华蟾素、博尔泰力注射液治疗实验性肝纤维化的研究

目的：探讨华蟾素、博尔泰力两种注射液治疗大白鼠肝纤维化的疗效。方法：用四氯化碳注射大白鼠，同时给予低蛋白高脂饲料，经过6周时间造模，形成肝纤维化的大白鼠动物模型，然后分别用华蟾素、博尔泰力注射液2组药进行治疗。结果：经治疗1个月后，大白鼠血清生化指标，肝功能明显改善。大白鼠肝组织切片染色观察，肝纤维化的程度明显好转。结论：提示华蟾素和博尔泰力两种注射液均有抗肝纤维化的作用。

乙肝病毒基因型与肝脏病理改变的关系

目的:探讨乙型肝炎病毒基因型与慢性乙型肝炎患者肝脏病理变化的关系.方法:应用乙肝病毒型特异性引物采用巢式聚合酶链反应(PCR)和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR),对北京佑安医院住院92例慢性乙型肝炎患者进行乙型肝炎病毒基因型及亚型分析,参照2000年《病毒性肝炎防治方案》对慢性肝炎进行病理分级、分期诊断.结果:92例慢性乙型肝炎患者中HBV基因型分布为B型17例(B2亚型),B/C混合型17例(B2/Ca亚型),C型58例(Ca亚型).17例HBV B型感染患者中病理诊断肝脏炎症活动分级为G1-G3期分别为35.29%,58.82%,5.88%;肝脏纤维化程度分级为S1-3级分别为58.82%,29.41%,11.76%,17例HBV B/C型感染患者中病理诊断肝脏炎症活动分级为G1-G3期35.29%,52.94%,11.76%;肝脏纤维化程度分级为S1-3级23.52%,52.94%,23.52%,58例HBV C型感染患者中病理诊断肝脏炎症活动分级为G1-G4期31.03%,24.14%,36.21%,8.62%;肝脏纤维化程度分级为S1-4级25.86%,39.66%,5.17%,29.31%;HBV三组不同基因型的慢性乙型肝炎患者肝组织病理检查有统计学意义(x^2=15.13,P<0.01).HBV B型与B/C型感染患者年龄在21-30岁组58%-76%,31-40岁组17.6%-29.4%,C型感染患者年龄在21-30岁组25%,31-40岁组46.6%,40岁以上有24.24%;不同HBV基因型感染患者的年龄分布有显著性差异(x^2=9.54,P<0.05).结论:慢性乙型肝炎患者HBV基因型中C型比例明显高于B型与B/C型.HBV C型患者肝脏病理变化较B型与B/C型严重.不同HBV基因型感染患者的年龄分布不同.

北京地区散发性戊型病毒性肝炎238例临床研究

目的探讨北京地区散发性戊型病毒性肝炎的临床特征,为临床诊治提供参考。方法回顾2007年11月至2009年7月在首都医科大学附属北京佑安医院住院的238例戊型病毒性肝炎患者的临床及实验室特点,分析散发性戊型病毒性肝炎的临床特征和实验室特点。结果 238例戊型病毒性肝炎患者分布于不同的年龄段,其中40～49岁、50～59岁及60岁以上年龄段戊型肝炎患者显著多于39岁以下年龄段,老年患者占27.3%,未见学龄及学龄前儿童;黄疸型221例(占92.9%),无黄疸型17例(占7.1%);单纯戊型肝炎病毒感染209例(占88%),重叠感染29例(占12%),均为乙、戊型肝炎病毒重叠感染。戊型病毒性肝炎ALT显著增高,41.6%的患者大于1000IU/L,20%以上的患者出现PTA低于正常范围,6(2.5%)例患者的PTA低于40%。老年戊型病毒性肝炎患者肝脏合成及储存指标均低于其他年龄组患者,血清白蛋白和胆碱酯酶下降明显。结论散发性戊型病毒性肝炎患者临床特征及生化指标符合急性肝损伤的表现,以急性黄疸型肝炎为主,也有病情较重患者,不能忽视。尤其是老年戊型肝炎患者,在治疗肝病期间一定要注意并发症的治疗。

戊型肝炎患者T淋巴细胞亚群的变化

目的探讨戊型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其免疫学意义。方法应用流式细胞仪检测136例急性戊型肝炎患者及13例正常人群的外周血T细胞亚群。结果戊型肝炎患者与正常人比较,T淋巴细胞亚群变化无统计学差异(P>0.05)。单纯戊型肝炎病毒感染组的CD3+细胞总数、CD4+和CD8+细胞绝对数均高于重叠乙型肝炎病毒感染组(P均<0.05)。结论戊型肝炎病毒感染患者存在宿主细胞免疫功能的改变,这可能与急性戊型肝炎肝细胞损伤和清除病毒有关。

