福田区育龄夫妇生育健康知识调查

为在本区实施“出生缺陷干预工程”，2004年8月到2006年4月，对深圳市福田区内户籍育龄夫妇进行了生育健康知识、态度和行为的问卷调查，了解现状与需求，为工程的全面实施服务。

深圳市宝安区出生缺陷社区干预效果的调查评估

目的:通过对育龄妇女进行KAP调查,评价已开展的出生缺陷社区干预效果,探讨适合社区推广的预防出生缺陷综合干预模式和干预手段。方法:利用定量调查的方法,对深圳市宝安区552名已婚未育妇女的出生缺陷知识、态度、行为调查资料进行分析,并与基线调查数据进行比较。结果:干预后,育龄妇女对导致出生缺陷的危险因素单项知晓率较基线提高了14.3%-43.5%,知道3种以上的致畸因素的百分比提高了44.8%;出生缺陷相关知识的获取途径主要为通过医生或计生干部宣传教育和阅读相关书籍,所占比例分别为61.6%和21.6%;83.3%的妇女听说过产前筛查项目,其中98.7%愿意在孕期参加有偿的产前筛查;产前筛查在妊娠妇女中的知晓率达到了97.7%,其中77.8%的妊娠妇女参加了筛查。结论:通过社区干预,育龄妇女在预防出生缺陷的知识、态度、行为三方面比干预前有明显提高,证明在计划生育三级技术服务网络的基础上开展的出生缺陷社区健康促进的新模式是一种可行的预防出生缺陷的社区综合干预方案。

巨细胞病毒IgG特异性抗体亲和指数测定方法的研究

目的:建立一种快速、简便的检测巨细胞病毒IgG抗体(CMV-IgG)亲和指数(AI)的方法,区分CMV原发与非原发感染。方法:对检测方法的各个环节进行了比较研究,确定最佳检测方法并对218份标本(187例既往感染,13例继发或再感染,10例可疑原发感染和8例原发感染)进行检测,比较了两种结果表示方法。结果:当用U/ml和OD值表示结果时,其敏感性、特异性和方法可用度分别为75%、91.4%、67.2%、62.5%、95.7%、61.7%。结论:用35mM二乙胺简便的洗脱法,以标准曲线定量标本中CMV-IgG含量并计算AI的方法适用于CMV-IgGAI的测定。

292例女性泌尿生殖道支原体、衣原体感染监测及耐药敏分析

目的监测沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)感染发生率,分析其对抗菌药物的敏感及耐药性,用以指导临床治疗。方法CT采用Unipath有限公司生产的沙眼衣原体检测试剂盒(免疫层析法),UU采用珠海市银科生物技术应用研究所生产的支原体分离鉴别培养和药敏试剂盒。结果292例泌尿生殖道感染患者宫颈分泌物样本中检出CT37例,阳性率为12.7%;UU171例,阳性率为58.6%。其中19例患者为UU+CT混合感染。大环内酯类除罗红霉素外均有较高的敏感性,而喹诺酮类除司帕沙星(敏感性为55.0%)外均表现出较高的耐药性。结论支原体对抗菌素的耐药性,尤其是多重耐药性增加。临床医师在该类疾病治疗中,应尽量参照药敏试验,选用敏感的抗菌药物,进行正规治疗。

间接酶联免疫定量检测风疹IgG的方法学研究

目的 建立检测血清风疹 Ig G ( RV - Ig G)抗体的间接酶联免疫测定 ( enzymelinkedim munosorbent assay,EL ISA)方法。 方法 采用 RV - GOS株感染单层 Vero细胞方法制备 RV抗原 ,并采用血凝素方法提纯抗原 ,建立定量间接 EL ISA方法 ,进行了实验条件的选择。然后用优化的 EL ISA法对检测 RV- Ig G的敏感性、特异性和重复性进行鉴定 ,并与美国食品与药品监督局认证的 EL ISA方法进行比较。 结果 间接定量 EL ISA方法的敏感度为 3IU / m l,以 Diasorin公司生产的 RV - Ig G试剂盒检测结果为标准 ,其敏感性、特异性和准确性分别为 97.79% ( 2 2 1/ 2 2 6 )、95 .4 5 %( 4 2 / 4 4 )、 97.4 1% ( 2 6 3/ 2 70 ) ;2种方法相关系数为 0 .92 ,P<0 .0 5 ,呈显著相关 ; 结论 该 EL ISA方法敏感性高、特异性强 ,且简便、快速 ,重复性好 。

