表达O型口蹄疫病毒VP1蛋白的重组塞内卡病毒的构建与鉴定

A型塞内卡病毒(SVA)是近年来新流行的一种传染性病原,与口蹄疫病毒(FMDV)具有相似的基因组结构,所致临床症状也十分相似。为了研发一种新型的基因工程活载体疫苗,用于预防塞内卡病毒感染和口蹄疫,以SVA全长感染性克隆pSVA-GX01为基础,在SVA 2A与2B基因之间插入O型FMDV的VP1基因,经双酶切及测序鉴定,成功获得了重组质粒pSVA-FMDV-VP1-O。将重组质粒转染BHK-21细胞,拯救获得重组病毒rSVA-FMDV-VP1-O,间接免疫荧光试验鉴定显示,该重组病毒可在细胞中表达O型FMDV的VP1蛋白。对该重组病毒进行体外生长增殖特性以及遗传稳定性分析表明,重组毒株和亲本毒株在BHK-21细胞上具有相似的增殖特性,插入的FMDV VP1基因可在细胞传代过程中稳定存在6代。研究结果为开发以塞内卡病毒为载体构建表达口蹄疫病毒VP1蛋白的重组基因工程活载体疫苗提供了参考。

血清同型半胱氨酸与中年急性脑血管病及血管硬化相关性研究

目的研究血清同型半胱氨酸（Hcy）与中年急性脑血管病及颈动脉内膜厚度的关系。方法选择中年急性脑血管病患者44例作为观察组，健康中年体检者44例作为对照组，采用酶循环法检测血清Hcy，彩色超声测量颈动脉内膜厚度。结果观察组Hcy水平显著高于对照组（P〈0．05）；观察组女性Hcy水平明显低于同组男性病例（P〈0．05）；直线相关性分析表明，血清Hcy水平升高与颈动脉内膜厚度呈正相关。结论高Hcy血症是中年急性脑血管病的独立危险因素；发生急性脑血管病时，女性血清Hcy值低于男性；血清Hcy水平与颈动脉内膜厚度呈正相关。

猪流行性腹泻传染性胃肠炎双重RT-PCR检测方法的建立及优化

为了临床上能够快速检测出猪流行性腹泻病毒(PEDV)以及传染性胃肠炎病毒(TGEV),本研究根据GenBank中收录的PEDV和TGEV的基因序列,分别设计两对特异性引物,针对本实验室保存的毒株进行了双重RT-PCR检测方法的建立及条件的优化,结果特异性良好,表明该研究建立的双重RT-PCR检测方法操作简单、特异性好,具有较高的检测灵敏性,为PEDV和TGEV的快速鉴别诊断和流行病学调查研究提供了更为敏感、快捷、可靠的技术手段。

脓毒症休克大鼠下丘脑和延髓中胱硫醚β合酶mRNA的表达

目的研究脓毒症休克大鼠下丘脑和延髓中胱硫醚B合酶（CBS）mRNA的表达状况。方法12只雄性SD大鼠随机分为假手术组（n=6）和脓毒症休克组（n=6），脓毒症休克模型采用盲肠结扎穿孔术（CLP）。术后大鼠测血压、观察一般表现，确定脓毒症休克模型是否成功；逆转录PcR（RT-PCR）和实时荧光定量PCR（real-timePCR）检测下丘脑、延髓中CBS基因表达。结果脓毒症休克组大鼠下丘脑及延髓均有CBS的表达。与假手术组比较，脓毒症休克大鼠延髓CBSmRNA表达明显升高（P〈0．05）；下丘脑未有明显变化（P〉0．05）；与假手术组下丘脑比较，假手术组延髓CBS表达显著降低（P〈0．05）；与脓毒症休克组下丘脑比较，脓毒症休克组延髓CBS表达显著升高（P〈0．05）。结论脓毒症休克大鼠脑组织CBSmRNA表达上调，可能通过延髓或下丘脑机制参与脓毒症休克的发病机制。