新疆和田地区人群血清抗HEV水平调查

目的 调查新疆维吾尔自治区（新疆）和田地区在1986-1989年戊型肝炎流行后,目前人群中血清抗戊型肝炎病毒（hepatitis E virus,HEV）特异性抗体水平及当地HEV感染的状态.方法 应用酶联免疫方法检测抗HEV IgG和抗HEVIgM,检测新疆和田地区1～90岁健康人血清3070例,对抗HEV IgM阳性血清用实时荧光PCR方法检测HEV RNA,酶联免疫方法检测HEV Ag.结果 3070例血清中维吾尔族者2627例,汉族者443例.检测结果显示抗HEV IgG阳性1074例,总阳性率为34.98%；维吾尔族人群感染率为34.64%,汉族人群感染率为37.18%,2组人群血清抗HEV阳性率差异无统计学意义.抗HEV lgM与抗HEV IgG抗体2项均为阳性20例,单纯抗HEV IgM阳性7例；实时荧光PCR检测HEV RNA均为阴性,未见临床感染患者.不同年龄组抗HEV IgG存在差异,基本上呈现随着年龄的增长,人群抗体水平缓慢上升的趋势.结论 新疆和田地区人群中仍然有HEV感染存在,但是主要表现为亚临床感染.

溶酶体相关4次跨膜蛋白质基因多态性与肝癌易感性的关系

目的：探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白质B（lysosome-associated protein transmembrane 4 beta，LAPTM4B）基因多态性与肝癌易感性的关系．方法：应用病例对照研究方法，收集190例肝癌患者、190例慢性乙型肝炎患者、175例健康献血者全血，分离白细胞，提取基因组DNA，采用特异性引物PCR方法，扩增LAPTM4B第一外显子5′UTR内的部分序列，对三组人群进行分析研究．x^2检验分析肝癌组与对照组LAPTM4B的基因多态性和其他相关因素的相关性．结果：LAPTM4B等位基因在三组观察对象中的分布，^＊1和^＊2在健康对照组的频率分别是75．71％和24．29％，慢肝组73．16％和26、84％，肝癌组中66．84％和33.45％，三组比较等位基因分布频率有统计学意义，健康对照组与肝癌组比较有统计学意义（x^2=6．979，P=0．008）．LAPTM4B的基因型LAPTM4B1^＊1型、LAPTM4B^＊1／2混合型和LAPTM482^＊2型在肝癌组中的频率分别是37.9％、57.9％和4．2％、慢肝组50．5％、45．3％和4．2％、健康对照组56．6％、38.3％和5．1％，三组间三种基因型分布频率比较有统计学意义（x^2=14．854，P〈0．005）.结论：基因型^＊1／2和等位基因^＊2可能与肝癌的发生有关．

巢式PCR检测北京地区乙型肝炎病毒基因型的分布

目的了解北京地区乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV基因型分布情况。方法从前S1基因到S基因中的保守序列设计出10条内外引物,将其中8条内引物分成A、B组,分别扩增A、B、C、D、E、F型HBV,根据PCR产物片断判定HBV基因型。结果用此种方法检测HBV感染的不同转归类型患者血清728份,对HBV DNA阳性标本进行基因型分析。HBV DNA阳性者276例,其中自限性感染者阳性率为5.8%(14/243),慢性无症状HBV携带者血清HBV阳性率为42.6%(113/265),慢性肝炎患者HBV阳性率为67.7%(149/220)。慢性肝炎组HBV DNA检出率与其他2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。在276例HBV DNA阳性标本中,各基因型在不同组分布不同,但差异无统计学意义。HBV基因型总检出率以C型为主,占76.8%,B型占21·7%,同时检出B型和C型为1.5%,未检出A、D、E、F基因型。结论北京地区感染HBV基因型为B型和C型,以C型为主,感染结局不同组间基因型分布比较差异无统计学意义。

