大黄对呼吸道合胞病毒感染小鼠的疗效研究

目的:探究大黄对呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠的疗效。方法:本研究为实验研究。4~6周龄SPF级雌性Balb/c小鼠42只,采用RSV Long株感染Balb/c小鼠,构建RSV感染动物模型。采用简单随机化法将42只Balb/c小鼠分为6组,每组7只,根据人与动物药物剂量换算方法确定给药剂量。按给予药物情况不同命名为正常对照组(生理盐水)、病毒对照组(生理盐水)、利巴韦林组(利巴韦林45 mg/kg)、大黄低剂量组(大黄35 mg/kg)、大黄中剂量组(大黄70 mg/kg)、大黄高剂量组(大黄105 mg/kg),除正常对照组外滴鼻感染RSV持续2 d,灌胃给药3 d。灌胃结束后,禁食12 h,处死小鼠取肺叶。苏木精-伊红染色检测小鼠肺组织的病理变化,冰冻切片检测组织中病毒荧光变化,蛋白质印迹法检测肺组织内呼吸道合胞病毒携带的绿色荧光蛋白(RSV-GFP)表达水平,病毒空斑实验法测定组织匀浆病毒滴度。实时荧光定量聚合酶链反应检测组织内病毒基因(RSV-N)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达水平。结果:(1)正常对照组小鼠肺组织结构清晰完整肺泡壁较薄,血管周围未见炎细胞浸润性现象,病毒对照组小鼠肺组织出现明显病理改变,间质增厚,组织毛细血管淤血,肺泡壁炎细胞浸润,利巴韦林组、大黄低剂量组、大黄中剂量组、大黄高剂量组较病毒对照组病变程度均有减轻。利巴韦林组、大黄低剂量组病毒荧光强度与病毒对照组比较降低。(2)5组小鼠RSV-GFP表达水平和病毒滴度比较差异均有统计学意义(F值分别为134.00、36.25,均P<0.001)。大黄中剂量组(0.67±0.06)、大黄高剂量组(0.71±0.08)RSV-GFP表达水平较病毒对照组(1.00±0.00)低(均P<0.05),利巴韦林组(0.25±0.02)、大黄低剂量组(0.25±0.03)RSV-GFP表达水平均较大黄中剂量组(0.67±0.06)、大黄高剂量组(0.71±0.08)低(均P<0.05),且利巴韦林组RSV-GFP与大黄低剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。利巴韦林组(0.36±0.08)、大黄低剂量组(0.39±0.06)的病毒滴度较病毒对照组(1.00±0.00)、大黄中剂量组(0.82±0.06)、大黄高剂量组(0.86±0.15)低(均P<0.05),且利巴韦林组(0.36±0.08)与大黄低剂量组(0.39±0.06)病毒滴度比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)5组小鼠RSV-N和TNF-α基因表达水平比较差异均有统计学意义(F值分别为115.40、14.75,均P<0.001);大黄低剂量组(0.39±0.09)、大黄中剂量组(0.56±0.02)、大黄高剂量组(0.73±0.04)RSV-N基因表达水平均较病毒对照组(1.00±0.00)低(均P<0.05),利巴韦林组(0.26±0.02)RSV-N基因表达水平均较大黄低剂量组(0.39±0.09)、大黄中剂量组(0.56±0.02)、大黄高剂量组(0.73±0.04)低(均P<0.05),利巴韦林组(0.41±0.04)、大黄低剂量组(0.48±0.08)、大黄中剂量组(0.65±0.15)、大黄高剂量组(0.61±0.15)TNF-α基因表达水平均较病毒对照组(1.00±0.00)低(均P<0.05)。结论:大黄可以抑制RSV感染小鼠的病毒复制和炎性因子的过度表达,减轻肺部炎性病理改变。