HBx-siRNA快速筛选体系的建立和应用

目的 :建立针对 HBx的小干扰 RNA(si RNA)快速筛选体系。方法 :1构建 HBx与增强型绿色荧光蛋白(EGFP) N端融合表达质粒 ;2用一步 PCR法 ,制备针对 HBx m RNA的 RNA多聚酶启动子 - si RNA表达框(SEC) ;3将 SEC转染 HBx- EGFP瞬时表达的 AD2 93细胞 ,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察分析 SEC对 HBx- EGFP荧光表达的抑制效果 ,从而确定有效 si RNA。结果 :1成功构建 HBx- EGFP融合表达质粒 p HBx- EGFP,在瞬时表达细胞中 ,HBx- EGFP绿色荧光主要呈颗粒状 ,聚集在核膜与核膜外周或细胞浆 ;2共转染 SEC能有效抑制 HBx- EGFP的瞬时表达。与 si HBx2 71相比 ,si HBx388是一高效 si RNA位点 ,并且该位点与 t RNAVal和 H1启动子搭配更有效。结论 :成功建立表达 HBx的荧光蛋白报告体系 ,结合快速制备 SEC的方法 ,可用于进行 HBx有效 si

成案在清代诉讼程序中的地位——以上诉裁决为例

本文所分析的11个案例摘录自《刑案汇览》，涉及到老疾收赎、存留养亲、情有可原等大清律例条文规定。通过对这些案例的上诉裁决的剖析，具体考察了清代成案在诉讼过程中的地位和作用；同时对清代诉讼过程中判例和制定法的关系、官员审理判决案件时的推理论证过程和所运用的技术、以及遵照先例与实现实质正义和遵守国家意识形态之间的关系等问题进行了探讨。

进口二手设备同样能为用户创造价值

利氏兄弟拍卖行每年在世界各地都会进行大量工程机械无底价拍卖。作为世界上最大的二手工程机械交易平台，利氏兄弟的拍卖活动遍布全球13个国家，竞标人来自130多个国家和地区。2008年，利氏兄弟进行了193场无底价拍卖会，拍卖总额超过35．7亿美元，8.4万多名买家购买了25.3万多台设备。

为下一世纪教育儿童

现在上小学一年级的儿童,二十一世纪初期将从学院里毕业出来;而且,他们可能一直工作到二○五○年。在校学习期间,他们务必获得一定的技能和态度,使其在若干年后能掌握各种新技术和新知识。在未来的岁月里,为了在职业、家庭生活和公民地位上取得成功,人们必须克服许多困难。

明日帝国 弗兰克·萨姆罗克和他的MMA武术学校

美国加利福尼亚州的圣何塞城街区中心的奥克罗兹购物广场座落在一片气势恢宏的建筑群中,建筑风格令人难忘。在广场附近有一风格质朴而又临街的高尔夫球店,那里有个小型的草场和像沼泽一样的池塘。弗兰克·萨姆罗克用1800美元成为了它的新主人,"

公元3000年设想

相信很多人都会疑惑，到了公元3000年，世界将会变成什么样子？这似乎很难想象。一些学者和科学家们已经对此展开积极的研究工作。但是人类的思维是否能够超越当今时代的束缚，科学合理地预测那么遥远的未来呢？

参天仙人掌

有些植物离江河湖海越远，土壤湿度越小，就越矮小。但沙漠中的仙人掌却是个例外。在墨西哥的下加利福尼亚有株世界上最高的仙人掌，它重10吨，高达17．69米。要是把它锯倒。要用两辆大卡车才能拖走。

决定游泳运动员距离的简易方法

不仅是教练员经常听到:“我应该游什么?”而且教练员自己也常自问:“什么问题对这运动是最适合的?”“这个问题是重要的”。这回答决定教练所要求运动员去进行何种类型的训练。错误的回答会导致淘汰一个运动员。如果你有一些马,你不会用同样的方法训练赛马、良种马和普通的马。一匹最好的马跑220码,一匹跑11/2英里,而另一匹是干活的马。不能把赛马弄去拉沉重的大车而把普通马来比赛用。因为它们本来不是适合做这些的。对马来说分辨它们应该从事什么工作是容易的,但对人这是不容易的。