区分孕期巨细胞病毒原发与非原发感染的ELISA方法的研究

目的:根据机体对巨细胞病毒重组抗原pp52和pp150不同的IgG免疫反应,建立一种快速、简便和适用的ELISA方法,用于区分孕妇巨细胞病毒近期原发与非原发感染。方法:应用间接ELISA方法测定巨细胞病毒两种重组抗原pp52和pp150 IgG,计算pp52 OD与pp150 OD的比值(pp52 OD/pp150 OD)。结果:共检测858份血清,其中812例为既往感染,46例为活动性感染(15例为原发感染、31例为继发或再感染)。当以pp52 OD/pp150 OD比值>1.5作为原发感染标准时,4组的阳性率分别为1.5%、32.6%、66.7%和16.1%,各组间差异有统计学意义(P<0.05),方法的敏感性和特异性分别为66.7%和98%。结论:本研究建立的测定巨细胞病毒重组蛋白pp52 OD/pp150 OD的酶联免疫吸附方法是辅助区分巨细胞病毒原发与非原发感染的较好的血清学方法,有待扩大样本量进一步证实。

巨细胞病毒原发感染与非原发感染的鉴别诊断方法

目的建立一种快速、简便和实用的测定巨细胞病毒IgG抗体亲和指数的方法,作为有效的诊断工具,用于区分孕妇巨细胞病毒近期原发与非原发感染(继发、再感染及持续感染)。方法用标准的间接ELISA技术测定巨细胞病毒IgG抗体亲和指数(CMV-IgGAI),以35mmol/L浓度的二乙胺(温和蛋白变性剂)作为洗脱液。结果通过比较4种温和蛋白变性剂对检测方法各个环节的影响,确定了检测方法的最佳工艺流程;对127份血清标本进行了检测,其中84例为既往感染标本、17例继发感染标本、15例可疑原发感染和11例原发感染标本,以CMV-IgGAI<40.0%作为诊断CMV原发感染的临界值,其方法的灵敏度为72.7%,特异性为98.8%,方法的可用度为73.5%。结论用35.0mmol/L浓度的二乙胺洗脱1次,10min的方法适用于CMV-IgGAI的测定,目前认为该测定联合CMV-IgM检测是区分原发与非原发CMV感染的最佳血清学方法之一。

巨细胞病毒特异性抗体IgG检测方法的建立

目的:建立一种以0.4U/ml为临界值的巨细胞病毒(CMV)特异性抗体IgG的检测方法。方法:用美国食品与药品监督局(FDA)认证的标准品标定临界值标准,以常规间接酶联免疫测定方法(ELISA)进行检测,对检测方法的各个环节进行比较研究,确定检测方法的最佳工艺流程;对179份育龄妇女血清进行检测,并经过FDA认证的ELISA方法为金标准与之进行比较。结果:灵敏度、特异性和准确性分别为100%(160/160)、94.7%(18/19)、99.4%(178/179);批内、批间变异系数分别为6.3%～10.5%,9.3%～14.8%,基本符合ELISA方法的标准(10%～15%)。结论:本研究建立的CMV—IgG检测方法灵敏度高、特异性好、重复性好,可用于育龄妇女CMV—IgG水平的检测。