散发性急性戊型肝炎患者临床特征分析

戊型肝炎是由戊型肝炎病毒引起的急性肝炎,自1989年美国学者Reyes建立了检测戊型肝炎病毒（HEV）感染的血清学方法以来,HEV感染已被越来越多的认识。

戊型肝炎病人血清抗HEV检测及其消长规律的观察

应用北京医科大学微生物学系研制的抗ＨＥＶ诊断试剂检测１７１例各型肝炎病人及４６例健康人血清，并与新加坡ＤＢＬ公司生产的抗ＨＥＶ诊断试剂进行比较。两种试剂检测的总符合率为９６．６４％。在各型肝炎病人中抗ＨＥＶ的检出率为９４．９２％，健康人中未见阳性反应。对２２例戊型肝炎病人进行一年的追踪观察，阳性检出率仍为６８．１８％，但抗ＨＥＶ效价呈现下降趋势。结果显示了病人感染ＨＥＶ后抗ＨＥＶ出现的较早，维持时间较长，对急性戊型肝炎的诊断有必要观察血清抗ＨＥＶ的动态变化。

北京地区乙型肝炎病毒基因型及基因亚型的分布和临床意义

目的:调查北京地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型及基因亚型的分布情况和临床意义。方法:应用型特异性引物聚合酶链反应法,对北京地区850份HBV感染者血清进行基因型、基因亚型检测,包括慢性乙型肝炎660例,肝硬化85例,肝癌105例。结果:B型、C型、BC混合型分布在不同类型乙肝病毒感染者中分布差异有显著性,肝硬化,肝癌患者C型所占比例明显高于慢性乙型肝炎患者。HBeAg阳性和阴性感染者中,HBV基因型分布差异无显著性。慢性肝炎、肝硬化及肝癌组中,均以C2和Ba亚型占优势。结论:在北京地区HBV感染者中,以Ba和C2亚型为主,C基因型感染者更易于发展为肝硬化、肝癌。

乙型肝炎病毒丹氏颗粒抗原在慢性乙型肝炎病毒检测中应用的研究

目的分析乙肝病毒五项检测方法和乙肝病毒丹氏颗粒抗原检测试剂在检测慢性乙型肝炎感染中的一致性,探讨丹氏颗粒抗原检测试剂在检测慢性乙肝感染的经济性和可靠性。方法ELISA方法检测134例慢性乙肝患者的血清标志物和丹氏颗粒抗原,荧光定量PCR方法检测HBV DNA。比较各组丹氏颗粒抗原水平及HBVDNA定量水平和乙肝五项的相互关系。结果慢性乙肝患者HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组、HBsAg、HBcAb阳性组、HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组和HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性组丹氏颗粒抗原阳性率分别为100.0(、100.0(、94.3(和0。结论丹氏颗粒抗原试剂在检测慢性乙肝感染中与乙肝五项指标及HBV DNA定量之间具有一致性。丹氏颗粒抗原是一个能较好的反应乙肝病毒复制的指标,对乙肝的诊断、预后及抗病毒疗效观察有较好的实用价值。

慢性无症状乙型肝炎病毒携带者的基因型研究

目的:采用多对型特异性引物,通过巢式PCR检测慢性HBV无症状携带者中的HBV基因型分布情况。方法:根据从前S1基因到S基因中的保守序列设计出10条内外引物,并将其中8条内引物分成2组,分别扩增A,B,C和D,E,F型,根据PCR产物大小判定HBV基因型。用此方法检测北京地区HBV慢性无症状HBV携带者血清。结果:265例慢性无症状HBV携带者中,HBVDNA阳性113例,阳性率42.6%。检测到B,C基因型分别为B基因型29例(25.7%),C基因型80例(70.8%),B基因型和C基因型混合感染4例(3.5%)。不同基因型在不同性别构成比例和HBeAg阳性率的差别无统计学意义。结论:北京地区慢性无症状HBV携带者HBVDNA阳性患者中以B,C型为主,C型占优势,存在少量B和C基因型混合感染。

分枝杆菌多糖治疗乙肝疫苗无应答小儿的疗效观察

分枝杆菌多糖治疗乙肝疫苗无应答小儿的疗效观察北京佑安医院倪承瑞，卜秀贞，康沛，李曼芳，郝娃，牛京勤１９８３年以来，我国采用乙型肝炎血源疫苗（以下简称疫苗）阻断ＨＢＶ母婴传播取得较好的效果，但部分小儿对疫苗无应答或低应答。本研究采用分枝杆菌多糖（Ｍｖｃ...

