中药抗胃溃疡质量标志物的研究进展

通过查阅文献资料,对中药抗胃溃疡质量标志物的研究进行梳理总结,基于中药质量标志物(Q-marker)的核心概念,从传统药性、功效、入血成分、化学成分可测性、不同配伍中表达成分、肠道菌群和网络药理学的路径,对此类中药的质量标志物进行预测,初步确定了抗胃溃疡中药质量标志物的备选化合物,可为中医药治疗胃溃疡提供参考。

3味山姜属中药黄酮类成分对大鼠环核苷酸水平及交感神经-肾上腺轴的影响

目的:观察高良姜、大高良姜、红豆蔻黄酮类成分对胃溃疡寒证大鼠环核苷酸水平及交感神经-肾上腺轴的影响,探讨3味山姜属中药温热药性的物质基础。方法:采用灌服冰知母水煎液与15%冰乙酸制备大鼠胃溃疡寒证模型,以干姜姜辣素为阳性对照,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定腺苷酸环化酶(AC)、磷酸二酯酶2(PDE2)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、多巴胺β羟化酶(D-β-H)含量。结果:与空白组比较,胃溃疡寒证模型组大鼠胃组织AC、cAMP含量及cAMP/cGMP比值显著降低,PDE2含量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,高良姜、大高良姜、红豆蔻高低剂量组大鼠胃组织AC含量升高;高良姜、大高良姜、红豆蔻高低剂量组大鼠胃组织PDE2含量显著降低,cAMP含量、cAMP/cGMP比值显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论:3味山姜属中药黄酮类成分通过调节胃溃疡寒证大鼠环核苷酸水平从而促进交感神经-肾上腺轴功能活动的作用,也体现出黄酮类成分药性温热。

大高良姜、红豆蔻乙酸乙酯部位多组分含量测定

目的:以同基原不同药用部位的中药大高良姜与红豆蔻为研究对象,建立多组分含量测定方法。方法:以不同产地的大高良姜、红豆蔻乙酸乙酯部位为样品,运用高效液相色谱(HPLC)法进行测定。采用Inertsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈(A)-0.05%冰乙酸水溶液系统(B),流速0.8 mL·min-1;柱温30℃;检测波长:270 nm;进样量:10μL。对方法进行专属性、标准曲线的建立、精密度、稳定性、重复性、加样回收考察。对其指认的共有成分进行含量测定。结果:测定方法稳定可靠,空白溶剂无干扰以及混合对照品溶液专属性高,仪器精密度和方法重复性良好,加样回收率达到含量测定要求。测得10个不同产地的大高良姜乙酸乙酯部位指认的多组分原儿茶酸、原儿茶醛、对羟基苯甲酸、香草酸、芦丁、对羟基苯甲醛含量分别为0.4698~1.3998 mg·g^(-1)、0.1287~0.2953 mg·g^(-1)、0.6280~1.8224 mg·g^(-1)、0.5825~1.1339 mg·g^(-1)、0.9641~2.0190 mg·g^(-1)、3.9424~7.9024 mg·g^(-1);红豆蔻乙酸乙酯部位指认的多组分原儿茶酸、原儿茶醛、对羟基苯甲酸、香草酸、芦丁、对羟基苯甲醛含量分别为0.8376~2.0446 mg·g^(-1)、0.3054~0.5845 mg·g^(-1)、0.9259~1.6094 mg·g^(-1)、0.3474~0.6445 mg·g^(-1)、4.8377~26.7308 mg·g^(-1)、2.6081~3.9132 mg·g^(-1)。结论:建立了HPLC同时检测大高良姜、红豆蔻乙酸乙酯部位中原儿茶酸、原儿茶醛、对羟基苯甲酸、香草酸、芦丁、对羟基苯甲醛等6个组分含量的测定方法,该方法准确、可靠。

复方香鱼口服液的解热作用研究

目的研究复方香鱼口服液及其处方药味对大鼠发热模型的解热作用。方法采用背部皮下注射干酵母法建立SD大鼠发热模型,将模型大鼠随机分为模型组、阿司匹林组、复方香鱼口服液高低剂量组、鱼腥草高低剂量组、三叶香茶菜高低剂量组,给药后6 h测量各组大鼠的肛温,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆中前列腺素E_(2)(PGE_(2))、环磷酸腺苷(cAMP)及下丘脑中cAMP水平;采用腹腔注射脂多糖(LPS)法建立SD大鼠发热模型,分组同干酵母致热实验,给药后4 h测量各组大鼠的肛温,ELISA法检测血浆cAMP及下丘脑中PGE2水平。结果干酵母致大鼠发热模型:与模型组相比,各给药组大鼠体温均明显下降,且复方鱼香口服液的解热作用优于单味药;复方香鱼口服液高低剂量组、鱼腥草高剂量组、三叶香茶菜高剂量组大鼠血浆及下丘脑cAMP水平显著降低;复方香鱼口服液高剂量组大鼠血浆PGE2水平显著降低。LPS致大鼠发热模型:与模型组相比,复方香鱼口服液高低剂量组、鱼腥草高剂量组、三叶香茶菜高低剂量组大鼠体温均明显下降;复方香鱼口服液高低剂量组、鱼腥草高剂量组、三叶香茶菜高低剂量组血浆cAMP水平显著降低;复方香鱼口服液高低剂量组、鱼腥草高低剂量组、三叶香茶菜高剂量组下丘脑PGE2水平显著降低。结论复方香鱼口服液具有明显的解热作用,且作用强于单味药,其解热作用可能与抑制cAMP、PGE2的合成与分泌,从而截断体温调节点上移有关。