测定巨细胞病毒特异性抗体亲和指数的诊断价值

目的以快速、简便的人巨细胞病毒特异性抗体亲和指数(CMV-IgG AI)检测方法作为有效的诊断工具,用于区分孕妇CMV原发感染与非原发感染。方法以标准的间接ELISA方法,8.0 mol/L尿素作为温和蛋白变性剂,用标准曲线方法定量测定标本中的CMV-IgG含量。结果共检测218例标本,其中187例为CMV既往感染标本,31例为继发或再感染、可疑原发感染和原发感染标本。以抗体亲和指数<35.0%作为阳性判断标准,此时方法的灵敏度为75.0%,特异度为91.4%,可用度为67.2%。既往感染、继发或再感染、可疑原发感染、原发感染4组的平均AI值分别是(61.42±25.69)%,(70.38±21.88)%,(66.73±23.62)%,(29.78±25.93)%,原发感染组与其它3组非原发感染比较,差异有统计学意义(P<0.01))。结论以8.0 mol/L尿素作为温和蛋白变性剂,用标准曲线方法定量测定标本中CMV-IgG含量适用于检测巨细胞病毒IgG抗体亲和指数(CMV-IgG AI),认为CMV-IgM联合CMV-IgG AI检测是区分原发与非原发感染的血清学方法之一。

血清T_4固相酶联免疫法测定方法的建立

目的 以T4 (3,5 ,3’ ,5’ -四碘 -L -甲状腺素 )测定为模式 ,研究建立血清激素固相试管酶免测定方法。方法 将抗T4 抗体包被到固相试管壁 ,血清中的T4 和T4 标记物竞争结合固相抗体 ,标本的浓度通过内插法从标准曲线上求得 ,并和磁酶免测定法平行对比测定。结果 该种方法和磁酶免测定法进行对比实验并作了直线回归分析 ,提示两种方法高度相关 ,r=0 .92 1,直线回归方程为 :Y =0 .46 8+0 .86 4X。配对样本t检验双侧P >0 .0 5 ,提示两种检测方法无显著性差异。结论 以T4 测定为模式 ,研究建立的固相试管酶免测定方法简便、准确 ,具有较高的灵敏性和稳定性。

密度梯度离心法富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞的方法学

目的 探讨密度梯度离心法 (density gradient centrifugation,DGC)富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞的可行性及其在产前基因诊断中的价值。 方法 采用密度梯度离心法富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞 ,以流式细胞分析鉴定富集细胞 ,同时对富集前后孕妇外周血 DNA进行男性性别决定基因 (sex-determining region Y,SRY)检测。 结果 5例孕妇外周血单个核细胞靶细胞群糖蛋白 A (glycophorin A,GPA)阳性细胞富集前平均含量为 0 .0 2‰～ 0 .1‰ ,而富集后平均含量高达 0 .5%～ 2 .8% ;2 4例孕 10～ 40周孕妇 (包括以上 5例 )中 ,孕妇外周血 DNA富集前 SRY基因男性诊断符合率 69.2 % (9/ 13 ) ,诊断总符合率 83 .3 % (2 0 / 2 4) ,而富集后分别为 84.6%(11/ 13 ) ,91.6% (2 2 / 2 4) ,11例怀女胎的孕妇富集前、后均未检出 SRY基因。 结论 密度梯度离心法可从孕妇外周血中富集胎儿细胞 ,且所得细胞已基本满足体外扩增单拷贝基因所需的模板量 。

深圳市宝安区育龄妇女风疹病毒免疫力状况调查

目的:通过对育龄妇女风疹抗体水平的调查,了解育龄妇女对风疹病毒免疫力状况,为科学接种疫苗提供理论根据。方法:采用定量间接ELISA方法对深圳市宝安区20～40岁1291例育龄妇女进行风疹病毒免疫力检测。结果:深圳市宝安区育龄妇女风疹病毒无保护力人群占到15.88％,明显高于80年代的调查结果;另外,20～29岁年龄组、30～40岁年龄组风疹病毒无保护力人群分别为19.4％,13.5％,两组比较统计学有显著差异(P<0.05)。结论:约有1/5生育活跃期育龄妇女对风疹病毒无保护力,孕前应加强风疹疫苗注射,以减少先天性风疹综合征的发生。