HBsAg阳性产妇血清、乳汁和新生儿血清中乙肝病毒DNA检测结果分析

目的:检测乙肝病毒血清学标志物阳性产妇血清、乳汁及其新生儿脐带血中HBV DNA含量,指导哺乳,减少母婴传播。方法:用荧光定量PCR法检测产妇血清、乳汁和新生儿脐带血中HBV DNA含量。结果:血清高病毒血症组(≥108copies/ml)产妇初乳和新生儿脐血HBV DNA阳性率明显高于其他组。同时与血清HBeAg存在显著相关,血清HBeAg阳性组中产妇自身HBV DNA阳性率明显高于HBeAg阴性组,在初乳和脐血中的HBV DNA也有差异。结论:乙肝病毒宫内感染的发生率与孕妇血清HBV DNA含量相关,孕晚期高病毒血症与宫内感染显著相关;产妇血清高HBV DNA含量,乳汁HBV DNA阳性不适宜母乳喂养,HBeAg阳性者应加强监测,在科学的指导下母乳喂养。

北京地区慢性乙型重型肝炎患者肿瘤坏死因子基因多态性相关性分析

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)基因启动子-238G/A、-308G/A、-857C/T、-863C/A 等位基因多态性和血清 TNF-α水平与慢性重型乙型肝炎的相关性。方法 2002年12月至2005年12月北京佑安医院住院慢性重型乙型肝炎患者98例,慢性乙型肝炎患者211例。采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析方法检测 TNF-α启动子-238G/A、-308G/A、-857C/T、-863C/A 等位基因多态性。结果两组-863C/A、-238G/A 位点的等位基因(x^2=0.61,P=0.436;x^2=0.001,P=0.976),基因型频率比较差异无统计学意义(x^2=1.16,P=0.552;x^2=0.63,P=0.486)。两组比较 TNF-α-308 G/A 和-857C/T 等位基因差异都具有统计学意义(x^2=59.01,P=0.000;x^2=11.59,P=0.000);-308 GA 和-857 TF 基因型频率显著高于慢性乙型肝炎组(x^2=28.06,P=0.000;x^2=19.69,P=0.000),差异有统计学意义。-308 GA 与-857 TY 基因型与慢性重型乙型肝炎有显著性关联 OR=4.176;95%CI2.416-7.216;OR:6.09;95%CI 2.652-14.001。慢性重型乙型肝炎患者血清 TNF-α水平明显高于慢性肝炎患者,两组比较差异有统计学意义(t=3.951,P=0.000)。结论 TNF-α-308 GA 与-857 TF 基因型携带者感染 HBV 后可能增加成为慢性重型乙型肝炎的风险。TNF-α基因启动子区基因多态性与北京地区汉族人群中慢性重型乙型肝炎的发生可能密切相关。

慢性重型乙型肝炎患者白细胞介素-10基因多态性相关性研究

目的 研究白细胞介素-10（IL-10）基因启动子区域-1082、-19和-592位单核苷酸多态性与慢性重型乙型肝炎之间的关系。方法 采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性分析法（PCR-RFLP）和聚合酶链反应．序列特异性引物扩增法（PER-SSP）检测98例慢性重型乙型肝炎患者（CSH）、478例慢性乙型肝炎患者（CHB）、223例慢性HBV携带者（ASC）和267例自限性HBV感染者外周血单个核细胞（PBMC）基因组DNAIL-10基因启动子区域3个位点-1082、-819、-592的基因多态性，并进行统计学分析。结果 IL-10-1082、-819、-592在慢性重型肝炎组与其它组比较差异有统计学意义：（1）-1082基因AA型在CSH中的检出频率显著高于ASC（χ^2=13．314，P=0．001）及自限性感染者（χ^2=13．545，P=0．000）；（2）．592基因AC、cc型在C．SH中的检出频率显著高于CHB（χ^2=15．970，P=0．000,χ^2=20．414，P=0．000）、ASC（χ^2=21．283，P=0．000；χ^2=28．309，P=0．000）及自限性感染者（χ^2=17．047，P：0．000；χ^2=16．528，P=0．000）；（3）．819基因1℃型在C．SH中的检出频率显著高于CHB（f=58．961，P=0．000）、ASC（χ^2=53．255，P=0．001）及自限性感染者（χ^2=39．616，P=0．001），提示-1082基因从型，-592基因AC、CC型及-819基因TC型与慢性重型肝炎的发生有关，说明-1082AA，-592CC、AC及-819TC基因携带者患慢性重型肝炎风险相对较大。结论 IL-10启动子区基因多态性与HBV感染所致肝病的肝损害进展和重型肝炎的发生可能有关。