阿特拉津土壤污染修复菌剂载体材料的筛选与应用

阿特拉津是长残留除草剂,其环境行为和生物修复技术已成为有机污染控制领域的研究热点。以廉价的高岭土、凹凸棒土和腐殖酸为载体材料,采用正交实验,把功能菌存活率作为目标性状,参考材料成球率,筛选出性能较好的高岭土、凹凸棒土和腐殖酸质量配比3种,分别为1∶0.5∶0.5(A3B2C1)、0.5∶0∶0.5(A2B3C1)和1∶0∶1(A3B1C2);在温度和紫外线耐受力实验中,A3B2C1材料配比更能够有效提升功能菌在高温和紫外线作用下的存活率,即载体中高岭土、凹凸棒土和腐殖酸质量比为1∶0.5∶0.5时效果最佳;利用A3B2C1载体材料配比制备菌剂,进行室内土壤修复实验,35 d时0.1%和0.5%载体菌剂添加量修复土壤中阿特拉津完全降解,而2个游离菌修复土壤中残留率均>16%,0.1%载体菌剂添加量修复过程中土壤微生物Shannon多样性指数和均匀度变化幅度较其他修复方式小,有利于土壤微生物生态系统的平衡,因此0.1%载体菌剂添加量修复效果为最优。

《谍影重重4》:揭开冰山另一角

"我的梦想是,在未来某个时间里,让马特和杰里米双雄并肩上位,拍出更有感情,更有韵味,同时也更颠覆和更厉害的片子来。"片名谍影重重4;神鬼认证导演托尼·吉尔罗伊主演杰里米·雷纳、蕾切尔·维兹爱德华·诺顿、唐娜·墨菲、琼艾伦等类型动作/冒险/惊悚片发行环影业公司上映日期2012年8月10日(北美地区)几年来,来自好莱坞环球公司关于《谍影重重》系列片的消息,不断地摧毁着马特·达蒙"粉丝"的希望这部以帅哥达蒙主演和起家的影片,居然宣布在它的第四集里,不再有达蒙出现,而且还逐渐砍掉了曾与达蒙合作过的几位配角的戏份,给人的感觉似乎是在"去达蒙化"实在让影迷们大跌眼镜。既然没有了达蒙所饰演的伯恩,那么这个系列还有什么延续下去的可能和意义呢?

来自中国的范勃

中国当代艺术以不可抵挡之势在国际舞台上异军突起，但这同时也掩盖了一些问题。中国的艺术创作传统源远流长，可追溯至数千年前，但直到最近，布面油画或丙烯技法的应用才被纳入到这一体系之中。同时，尽管人体绘画也经常出现在中国的水墨画作品中，但常常处于次要地位。

只要世界还有爱

'你需要的是爱'应该是比尔导演的座右铭,她用这个世界通用的语言,获得了观众的理解,也赢得了好莱坞。片名《你只需要爱》导演苏珊娜·比尔主演皮尔斯·布鲁斯南、崔娜·蒂虹、塞巴斯蒂安·杰森、金·波德尼亚等类型浪漫喜剧片发行索尼影业上映日期2013年5月3日(北美地区)丹麦女导演苏珊娜·比尔的影片《更好的世界》在2011年获得了奥斯卡最佳外语片大奖,她本人也从此更加受到世界影坛的关注。在《更好的世界》里,她用严肃地态度,揭示了一位国际医生和两个正在成长中的男孩子。

老007谈新007

现年59岁的皮尔斯·布鲁斯南.被认为是特工詹姆斯·邦德最成功的表演者之一。他本人也曾一再表示.接演007的角色才是他电影事业的真正起点.他对演好这个人物充满自信。而他在第一个合同期满时突然被'下课'的事件.也是闹得好莱坞满城风雨。据他自己说.当时他已经与昆汀·塔伦蒂诺商谈联手拍摄007新片《皇家赌场》了.却意外地被制片方解聘,他的震惊和愤怒可以想见。