纸血片AFP及Β-HCG检测用于唐氏综合征的产前筛查

目的检测纸血片中AFP及Β-HCG,探讨该方法用于唐氏综合征产前筛查的可行性。方法采用标准双抗体夹心ELISA方法检测AFP及Β-HCG,对164例不同孕周孕妇纸血片及血清标本同时进行对比试验。结果血清与纸血片2种方法的相关系数>0．92,呈高度相关。根据2种方法检测结果,通过优普生软件计算各标本的危险系数,以<1／500为需进一步进行相应检查的高危人群,2种方法检测均为高危人群者14例,均为非高危人群145例,2种方法一致总例数为98．9％(159／161),其中2例不符,均在临界值附近。血片稳定性好,在4℃贮存3个月后检测AFP和HCG,其回收率分别为100．4％和94．2％,批内变异系数(CV)<10％,批间VC <15％。结论测定纸血片中AFP及Β-HCG与用血清进行检测结果一致性高,都可用于唐氏综合征产前筛查。

眼皮肤白化病Ⅰ型的基因诊断及产前诊断的意义

目的:对眼皮肤白化病患者及双亲的相关基因进行突变筛查,探讨其在产前诊断中的意义。方法:提取先证者及其父母外周血和孕妇羊水细胞DNA,应用PCR和DNA序列测定法进行TYR基因突变筛查和产前诊断。结果:4例先证者获得明确分型诊断,产前诊断结果2例胎儿为携带者,2例胎儿为患儿。结论:在先证者分型基因诊断的基础上,开展眼皮肤白化病产前基因诊断是可行的,具有积极的优生意义。

套式聚合酶链反应技术检测孕妇外周血中胎儿细胞

目的 探讨利用孕妇外周血中胎儿细胞进行产前诊断的可行性。 方法 采用套式聚合酶链反应 (polymerase chain reaction,PCR)技术扩增孕妇外周血中男性胎儿性别决定基因 (sex-determ ining region Y,SRY) ,并与胎儿实际性别相对照。 结果 74例孕 7～ 4 0周的孕妇中 38例怀男胎 ,其中 2 3例扩增出 Y特异带 ;另外 36例怀女胎孕妇中 ,仅 1例出现 Y特异带。SRY套式 PCR扩增系统在孕中期 ,孕晚期检查孕妇外周血中男胎灵敏度 (72 .7%、 71.4 % )、特异度 (10 0 .0 % )和符合率 (87.0 %、 90 .5 % )高 ,误诊率为 0 ,而在孕早期灵敏度 (5 0 .0 % )、特异度 (90 .0 % )及符合率 (6 3.3% )较低 ,误诊率 (10 .0 % )、漏诊率 (5 0 .0 % )较高。 结论 胎儿细胞在孕早期即存在于孕妇外周血中 ,但直接利用孕妇外周血中胎儿细胞检查

妊娠期与非妊娠期妇女碘营养状况尿碘分析

目的:了解本地妊娠与非妊娠期妇女机体内微量元素碘的代谢水平,为有效预防因缺碘所致的新生儿出生缺陷疾病提供参考。方法:采用过氧乙酸氧化四甲基联苯胺显色法,动态测定妊娠期与非妊娠期妇女尿液中碘的含量。结果:检测妊娠期妇女211例,尿碘中位数128.16ug/L,非妊娠期妇女71例,尿碘中位数167.59ug/L;妊娠期妇女尿碘中位数低于非妊娠期妇女(x2=10.15,P<0.005)差异有统计学意义;211名妊娠期妇女中尿碘水平<99ug/L81例(38.39%),71名非妊娠期妇女28例(25.35%),妊娠期与非妊娠期两组人群缺碘率差异具有统计学意义(x2=18.19,P<0.005)。结论:本地人群缺碘率相对较高,对妊娠期合理补碘及进行动态尿碘监测对预防新生儿出生缺陷很有必要。