北京市急性散发性戊型肝炎血清学分析

目的了解北京市散发性戊型肝炎(HEV)的流行病学特征。方法回顾性分析2002年7月-2007年7月首都医科大学附属北京佑安医院就诊的患者17 324例,用酶联免疫吸附试验方法检测血清抗-HEV IgM/IgG的戊型肝炎感染标志物。结果2002-2007年的抗-HEV检测阳性率分别是6.26%,8.83%,11.30%,8.38%,9.36%,各年间比较差异有统计学意义(χ2=56.69,P<0.000);17 324例患者血清抗-HEV共有1 541例阳性(8.94%);抗-HEV阳性患者中男性为1 256例(81.51%),女性285例(18.49%);单纯抗HEV IgM阳性617例(40.04%),单纯抗HEV IgG阳性329例(21.35%),抗-HEV IgM与HEV IgG阳性均为阳性595例(38.61%);戊型肝炎抗体阳性患者中单纯急性戊型肝炎1 067例(69.24%),戊型肝炎病毒重叠感染乙型肝炎患者350例(22.71%),戊型肝炎重叠其他型肝病患者感染124例(8.05%);随着年龄增长抗-HEV阳性率逐渐增加。结论北京市2002-2007年散发性戊型肝炎发病率有波动,并呈明显的年龄特征。

实时荧光逆转录PCR检测戊型肝炎病毒RNA的临床应用

目的探讨实时荧光逆转录（RT）-PCR方法检测急性戊型肝炎患者血清戊型肝炎病毒（HEV）RNA的意义。方法采用实时荧光RT—PCR方法，对HEVORF3基因保守区进行扩增和检测。收集北京佑安医院住院和门诊434例急性戊型肝炎患者血清；甲型肝炎患者40例、乙型肝炎患者100例、健康献血员110名作为对照组；提取HEVRNA进行荧光RT—PCR检测。结果434例急性戊型肝炎患者血清中232例（53．5％）为HEVRNA阳性。对照组血清HEVRNA检测均为阴性。与血清抗-HEVIgM检测比较，434例急性戊型肝炎患者HEVRNA检测的总符合率为67．1％，两种检测方法差异有统计学意义（Kappa=0．308，P=0．000）。5例患者的首份血清检测为HEVRNA阳性，但抗．HEVIgM为阴性，系列追踪检测，相继出现抗-HEVIgM阳性。急性戊型肝炎患者的血清HEVRNA的检出多在发病的2～10d内。结论荧光lit—PCR方法有较高的特异性，应用实时荧光RT—PCR方法能对Ⅰ和Ⅳ戊型肝炎病毒感染的患者血清中的RNA进行定性检测。在临床使用可以提高对HEV早期诊断的水平。

宿主细胞因子及黏病毒抵抗蛋白A基因多态性与干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效的相关性

目的探讨IFN治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者的疗效与TNF-a启动子-238、-857、-863位点,IL-10启动子-1082、-592位点及黏病毒抵抗蛋白A(MxA)启动子-88位点单核苷酸多态性(SNP)的关系。方法305例CHB患者IFNa-1b治疗12个月,随访至停药后6个月判断疗效,分为持续应答(SR)和非持续应答(NSR)组。应用PCR及限制性片段长度多态性方法,检测TNF-a-238、-857、-863和IL-10-592、-1082及MxA-88位点的SNP。判断SNP与IFN疗效的关系。结果本研究失访43例。262例CHB患者IFNa-1b疗效SR为50例,占19.1%;NSR212例,占80.9%。在MxA-88位点,GT型分别与GG型、TT型患者IFN疗效比较,差异均有统计学意义(X^2=20.119,OR:5.302,95%CI:2.458～11.433,P<0.01;X^2=13.071,OR:4.110,95%CI:1.858～9.092,P<0.01)。在TNF-A-863位点,CC型分别与CA型、AA型患者疗效比较,差异均有统计学意义(X^2=29.628,OR:7.578,95%CI:3.444～16.672,P<0.01;X^2=13.543,OR:4.513,95%CI:1.966～10.357,P<0.01)。在TNF-a-857位点,CC与CT型患者疗效比较,差异有统计学意义(X^2=12.927,OR:0.293,95%CI:0.146～0.586,P<0.01)。在IL-10-592位点,AA与CC型患者疗效比较,差异有统计学意义(X^2=8.984,OR:3.380,95%CI:1.484～7.697,P<0.01)。结论MxA-88位点为GT杂合型,TNF-a-863 CC纯合型,IL-10-592 AA纯合型的CHB患者对IFNa-1b治疗反应好,可作为预测IFN疗效的参考指标之一。