间苯三酚对泌尿平滑肌痉挛的调控作用机制

目的探讨间苯三酚对膀胱平滑肌痉挛的调控作用及其机制。方法体外水平上,采用膀胱肌条实验验证间苯三酚对不同药物刺激下膀胱痉挛的缓解作用;同时,RT-qPCR和Western blot检测间苯三酚解痉挛作用对膀胱组织中钙离子信号通路相关基因和蛋白的表达水平。转录组学分析间苯三酚在解除膀胱痉挛时对其他相关通路基因的影响,用RT-qPCR来验证相关基因的表达情况。结果间苯三酚能够缓解不同药物刺激引起的膀胱痉挛,且解痉作用随浓度增高而增强,组织细胞中Calponin 1和MYLK3的表达水平升高,PKCα表达水平降低。RT-qPCR检测结果显示间苯三酚作用时,小鼠膀胱组织中Gprc5bG、Ppp2r5a、Chpt1、Prkar2b、Abcd2、Rasd1基因的表达水平均明显降低,与RNA-seq的测序结果一致。结论间苯三酚具有缓解膀胱平滑肌痉挛的作用,其作用机制与钙离子信号通路相关。间苯三酚作用于膀胱平滑肌后,抑制了细胞外Ca^(2+)内流,结合于细胞中的钙调蛋白4Ca^(2+)CaM复合物减少,导致游离的Calponin 1含量升高。钙调蛋白使得MLCK活化程度下降,MLC磷酸化减少,抑制了Mg^(2+)-ATP酶的作用,肌球蛋白横桥与细肌丝肌动蛋白分离,肌肉舒张。同时,间苯三酚还抑制Rasd1基因的表达,提示其在作用于膀胱平滑肌时还可能与细胞周期、蛋白磷酸化、胆碱代谢、ATP合成以及肿瘤信号通路相关。