宝枫种实表型性状受经纬度与海拔的影响,大体呈现随着经纬度的增大种实变大、海拔增高而种实变小的趋势;本研究中的聚类结果与地理分布相关性不强,种群间的表型性状的遗传变异未形成明显的规律性,呈现较为随机的变异趋势。

4种白蜡的耐盐性响应特征与综合评价

以1年半生绒毛白蜡、美国红梣、美国白梣和中国白蜡实生苗为材料,进行为期28d的水培试验,通过测定4种NaCl浓度(0、40、80、120mmol/L)处理下其形态、生长量、膜透性、抗氧化酶系统、叶绿素含量以及光合参数等指标的变化特征,并通过相关分析、主成分分析和隶属函数法对4种白蜡进行了综合耐盐性分析与评价,以明确盐胁迫条件下4种白蜡植物的生理响应特征及其耐盐性差异,为盐碱地绿化树种筛选提供科学依据。结果表明:(1)盐胁迫条件下,4种植物形态特征受到不同程度影响,相对株高生长量都受到抑制;叶片膜透性和丙二醛含量随盐浓度的增加而增加,而叶绿素含量随盐浓度的增加而减少。(2)不同盐浓度处理下,4个白蜡植物叶片过氧化物酶活性呈先上升后下降的变化趋势,其峰值出现在40或80mmol·L^-1NaCl,超氧化物歧化酶活性变化规律不完全相同;随着NaCl浓度的增加,4种白蜡树种叶片的平均净光合速率都呈现下降的趋势,但绒毛白蜡升降趋势较平缓,胞间CO2浓度、气孔导度和蒸腾速率变化没有明显的规律性。(3)耐盐性综合评价结果显示,4种白蜡树种的耐盐性大小为绒毛白蜡>美国白梣>美国红梣>中国白蜡,这与盐害形态症状表现的结果排序相一致。研究发现,4种白蜡树种在盐胁迫下的生长、生理响应明显不同,耐盐性存在明显差异;绒毛白蜡和美国白梣在盐胁迫下的抗氧化酶活性更强,光合能力和生长受到的影响更小,具有更优异的耐盐能力,可优先作为中国沿海地区盐碱地造林绿化树种或抗逆育种的主要试验材料。

转BADH基因苜蓿T1代遗传稳定性和抗盐性研究

采用分子生物学检测和不同浓度的NaCl对转BADH基因苜蓿T1代2个株系进行遗传稳定性和抗盐性研究。结果表明,2个株系的T1代PCR阳性植株和阴性植株分离比例都符合孟德尔遗传规律;在0.8%NaCl胁迫下,转基因植株Northern杂交表达量明显增加,BADH酶活性和甜菜碱含量分别比对照植株增加2-4和4-5倍;不同浓度NaCl胁迫下转基因株系脯氨酸和可溶性糖含量、抗氧化酶活性都显著高于对照植株,而电导率和丙二醛含量显著低于对照植株。表明转入的BADH基因可以稳定遗传,转基因苜蓿植株耐盐性明显高于对照。

基于SSR荧光标记的白蜡核心种质构建

白蜡为中国北方重要的盐碱地造林树种,研究其遗传多样性,进一步构建核心种质,对白蜡优异种质的筛选及开发利用具有重要作用,为广泛开展白蜡种质资源的保存评价、挖掘优异基因资源提供核心材料,同时也为白蜡育种提供优良基因资源。本研究运用SSR标记的方法,选取田间表型性状差异较大的4个白蜡品种华雄、鲁蜡5号、金叶白蜡和金枝白蜡,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳从500对SSR引物中筛选出扩增条带清晰、多态性好、扩增稳定的42对引物。从筛选出的每对引物5′端添加荧光标记后,采用毛细管法通过DNA分析仪检测202个样品不同等位变异的扩增片段,从42对SSR引物中筛选出17对扩增稳定的引物,建立基于高通量荧光SSR标记的白蜡种质鉴定体系。研究了来自全国22个地区的具有代表性的202份白蜡种质资源的遗传多样性,通过R语言包Genetic Subsetter构建出了40份白蜡核心种质。结果表明:选用的17对引物都表现出多态性,共检测出142个等位变异,平均每对引物等位基因数为8.353个;平均有效等位基因数为3.342;平均多态性信息含量为0.635。可见白蜡属植物种间变异较大,具有丰富的遗传多样性。构建了40份白蜡核心种质,占原始种质的20%,t检测表明,所构建的核心种质遗传多样性丰富,其代表的遗传多样性指标与原始种质资源差异不显著,说明获得的核心种质资源能够充分、最大程度地代表原始种质。研究结果为白蜡种质资源的收集、保护、评价及利用提供了宝贵的理论依据和物质基础。利用17对高效引物构建了白蜡属植物SSR高通量鉴定体系,构建的40份白蜡核心种质能够最大程度的代表其遗传多样性。

邓恩桉的组织培养

为了满足人们对木材与木质纤维的需求,桉树已成为南方工业原料林的主要造林树种,并不断北移扩大栽植。因大多数桉树不耐寒,限制了许多速生桉树的北移栽植。邓恩桉（Eucalyptus dunnii）原产澳大利亚,抗寒,速生,树干通直,木质粗细均匀,