塞内卡病毒广西分离株的初步分离与鉴定

为了确诊一例疑似SVA感染的临床病例,本试验将从广西地区某猪场母猪和肥育猪鼻及蹄部采集的出现典型水泡性病变的猪水泡液进行无菌处理后接种PK-15细胞,连续传代培养,通过细胞病变、RT-PCR扩增、基因序列测定、TCID_(50)和间接免疫荧光等方法对分离得到的病毒进行鉴定。结果显示:该病毒株在PK-15细胞上生长良好,可见明显细胞病变;接种PK-15细胞进行TCID_(50)测定,病毒滴度达到10^(-6.75)/mL;间接免疫荧光试验结果显示,接种第4代细胞培养物的BHK-21细胞出现特异的绿色荧光;扩增和测定了VP1基因序列后进行同源性及遗传进化分析,发现该毒株与Senecavirus病毒属中的病毒成员同源性最高,与之前2017年报道的广东分离株SVA-CH-GDYS02-2017和SVA-CH-GDLZ01-2017位于较近的进化分支内。以上结果表明,已成功从样品中分离到了SVA,且该毒株可以在PK-15和BHK-21细胞上进行增殖。本研究成功分离到一株SVA,为后续塞内卡病毒的诊断和疫苗研制提供试验材料。

肺结核患者342例耐药分析

近年来,全球结核病疫情的回升已经引起了医务工作者的高度重视,目前结核病呈现高发病、高感染、高耐药、高死亡的特点,因治疗不充分而造成的耐多药肺结核（MDR-TB）为最常见的原因,包括医生、患者、药品等因素[1]。

A型塞内卡病毒VP1蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

A型塞内卡病毒(SVA)是一种新发传染病病原。研究旨在对SVA的衣壳蛋白VP1进行原核表达,并制备其多克隆抗体。以SVA广西分离株SVA-GX01(GenBank登录号:MK039162)RNA为模版,通过RT-PCR扩增结构蛋白VP1基因,构建重组质粒pET-32a-VP1并转化表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。在非变性条件下,将纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。纯化的多克隆抗体进行间接ELISA测定效价,同时进行Western blot与间接免疫荧光分析。结果表明,重组蛋白pET-32a-VP1在大肠杆菌BL21(DE3)以可溶性与包涵体两种形式表达,分子量约为49 kDa。纯化后多克隆抗体效价高达1∶64000。Western blot与间接免疫荧光(IFA)分析显示,多克隆抗体能跟SVA抗原特异性结合。重组SVA-VP1蛋白及其多克隆抗体的成功制备为猪塞内卡病毒血清学检测方法的建立提供了良好的生物材料。

实时荧光核酸恒温扩增检测技术对痰标本中结核分枝杆菌的诊断价值

目的评估实时荧光核酸恒温扩增检测(SAT)技术对痰标本中结核分枝杆菌(MTB)的诊断价值。方法收集确诊为活动性肺结核(PTB)的115例和无证据显示为活动性PTB的67例总计182例患者的痰液标本,采用集菌涂片法、罗氏培养法、PCR荧光探针法及Xpert MTB/RIF法及SAT法进行检测,分析对比检测结果。结果SAT法检测PTB患者MTB的检出率为40.00%,与罗氏培养法的检出率(40.87%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。以罗氏培养法为标准,SAT法敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为95.74%(95%CI:0.8975,0.10174),98.53%(95%CI:95.59%,101.46%),0.9783(95%CI:0.9345,0.1022),0.9710(95%CI:0.9304,0.1012)和0.94。其中阳性预测值高于Xpert MTB/RIF法,各指标均优于PCR荧光探针法。ROC曲线结果显示SAT法AUC为0.936。结论SAT法检测MTB敏感性、特异性和准确度较高,操作简单,检测周期短,其检测结果可以作为临床诊断参考。

护肝颗粒治疗各型肝炎76例

目的:观察护肝颗粒治疗各型肝炎的临床疗效。方法:将151例患者随机分为观察组76例、对照组75例。对照组给予甘草酸二铵、葡醛内酯、肌苷片、白蛋白及促肝细胞生长素等常规保肝治疗;观察组在此基础上加服护肝颗粒,1袋/次,2次/d。2组均连续治疗7天为1个疗程,连续治疗3个疗程后观察疗效。结果:总有效率观察组为93.4%,对照组为84.0%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,观察组患者谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、结合胆红素(CB)、非结合胆红素(UCB)显著降低(P<0.05)。结论:护肝颗粒治疗各型肝炎疗效较好,可较好改善肝功能。