3味山姜属中药挥发油对胃溃疡寒证大鼠的药效机制研究

目的研究高良姜、红豆蔻、大高良姜3味山姜属中药挥发油对胃溃疡寒证大鼠的药效作用及其机制。方法通过灌胃冰知母溶液和15%乙酸建立大鼠胃溃疡寒证模型。空白对照组和模型组给予0.5%的吐温-80水溶液,阳性组给予干姜姜辣素溶液,受试药为高良姜、红豆蔻、大高良姜挥发油,分高、低剂量组分别给药,每天给药2次,共给药2d。检测大鼠造模后、末次给药后的大鼠体质量、肛温、进食量和饮水量;ELISA法检测胃组织胃泌素(Gastrin,GAS)、生长抑素(Somatostatin,SS)、6酮前列腺素F1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-keto-PGF1α)及血清中皮质醇(Cortisol,COR)、胃动素(Motilin,MTL)、血栓素B2(Thromboxane-B2,TXB2)的水平。结果3味山姜属中药挥发油高剂量组大鼠饮食量、体质量及肛温均显著上升(P<0.01或P<0.05),大鼠GAS、SS、6-keto-PGF1α和血清中COR、MTL、TXB2水平显著降低(P<0.01或P<0.05),SS、6-keto-PGF1α水平显著升高(P<0.01)。3味山姜属中药挥发油低剂量组大鼠的肛温、SS、6-keto-PGF1α水平均升高、MTL水平显著降低(P<0.01或P<0.05)。红豆蔻挥发油低剂量组大鼠进食量及饮水量升高、COR水平降低(P<0.01或P<0.05)。大高良姜挥发油低剂量组大鼠饮水量升高(P<0.01)。结论高良姜、红豆蔻、大高良姜的挥发油对胃溃疡寒证大鼠具有治疗作用,其药效机制为通过降低大鼠GAS、MTL、COR、TXB2水平,升高SS、6-keto-PGF1α水平,以调节胃肠激素及神经递质的平衡,改善胃黏膜微循环,增加局部血流量,减少血栓形成,发挥保护胃黏膜损伤及促进胃溃疡愈合的作用。

3味山姜属中药黄酮类成分对胃溃疡寒证大鼠肠道短链脂肪酸含量的影响

目的探讨3味山姜属中药黄酮类成分对胃溃疡寒证大鼠肠道短链脂肪酸(SCFAs)含量的影响。方法给予大鼠灌服冰知母水煎液与15%冰乙酸制备胃溃疡寒证模型,模型成功后,随机分为干姜姜辣素组,高良姜组,红豆蔻组和大高良姜组,连续给药2 d,末次给药12 h后采集大鼠新鲜粪便,采用气质联用(GC-MS)法对大鼠粪便中乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸的含量进行测定。结果与空白组比较,模型组SCFAs含量均显著下降(P<0.01)。经药物干预后,与模型组比较,干姜姜辣素组SCFAs含量均显著上升(P<0.05,P<0.01);高良姜组SCFAs含量虽均有所上升但无统计学意义;红豆蔻组SCFAs含量均显著上升(P<0.05,P<0.01);大高良姜组乙酸、丙酸、异丁酸、异戊酸、戊酸含量显著上升(P<0.05,P<0.01),丁酸含量有所上升但无统计学意义。结论3味山姜属中药黄酮类成分有抗胃溃疡寒证作用,其对大鼠肠道中SCFAs含量的调节作用可能是其治疗胃溃疡寒证的重要机制。

香椿子总黄酮体外抑菌作用研究

目的:研究香椿子中总黄酮体外抑菌效果,与西药盐酸左氧氟沙星的体外抑菌作用进行对比,为今后临床用药提供实验依据。方法:对香椿子中总黄酮提取工艺优化,即95%乙醇提取,醇滤液浓缩,再经过正丁醇、乙醚进行萃取,浓缩得总黄酮。用药敏片法进行体外抑菌实验,明确抑菌效果。实验方法简便、易操作、重现性良好。结果:不同浓度香椿子总黄酮对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用;而不同浓度的盐酸左氧氟沙星对大肠杆菌有抑制作用,对金黄色葡萄球菌无抑制作用。