槭树分子标记研究进展综述

槭树(Acer L.)属槭树科,是世界范围内普遍使用的观赏树种,其品种丰富、种类繁多、用途广泛,具备很好的观赏价值、药用价值和用材价值。槭属植物不同种之间在物质组成上差异较大,因此某一种方法也许仅适用于某种或某类材料,想要找到相适宜的分子标记技术,应依据研究的应用目的及其研究对象不断地摸索、进步,从而选择既简单又可靠的DNA分子标记技术。现在已有数十种DNA分子标记技术,目前常用的分子标记方法有RFLP、RAPD、AFLP、SSR、ISSR、ITS、SRAP、SNP等,同时各种技术的结合使用也越来越受到重视。为了更有效的利用和保护槭属植物种质资源,使用分子标记技术对槭属进行遗传多样性分析、主成分分析、相关性分析和聚类分析等,以此有效对槭属植物进行遗传多样性和亲缘关系的研究分析、遗传图谱的构建、建立DNA指纹库、基因定位以及分子标记辅助育种等方面的研究应用。目前分子标记在槭属植物上的应用愈发广泛,技术也愈加成熟,但其存在的问题也无法忽视,在对槭属植物的分子标记技术应用的现状与目前存在的问题进行了探讨分析之后,对未来分子标记技术在槭属植物的研究方向这一重要目标提出了展望。

白蜡属优良种质资源亲缘关系的AFLP分析

为了探讨白蜡属植物种间、品种间亲缘关系以及同品种不同区域间的基因型差异,利用荧光AFLP分子标记技术,采用8对Pst I/Mse I引物组合对90个白蜡种质进行了DNA遗传多样性分析。结果表明:8对引物组合扩增出1 630条带,其中多态性条带1 399条,平均多态位点百分率为85.8%,平均有效等位Ne基因数为1.258 8,Nei’s平均遗传多样性指数为0.171 7;Shannon平均信息指数为0.286 9,表明白蜡属种间具有丰富的遗传多样性。采用NTSYS-PC软件的DICE法计算样本间的相似系数,UPGMA法进行聚类分析,结果表明,白蜡属植物种的聚类结果与传统的分类结果基本一致,绒毛白蜡及新品种(鲁蜡1号-鲁蜡4号)、美国紅梣及新品种(鲁蜡5号、鲁蜡6号)、美国白蜡及新品种(红叶白蜡、秋紫白蜡、秋火白蜡和秋欢白蜡)聚为一类;秦岭梣、庐山白蜡、花曲柳、中国白蜡、和窄叶白蜡聚为一类;不同之处在于花具花萼的象蜡树和对节白蜡与花无花萼的欧洲白蜡、水曲柳、新疆小叶白蜡和狭叶白蜡聚类为一类,象蜡树和水曲柳的亲缘关系较近,对节白蜡和象蜡树的起源与分类学地位有待于进一步的研究。说明AFLP标记技术能较好地揭示白蜡属种质资源的亲缘关系及演化规律,为种的分类及亲缘关系分析提供有力参考依据。

卡那霉素叶片涂抹法田间筛选转基因苜蓿的研究

以田间生长的苜蓿为材料进行卡那霉素(Kan)涂抹叶片筛选转基因植株最佳浓度和适宜观察时间的研究,并对筛选的抗性植株进行了PCR检测验证。结果表明,Kan叶片涂抹田间筛选的最佳浓度为1000mg/L,观察时间以12天为宜;经PCR检测验证,Kan筛选抗性苗的阳性检测率达到93.8%。研究建立了一种在田间对转基因苜蓿进行大量筛选的简便方法,对于转基因苜蓿材料的选育具有重要利用价值。

转基因苜蓿对土壤微生物的影响

采用传统的平板计数法和PCR凝胶电泳技术,在大田栽培条件下,以转BADH基因苜蓿和非转基因苜蓿为材料,于2009年和2010年连续2年测定苜蓿根际土壤细菌、放线菌和真菌数量的变化,并对外源基因是否转移到土壤微生物中的可能性进行检测分析。结果表明,在不同年份和不同月份转基因植株与非转基因植株根部土壤3大类微生物(细菌、放线菌和真菌)数量变化趋势一致;二者根部土壤3大类微生物数量无显著差异,2年间转基因苜蓿的土壤3大类微生物数量无显著差异;并利用BADH基因特异引物对土样的总DNA,以及菌株DNA进行PCR扩增,均未检测到外源基因扩增产物。初步研究结果表明,转基因苜蓿对土壤微生物系统尚没有明显的影响。

耐盐绒毛白蜡特异性SCAR分子标记的鉴定

该研究以耐盐型和盐敏感型绒毛白蜡及其F1代为材料,采用混合品系分析法进行RAPD分析。结果显示:在随机选取的150个10碱基随机引物中,仅有引物S20在耐盐基因池和盐敏感基因池间扩增出特异而可重复的592bp的多态性片段,命名为S20-592。获得的RAPD标记S20-592经克隆、测序、重新设计一对特异性引物转化成更稳定的SCAR标记。通过F1代个体验证,耐盐型个体均能扩增出此差异条带而盐敏感型个体中不能扩增出此差异条带,证明该SCAR标记的特异引物可用于耐盐绒毛白蜡物种的快速分子鉴定。