结核分枝杆菌实验室检测方法现状及发展趋势

结核病仍是危害人类健康的重大疾病之一,快速准确地诊断结核病对该病的防治具有重要意义。本文通过介绍并比较传统检测方法和现有分子检测方法的优缺点,分析新型诊断技术的研发现状,在传统检测方法确诊的基础上结合分子检测方法分析其耐药性,实现个性化医疗的新型理念,为结核病防治工作者快速有效地治疗结核病提供明确方向。

耐多药肺结核采用含阿米卡星或卷曲霉素化疗方案治疗的结果分析

选取2012年6月至2014年6月兰州市胸科医院接诊的符合入选标准的耐多药肺结核患者98例,按照随机化的原则分为研究组（48例）和对照组（50例）,研究组患者采用含常用剂量卷曲霉素的化疗方案（6Cm-Lfx-Pto-PAS-Z/18Lfx-Pto-PAS-Z）进行治疗;对照组患者采用国产常用剂量阿米卡星的化疗方案（6Am-Lfx-Pto-PAS-Z/18Lfx-Pto-PAS-Z）进行治疗.观察两组患者在化疗3、6、12、18及24个月的痰抗酸杆菌阴转率、痰结核分枝杆菌培养的阴转率、胸部X线摄影显示的病灶吸收情况、疗效及不良反应情况.评价含卷曲霉素或阿米卡星两种化疗方案在治疗耐多药肺结核患者中的临床疗效.采用SPSS 17.0软件进行数据分析,计量资料采用t检验,计数资料采用χ^2检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.化疗过程中,研究组有3例患者退组,对照组有2例患者退组.研究组患者化疗3、6、12、18及24个月的痰培养阴转率分别为48.89％ （22/45）、57.78％ （26/45）、64.44％（29/45）、71.11％（32/45）和80.00％（36/45）,明显高于对照组[分别为27.08％（13/48）、35.42％（17/48）、41.67％（20/48）、50.00％（24/48）和56.25％（27/48）],两组比较差异有统计学意义（χ^2值分别为4.71、4.67、4.83、4.32、6.00;P值分别为0.030、0.031、0.028、0.038、0.014）.化疗3个月及总疗程结束后,胸部X线摄影显示病灶吸收的总有效率为60.00％（27/45）和84.44％（38/45）,明显高于对照组的35.42％（17/48）和56.25％（27/48）,两组比较差异有统计学意义（χ^2值分别为5.63、8.77;P值分别为0.018、0.003）.两组患者化疗后的药物不良反应发生率分别为22.22％（10/45）和29.17％（14/48）,差异无统计学意义（χ^2=0.59,P=0.444）.故认为含卷曲霉素的化疗方案治疗耐多药结核病患者的效果明显优于含常用剂量的阿米卡星的化疗方案.

走“都市特色”的社区文化繁荣之路

社区是城市的细胞，社区文化的发展和繁荣程度直接决定着城市的和谐程度。搞好社区和谐文化建设，对于提升城市文化软实力，有着其他社会要素不可替代的重要作用。

RNA实时荧光核酸恒温扩增检测技术在结核病诊断中的价值分析

目的分析RNA实时荧光核酸恒温扩增(SAT)检测技术在结核病诊断中的价值。方法 400例疑似肺结核病患者,采取RNA实时扩增检测试剂盒进行检测,并选择痰菌培养及痰涂片进行比较,鉴定阳性菌株。结果以临床诊断结果为金标准,RNA实时荧光核酸恒温扩增检测出结核病患者阳性133例,涂阳患者61例,涂阴72例,敏感度为72.68%,特异度为98.62%。实时荧光核酸恒温扩增检测的符合率为86.75%,显著高于痰分枝杆菌的培养(69.75%)和痰抗酸杆菌涂片(67.50%),对比差异具有统计学的意义(P<0.05)。其中实时荧光核酸恒温扩增检测的3例非阴性阳性,涂片均为阳性。183例诊断结果为肺结核的患者中,涂阳培阳患者实时荧光核酸恒温扩增检测检出率为100.00%,涂阴培阳患者检出率为78.95%,涂阴培阴患者检出率为56.00%,涂阳培阴患者检出率为40.00%。结论 RNA实时荧光核酸恒温扩增检测技术在检测肺结核病具快速、便捷、经济和高敏感度等特点,该方法值得在临床的结核筛查中进行应用。

324例老年肺结核临床分析

目的探讨老年肺结核的发病情况及临床特点.方法对324例老年肺结核与200例青年肺结核进行比较并分析.结果老年组咳嗽、咳痰、气促分别占85.8%、75.6%、52.8%,青年组分别占71%、48%、23%.病灶范围3个肺野以上者,老年组占50.3%,青年组占24%.痰菌阳性率老年组40.1%,青年组36%.结论老年肺结核发病率高,症状不典型,病变范围广泛,合并空洞者多,排菌率高,合并症多.

