绵羊日粮中添加亚硒酸钠对胎盘中SelP和ApoER-2蛋白表达的影响

试验通过在妊娠母羊日粮中添加不同水平的亚硒酸钠,研究硒对绵羊胎盘SelP和ApoER-2的蛋白表达的影响,为进一步揭示硒的胎盘转运及硒对胎儿发育的调控机制提供实验依据。选取体重、体型、年龄、胎次相近的湖羊妊娠母羊80只,随机分为两组,分别饲喂基础日粮和添加0.5 mg/(kg DM·d)亚硒酸钠的日粮。预试期7 d,正试期150 d。结果表明:SelP和ApoER-2主要在妊娠母羊胎盘滋养层细胞中表达。日粮中亚硒酸钠的添加,极显著提高了妊娠母羊胎盘滋养层细胞中SelP的表达量(P<0.01),却极显著降低了ApoER-2蛋白的表达量(P<0.01)。

不同饲喂水平对绵羊睾丸发育、睾酮合成相关基因及雄激素受体(AR)表达的影响

旨在研究不同饲喂水平对绵羊睾丸发育、睾酮(T)合成相关基因与雄激素受体(androgen receptor,AR)表达的影响。本研究采用单因素完全随机试验设计,将18只健康、体重相近((35±0.5)kg)的杜泊羊(♂)×晋中绵羊(♀)杂F1代4月龄公羔随机分为3组,每组6只,分别按照自由采食(AL组)、自由采食量的65%(AL65组)和自由采食量的40%(AL40组)3个水平进行饲喂。当AL组任意1只羔羊体重达到50 kg时全部屠宰,测定睾丸的周径与长度后采集睾丸组织,通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H-E)染色观察曲精细管生精上皮结构;酶联免疫(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法测定睾酮(testosterone,T)的水平;用定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测T合成相关基因和AR mRNA的表达情况;通过免疫组化和Western blotting的方法对绵羊睾丸组织中的AR进行定位与定量分析。结果表明,AL40组羔羊睾丸周径和长度显著低于AL组(P<0.05),但与AL65组差异不显著(P>0.05);AL40组曲精细管生精上皮厚度与AL65组差异不显著(P>0.05),但均显著低于AL组(P<0.05)。随着饲喂水平的提高,生精细胞和间质细胞密度显著增加(P<0.05),T水平和STAR、3β-HSD基因以及AR mRNA和蛋白表达量均显著提高(P<0.05);睾丸间质细胞、初级精母细胞、精子细胞、管壁肌样细胞层和间质血管平滑肌细胞中均观察到AR阳性产物。综上所述,绵羊的睾丸发育、T含量、T合成相关基因和AR的表达均受到日粮营养水平的调控。日粮营养水平可能通过改变T水平和生精细胞对T的敏感性来调控精子发生过程,从而影响其性成熟和繁殖性能。

蜂王浆对低温保存绵羊精子质量和糖转运蛋白GLUTs表达的影响

实验旨在研究稀释液中添加蜂王浆对低温保存绵羊精子质量和糖转运蛋白丰度的影响。通过假阴道法采集8只杜泊公羊精液,将活率不低于0.8的精液混合,分别用含0.00%、0.25%、0.50%、0.75%和1.00%蜂王浆的稀释液将精液稀释至8倍,0.00%蜂王浆组为对照组,置于5℃保存。在保存0、24、48、72 h利用计算机辅助精子分析系统、低渗膨胀实验、双荧光探针和Western Blot分别检测精子运动参数、质膜完整性、线粒体活性以及糖转运蛋白GLUT 3和GLUT 8丰度。结果表明:在低温保存72 h时,0.75%蜂王浆组精子的活率、活力、直线运动速率、路径速度、曲线运动速率、质膜完整性和线粒体活性均显著高于对照组。Western Blot结果显示精子GLUT 3和GLUT 8丰度均随保存时间延长而降低,保存72 h时GLUT 8的丰度显著低于0 h;保存72 h时0.75%蜂王浆组GLUT 3和GLUT 8丰度显著高于对照组。综上,在稀释液中添加0.75%的蜂王浆可有效提高低温保存绵羊精子的质量,这与精子GLUTs蛋白表达和精子能量代谢密切相关。

两株禽绿脓杆菌的分离鉴定与致病性研究

[目的]从临汾、平遥等地养殖场采集发病鸡病料,对禽绿脓杆菌进行分离鉴定,及耐药分析和致病性研究。[方法]通过分离培养,形态特征观察,生化试验,16S rDNA基因PCR扩增与测序分析,药敏试验及动物致病性试验,以鉴定禽绿脓杆菌。[结果]经鉴定共分离2株禽绿脓杆菌,分离菌株G1株和G2株接种雏鸡在24 h内死亡率可达到100%,将分离株的16S rDNA基因序列与NCBI中绿脓杆菌序列进行Blast比对,分离菌株与绿脓杆菌不同菌株的同源性高达99%以上,分离菌株对环丙沙星、恩诺沙星、亚胺培南、哌拉西林和替卡西林等抗生素敏感。[结论]本研究通过对山西地区禽绿脓杆菌分离株的鉴定,旨在为进一步研究其致病机制、临床用药和治疗提供理论依据。

日粮中添加亚硒酸钠对绵羊精液品质、线粒体活性和葡萄糖转运蛋白的影响

试验旨在研究日粮中添加适宜浓度的硒对绵羊精液品质、线粒体活性以及葡萄糖转运蛋白(Glucose transporters,GLUTs)表达的影响。试验选用24只体况良好、体重相近的杜泊公羊,随机分成2组,分别饲喂基础日粮(对照组)与含硒日粮(基础日粮+0.5 mg/kg亚硒酸钠)。试验期90 d,结束前一周采集精液样品,分别评价精子活力与运动参数、质膜完整性以及线粒体活性,用Western Blot和免疫荧光方法检测GLUT3和GLUT8蛋白的丰度和定位。结果发现,与对照组相比,日粮中添加硒显著提高了绵羊精子的活力和运动速度(P<0.05),保护了精子质膜完整性和线粒体活性(P<0.05),并显著提高了GLUT3、GLUT8蛋白的表达量(P<0.05)。日粮中添加硒能提高绵羊精子的精子活力、运动速度和线粒体活性,并影响葡萄糖转运蛋白GLUT3和GLUT8的丰度,表明硒可能通过影响精子的能量代谢改善精液品质。

晋中地区鸡致病性大肠杆菌分离株的鉴定及其16S rDNA序列的同源性分析

为了鉴定晋中地区鸡致病性大肠杆菌,利用传统细菌鉴定方法及16S rDNA序列分析,对分离自晋中地区养殖场送检的30只病死鸡肝中的疑似大肠杆菌菌株进行鉴定及遗传进化分析。结果表明:分离出8株致病性不同的大肠杆菌;鉴定出O78、O2、O11共3种血清型;8株菌均为多药耐药菌,其中对5种及5种以上抗菌药物耐药的菌株达到总分离菌株的87.5%;将8株菌株的16S rDNA基因序列与GenBank中登录的大肠杆菌参考株的16S rDNA基因序列进行比对,同源率均达到99%。经MEGA6.0软件分析后,其位于不同的分支上。本研究结果为进一步研究致病性大肠杆菌的耐药性和对晋中地区大肠杆菌病的有效防治奠定了一定基础。