深圳市育龄妇女细菌性阴道病的流行病调查及分析

目的 调查深圳市各类育龄妇女细菌性阴道病 (BacterialVaginosisBV)的流行情况。方法 对深圳市三种不同类型的育龄妇女共 4 74 4名进行了妇科检查和包括细菌性阴道病在内的常见阴道分泌物实验室检查 ,比较分析其在各类育龄妇女中流行患病情况。结果 细菌性阴道病在一般人群中患病率为 1 1 7% ,门诊病人患病率为 1 5 2 % ,高危人群患病率为 1 9 5 % ,合计患病率为 1 2 7%。结论 深圳市育龄妇女各种阴道感染中 ,细菌性阴道病发病率居首位 ,在一般育龄妇女人群中居第二位。

人乳头瘤病毒宫内感染的分子生物学研究

目的:通过对正常孕妇及胎儿HPV感染状况的研究,分析HPV宫内感染可能存在的途径。方法:以GP5+/6+为引物的通用引物PCR(GP-PCR),被证明是一种敏感性较高的人乳头瘤病毒检测方法〖16、18、19〗。本研究在此方法的基础上,利用生物素标记的引物(bio-GPbt),进行GP-PCR,并用因此而产生的生物素标记的PCR产物与特异性内寡核苷酸探针(SIOP)进行反向点杂交(RDBH),从而达到检测HPV感染并对其分型的目的。结果:1.在总计119份样品中,母血、胎儿脐带血、羊水、宫颈分泌物、胎盘组织母体面的HPV感染率分别为37.0%(10/27)、37.0%(10/27)、61.11%(11/18)、50.0%(10/20)、40.7%(11/27),说明妊娠末期孕妇有较高的感染率;2.对取自同一标本的5种样品(母血、胎儿脐带血、羊水、宫颈分泌物、胎盘组织母体面)进行检测,由于5种样品之间的感染率无显著性差别(P>0.1),结合观察到的实际结果,推测HPV有通过宫内感染途径感染胎儿的可能性;3.本研究还发现,在52份HPV阳性的样品中,有12份(23.1%)为多重HPV感染。另外,52份HPV阳性的样品(100%)均发现HPV11型,推测妊娠末期的孕妇主要以HPV11型感染为主。

巨细胞病毒特异性IgG抗体检测方法的建立及应用

目的为了建立一种快速、简便、实用的可用于育龄妇女血清中巨细胞病毒(CMV)-IgG抗体的筛查方法,并初步探索其应用价值。方法建立重组CMV(pp150+52)抗原;以国家人口和计划生育委员会科学技术研究所(简称本所)建立的重组CMV(pp150+52)抗原作为包被抗原,700IU/L作为临界值,用间接ELISA方法,对深圳宝安区1024例血清标本进行CMV-IgG抗体的检测。结果该方法灵敏度为13IU/L,批内变异系数4.7%～7.0%,批间变异系数7.6%～14.4%,并与SORIN公司生产的试剂盒进行了比较,2种方法呈最度相关,Kappa值为0.82;深圳宝安区1024例血清标本CMV-IgG抗体阳性率为93.3%(955/1024),阴性率为6.7%(69/1024)。结论本所建立的ELISA方法快速、简便和实用,可用于育龄妇女CMV-IgG抗体的筛查。

不同育龄妇女人群细菌性阴道病调查及临床分析

目的: 调查细菌性阴道病(BV) 在不同育龄妇女人群的流行情况, 并分析其临床特征。方法: 对深圳市三种不同类型的育龄妇女共4 744名进行包括细菌性阴道病在内的阴道分泌物实验室检查、妇科检查及问卷调查。结果: 细菌性阴道病在一般人群中患病率为11. 72%, 门诊病人患病率为15 .19%, 高危人群患病率为19. 52%, 合计患病率为12 .73%。研究发现深圳市育龄妇女细菌性阴道病患病率与年龄大小呈负相关, 主要症状、体征表现为分泌物增多( 35 .43% )、糊状分泌物(34 .36% ) 等。结论: 深圳市三类人群育龄妇女细菌性阴道病合计患病率居各种阴道感染首位, 当地育龄妇女年龄越小, 患病率越高。建议各级计生服务机构在进行宫腔操作时应进行细菌性阴道病的常规检查并做治疗。