不该把银幕暴力只当作娱乐

美国的'医生'节目里的主持人向观众说:'今日医嘱请拥抱你的家人更紧一些。'多年来,好莱坞作品的发展中,从西部片到战争片,从匪警片到间谍片,枪战和打斗越来越暴力和激烈,已经成为他们的招牌甚至骄傲。其中当然有血腥杀戮,同样也有快意恩仇,甚至还有'傻哥'、'傻叔'们的无厘头,所拍摄的镜头极尽奢华和刺激,新招数和高科技效果层出不穷。不能否认,枪战和暴力早就成为影域不可或缺的诱人法宝之一。对此,虽然制片商们赚得满钵满盆,却引起了社会上不断的批评。

好人和恶棍一线之隔

在这部影片里,来自加拿大魁北克的导演丹尼斯·维勒弗给人们讲述了一个高度扭曲而且非常可怕的故事……对于父母来说,恐怕没有比子女被绑架后生死不明,更能成为他们人生中的噩梦了。在今年的华纳兄弟公司拍摄的影片《囚徒》里,两对美国中产阶级的夫妇,遭到了这样可怕的命运之后,在痛苦不堪之中,不惜采用了所有他们能够做到的一切方法,全力争取时间来找到随时可能丧命的女儿们,而他们的努力将会带来什么样的后果?在这部影片里,来自加拿大魁北克的导演丹尼斯·维勒弗给人们讲述了一个高度扭曲而且非常可怕的故事。

浴火重生的《饥饿游戏2》

经历了一连串血腥的搏斗之后,竟然用自己的超人智慧,战胜了强权和暴虐的施惠国统治者的16岁女孩凯特妮丝,在本片能否浴火重生?值得期待。看过《饥饿游戏》的观众们,在这一集的结束之时,一定长舒一口气。在这部综合了少年神话、纯真爱情、未来科技和惊怵格斗的系列影片的开幕第一集里,在重大灾难中毁灭后的地球上重新建立起来的施惠国,结束了它的第74届'饥饿游戏',也就是该国征集了它辖下的12个行政区里的男女青少年自相残杀的比赛。与以往稍有不同的是,这次比赛的获胜者,不是最后和唯一的一个人,而是两个。

《辣手警花》:没有最强女,且看更强妞

两个奉行'不合作主义'的女警,互相看着不顺眼,一口气呼吸不合,也要大打出手……恐怕几年前.影坛女星桑德拉·布洛克左手赢得奥斯卡最佳女主角大奖.右手'荣获'金酸莓最差女角'大奖'的奇特情景.还留在观众的记忆里。她可真算得上是好莱坞的'奇女子'.一路上所演的影片大开大阖.风格迥异。她在早年的《生死时速》里演一个清纯女孩.在《生死时速2:海上惊情》中变得泼辣率性;在《超异能快感》里是受魔法诅咒迷茫姐姐;在浪漫爱情影片《湖边小屋》中则成为温柔情人;

铁血的空战,罕见的友谊

影片导演接受采访是表示,他的影片展示了战争对人的灵魂和身体的摧残。拍摄这部电影的目的就是要告诉人们,我们不希望再经历一次这样的战争。片名《雪野求生》导演皮特·纳斯主演拉克兰·尼博尔、鲁伯特·格林特、斯蒂格·亨里克·霍夫、大卫·克劳斯、弗洛莱恩·卢卡斯等类型剧情/动作片上映日期2013年4月12日(北美地区)发生在上个世纪那场席卷了几个大陆的第二次世界大战,并没有因为时间的渐行渐远而被人们遗忘。正相反,随着国际大环境的和平时间的延长,人们的思维越来越趋向冷静。

《黑帮之家》:德尼罗“金盆洗手”真不易

有马丁·斯科塞斯和罗伯特·德尼罗加盟,所以新片里一定是有惊怵、有匪警、有动作、有粗口,也有暑期影片的轻松,看完保证让人大呼过瘾!在好莱坞,只要马丁·斯科塞斯和罗伯特·德尼罗的名字放到一起,那么他们合作的'产品',一定会与黑帮、黑手党、黑社会有关,这已经不是什么秘密了。这两位把'黑社会'内幕吃到骨子里的老影人,一同改编了托尼奥·伯纳基斯塔的小说《黑社会》,但是他们这次的风格更接近前几年德尼罗的热门影片《老大靠边闪》系列。片子里遇到了麻烦的黑帮老大,实际上并不是无恶不作,虽然在黑道打拼。