3味山姜属中药挥发油对胃溃疡寒证大鼠胃黏膜损伤修复作用及机制研究

目的探讨高良姜、红豆蔻、大高良姜3味山姜属中药的挥发油对胃溃疡寒证大鼠胃黏膜损伤的修复作用及机制。方法将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、干姜姜辣素组,以及高良姜、红豆蔻、大高良姜挥发油高、低剂量组,每组大鼠10只。利用冰知母水溶液及15%冰乙酸溶液建立大鼠胃溃疡寒证模型。给药治疗后,采集标本,测量大鼠胃酸pH值、胃液量及胃蛋白酶活性;HE染色观察胃组织病理学变化;ELISA法检测大鼠胃组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及血清内皮素(ET)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)水平,生化试剂盒法测定血清一氧化氮(NO)水平。结果胃溃疡寒证模型组大鼠胃酸pH值、SOD活力及IL-10、NO水平显著降低(P<0.01或P<0.05),胃液量、胃蛋白酶活力及MDA、IL-6、ET水平升高(P<0.01或P<0.05),病理观察可见黏膜损伤严重;与模型组比较,3味山姜属中药挥发油高剂量组大鼠胃酸pH值、SOD活力及IL-10、NO水平均显著升高(P<0.01或P<0.05),胃液量、胃蛋白酶活力及MDA、IL-6、ET水平均显著降低(P<0.01或P<0.05),病理观察可见胃黏膜损伤明显修复,出血、水肿、炎性浸润明显减少;3味山姜属中药挥发油低剂量组大鼠胃酸pH值、SOD活力较模型组均显著升高(P<0.01或P<0.05),高良姜挥发油低剂量组胃液量及胃蛋白酶活力均显著降低(P<0.01或P<0.05),IL-10水平升高(P<0.05);红豆蔻、大高良姜挥发油低剂量组大鼠ET水平降低(P<0.05);3味山姜属中药挥发油低剂量组大鼠胃黏膜呈修复状态,上皮细胞仍有少量缺损,以及少量出血、水肿及炎症浸出物。结论高良姜、红豆蔻、大高良姜挥发油对胃溃疡寒证大鼠胃黏膜损伤具有一定的修复作用,其作用机制可能与减少自身胃消化液的侵蚀及抗氧化作用、减轻炎症反应有关。

高良姜、红豆蔻及大高良姜的挥发油对乙醇致GES-1细胞损伤的保护作用及机制研究

目的利用乙醇造成胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)损伤模型,探讨高良姜、红豆蔻、大高良姜3味山姜属中药的挥发油对GES-1细胞损伤的保护作用及作用机制。方法分别以含0~9%乙醇浓度的培养液作用于GES-1细胞,作用时间分别为2、3、4、5、6 h,筛选最佳造模条件;利用乙醇造成GES-1细胞损伤模型,测定经3味山姜属中药挥发油含药培养基处理后的细胞存活率;ELISA法测定细胞上清液中的白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)水平;Western-blot法检测各实验组中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白的表达量。结果6%乙醇溶液处理3 h为造成GES-1细胞损伤的最佳造模条件;与模型组比较,3味山姜属中药的挥发油低、中、高剂量组均能显著升高GES-1细胞存活率(P<0.01);经各药挥发油处理后,细胞上清液的IL-8和TNF-α水平明显降低,VEGF水平显著升高,bFGF蛋白表达量升高(P<0.01或P<0.05)。结论高良姜、红豆蔻、大高良姜3味山姜属中药挥发油均能保护乙醇损伤的GES-1细胞,减轻细胞的受损程度,其作用机制可能与其降低IL-8和TNF-α水平,升高VEGF水平,上调bFGF蛋白表达水平有关。

