枸杞多糖对肝纤维化大鼠的免疫调节作用

目的探讨枸杞多糖(LBP)对大鼠肝纤维化的免疫调节作用。方法健康的Wistar大鼠18只,5-6月龄,体重200g-280g,本研究采用四氯化碳(CCl4)腹腔注射的方法制备大鼠肝纤维化模型。实验采用随机分组,分为对照组、模型组和治疗组各6只。治疗组:大鼠经LBP灌胃治疗,以30μg/g体质量灌胃LBP,每天1次,共15天;模型组和对照组:大鼠给予等剂量的生理盐水灌胃,每天1次,共15天。检测各组大鼠外周血中IL-1、IL-6、IL-10、TNF-a等细胞因子水平的变化;用比色法测定各组肝组织中的羟铺氨酸的含量。结果治疗组大鼠外周血中IL-1、IL-6、IL-10、TNF-a等细胞因子水平、肝组织中的羟铺氨酸的含量与模型组相比其差异有统计学意义(P<0.05)。结论LBP可调节肝纤维化进程微环境从而延缓肝脏纤维化进程。

枸杞多糖对肝纤维化组织MMP-9和TIMP-1含量的影响

目的分析枸杞多糖(LBP)对小鼠肝纤维化组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制剂-1(TIMP-1)含量的影响,探讨LBP对肝纤维化的作用机制。方法胆总管结扎方法制造肝组织纤维化损伤小鼠,将12只小鼠按照随机数字法分组为肝纤维化组和LBP组,同时选取6只正常小鼠作为正常组。LBP组:肝组织纤维化小鼠每天经口服用LBP 25μg/g;正常组及肝纤维化组:经口服用等体质量的生理盐水,3组同时连续服用3周。取出各组的肝组织,分别经苏木精-伊红染色、天狼猩红染料染色后,观察其结构改变情况以及肝组织中胶原纤维的含量;蛋白印迹技术评估肝组织中MMP-9和TIMP-1的含量。结果肝纤维化组的肝组织结构紊乱,其内有程度不同的坏死组织,红色的胶原纤维面积和汇管区域小叶间胆管数量比正常组增多,肝组织内MMP-9的含量(0.044±0.011)比正常组增加,但是两组相比差异无统计学意义(P>0.05),TIMP-1的含量(0.712±0.038)比正常组增加(P<0.05),MMP-9/TIMP-1的值(0.051±0.011)比正常组减少(P<0.05)。LBP组肝组织的坏死程度减轻,红色的胶原纤维面积和汇管区域小叶间胆管数量比肝纤维化组减少,肝组织内MMP-9的含量(0.070±0.009)比肝纤维化组增多(P<0.05),TIMP-1的含量(0.445±0.027)比肝纤维化组减少(P<0.05),MMP-9/TIMP-1的值(0.163±0.025)比肝纤维化组增加(P<0.05)。结论LBP能同时调节肝纤维化组织中MMP-9和TIMP-1的含量,使MMP-9/TIMP-1的值增加来有效阻止肝组织纤维化的进展,达到保护肝组织的目的。

枸杞多糖抑制小鼠肝纤维化组织中α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白的表达

目的探讨枸杞多糖(LBP)对小鼠胆总管结扎术后引起的肝纤维化组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)表达的影响。方法选取体重为(0.32±0.28)kg的健康、雄性小鼠30只,采用完全随机方法分成对照组、模型组及LBP干预组,每组10只。模型组:小鼠通过结扎胆总管后诱导肝纤维化损伤。LBP干预组:小鼠在结扎胆总管后第21天口服LBP 30μg/g,每天1次,共用15天。对照组:小鼠暴露腹腔、分离、置线,不对胆总管做其他操作,闭合腹腔后第21天口服等剂量的0.90%生理盐水,每天1次,共用15天。制备3组的肝组织标本,采用苏木素-伊红染色法、天狼猩红染色法分析其肝脏组织的病理学变化;免疫印迹法测定3组肝组织中α-SMA和ColⅠ的含量。结果模型组小鼠肝小叶结构被破坏,肝组织有面积不等的坏死,汇管区发现胆总管数量增加和纤维组织增生,表明采用胆总管结扎术可以成功地诱导肝纤维化损伤,肝组织中α-SMA和ColⅠ的含量(0.877±0.015,1.102±0.063)增加,与对照组(0.286±0.005,0.765±0.017)比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。LBP干预组小鼠肝组织坏死减少、胆总管数目减少和纤维组织增生减轻,肝组织中α-SMA和ColⅠ的含量(0.302±0.011,0.456±0.010)减少,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LBP可抑制肝纤维化组织中α-SMA和ColⅠ的表达,因此可作为临床上预防和治疗肝纤维化的一种新型药物。