基于能量代谢对3味山姜属中药黄酮类成分药性归属的初步研究

目的:通过检测胃溃疡寒证模型大鼠体内能量代谢、物质代谢、脂代谢相关酶的含量,考察高良姜、大高良姜、红豆蔻的黄酮类成分对其表达的影响,以阐述其寒热属性及对胃溃疡寒证模型大鼠能量代谢的影响及作用机制。方法:采用知母水煎液和15%冰乙酸灌胃造胃溃疡寒证模型。以干姜姜辣素为阳性对照,分为空白对照组、阳性对照组、模型组、高良姜高低剂量组、大高良姜高低剂量组、红豆蔻高低剂量组,给药2 d,留取血清、肝组织、胃组织,观察大鼠胃组织病理学变化,通过测定Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶水平考察其黄酮类成分对胃溃疡寒证模型大鼠能量代谢的影响,测定琥珀酸脱氢酶(SDH)、肝糖原水平考察对物质代谢的影响,测定游离脂肪酸(FFA)、脂蛋白脂酶(LIPD)、肝脂酶(LIPC)水平考察对脂代谢的影响。同时测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠肝组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶、SDH,以及FFA、LIPD、LIPC、SOD水平显著降低(P<0.05,P<0.01),肝糖原水平和血清中MDA水平显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,给药组能显著升高肝组织中Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶及血清中FFA、SDH水平(P<0.05,P<0.01);除大高良姜低剂量组、红豆蔻低剂量组外,其余给药组能显著升高肝组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶(P<0.05,P<0.01);除大高良姜高低剂量组、红豆蔻低剂量组外,其余给药组能显著升高血清SOD水平(P<0.05,P<0.01);除高良姜低剂量组、大高良姜低剂量组外,其余给药组能显著升高LIPD、LIPC水平(P<0.05,P<0.01);给药组能显著降低肝糖原水平,以及血清MDA水平(P<0.05,P<0.01)。结论:3味山姜属中药黄酮类成分能够促进能量代谢、物质代谢、脂代谢,可初步判断3味山姜属中药黄酮类成分温热属性,也说明其可调节胃溃疡寒证大鼠能量代谢和物质代谢、脂代谢紊乱,同时通过增强抗氧化能力而发挥抗溃疡作用。

高良姜、大高良姜黄酮类成分对胃溃疡寒证大鼠血清NO、ET、SOD、MDA及PAF的影响

目的观察高良姜、大高良姜黄酮类成分对胃溃疡寒证大鼠血清NO、ET、SOD、MDA、PAF的影响,研究二药黄酮类成分的温中散寒作用,探讨中药“亲缘关系-有效成分-药性-效用”之间的内在关系。方法灌服冰知母水煎液与冰乙酸制备大鼠胃溃疡寒证模型,以干姜姜辣素为阳性对照,ELISA法检测大鼠血清NO、ET、SOD、MDA、PAF水平。结果与模型组比较,除大高良姜低剂量组外,其余各组NO水平非常显著或显著升高(P<0.01或P<0.05);各给药组ET水平非常显著或显著降低(P<0.01或P<0.05);高良姜高剂量组SOD水平显著升高(P<0.05),其余各给药组无统计学意义;各给药组MDA水平均显著降低(P<0.05);除高良姜低剂量组外,其余各组PAF水平非常显著或显著降低(P<0.01或P<0.05)。高良姜与大高良姜高剂量组比较,升高NO水平有非常显著性差异(P<0.01);高良姜与大高良姜高低剂量组比较,降低ET水平有显著性差异(P<0.05)。结论高良姜、大高良姜黄酮类成分有改善胃黏膜血管血流、抗氧化、保护胃黏膜作用;高良姜、大高良姜黄酮类成分性效与药材性效一致,即药性温热,具有温中散寒功效。高良姜、大高良姜黄酮类成分是其性效的物质基础,升高NO、SOD水平,降低ET、MDA、PAF水平可能是其性效的科学内涵。具有亲缘关系的中药,性效相似但有强弱之别。

高良姜、大高良姜黄酮类成分对胃溃疡寒证大鼠胃组织PGE2、EGF和血清IL-8、TNF-α等指标的影响

目的 观察高良姜、大高良姜黄酮类成分对胃溃疡寒证大鼠胃组织PGE2、EGF、TGF-α和血清IL-8、TNF-α、HSP70的影响,研究二药黄酮类成分的温中散寒作用,探讨中药“亲缘关系-有效成分-药性-效用”之间的内在关系。方法 采用灌服冰知母水煎液与15%冰乙酸制备大鼠胃溃疡寒证模型,以干姜姜辣素为阳性对照,对胃组织切片评分;采集胃液,测定胃液pH值;ELISA法测定大鼠胃组织PGE2、EGF、TGF-α和胃液胃蛋白酶活性以及IL-8、TNF-α、HSP70水平变化。结果 高良姜、大高良姜高剂量组病理组织评分、胃液量和胃酸pH值有非常显著差异(P<0.01),胃蛋白酶活力显著性降低(P<0.05);PGE2、EGF、TGF-α、IL-8、TNF-α非常显著性降低(P<0.01);HSP70显著升高(P<0.01或P<0.05)。高良姜、大高良姜低剂量组胃液量、胃酸pH值有显著性差异(P<0.05);PGE2、EGF、TGF-α、IL-8、TNF-α非常显著性降低(P<0.01);HSP70显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论 高良姜、大高良姜黄酮类成分有抗胃溃疡寒证作用,其作用机制与保护胃粘膜、抗炎症因子有关。二者药效与作用机制大体相似,这可能是高良姜、大高良姜黄酮类成分温中散寒作用的科学内涵。