应用含莫西沙星和含左氧氟沙星方案治疗耐多药肺结核的疗效对比观察

目的:观察含莫西沙星(Mfx)和含左氧氟沙星(Lfx)方案治疗MDR-TB的疗效和安全性,为临床用药提供指导。方法:选取2012年1月至2014年6月期间兰州市肺科医院收治的85例耐多药肺结核患者作为研究对象。将所有患者按随机数字表法分为治疗组43例,对照组42例,治疗组服用含M f x的治疗方案进行治疗,对照组含L f x的方案进行治疗,两组除M f x和L f x外,方案中其他用药均相同。比较分析两组不同时间痰菌阴转率、影像学表现及治疗前后的相关不良反应。采用SPSS17.0软件进行数据分析,计量资料采用t检验,计数资料采用χ~2检验,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果:治疗组失访2例,对照组失访1例,最终治疗3、6、12、18、24个月末含Mfx组阴转率(56.10%,23/41;78.05%,32/41;85.37%,35/41;87.80%,36/41;87.80%,36/41)高于含Lfx组(32.50%,13/40;55.00%,22/40;65.00%,26/40;70.00%,28/40;70.00%,28/40),差异有统计学意义(χ~2值分别为3.98、4.84、3.94、3.87、3.87,P值均<0.05);治疗结束后胸片病灶吸收率和空洞缩小率治疗组均高于对照组,分别为90.24%,37/41;75.00%;30/40和87.80%,36/41;67.50%,27/40。胸片病灶吸收率差异无统计学意义(χ~2=3.291,P>0.05)。空洞缩小率差异有统计学意义(χ~2=4.83,P<0.05)。结论:含莫西沙星方案治疗耐多药患者疗效优于含左氧氟沙星方案。

抗结核药物肝毒性危险因素分析

目的了解抗结核药物导致肝损害的危险因素,为在治疗中合理采取护肝措施提供依据。方法 2005年1月至2010年12月确诊的初治结核患者共757例进行分析,采用非条件logistic回归模型分别进行单因素和多因素回归,并计算相应OR值及95%置信区间。结果 15.5%的患者在抗结核治疗中出现肝损害,多因素分析结果表明有吸烟史、肺野病变数多、低蛋白血症是抗结核药物致肝损害的危险因素,而保肝药的使用则是保护因素。结论肺野病变数多、低蛋白血症会增加接受抗结核药物治疗患者发生肝损害的风险,可以使用保肝药来降低这一风险。

艾滋病患者抗病毒治疗服药依从性及其相关因素的研究

研究采用不同治疗方式的艾滋病患者抗病毒治疗服药依从性及其相关因素的研究。选取2013年5月—2016年5月甘肃省传染病院收治的艾滋病患者126例,将其随机分为观察组和对照组,每组各63例,对照组采取齐多夫定加拉米夫定加依非韦伦的治疗方式,观察组采用是替诺福韦加拉米夫定加依非韦伦进行治疗,对两组患者的用药依从情况及其相关因素情况进行分析。观察组患者服药的依从的优良率为90.48%,明显高于对照组的76.19(P<0.05)。影响患者停药的相关因素有多种,其中忘记占35.71%;不良发应占25.40%;缺乏信心占16.67%;忙碌错过服药时间占10.32%;经济负担占7.14%;用药不方便占4.76%。抗病毒治疗用药方案越简单,用药次数越少,患者依从性越好,影响患者用药依从性的主要因素包括忘记、不良反应、缺乏信心等。

化疗配合虫草抗痨胶囊治疗肺结核临床观察

目的 虫草抗痨胶囊对于肺结核治疗的辅助作用。方法 应用化疗药物加虫草抗痨胶囊治疗肺结核 78例 ,同时以单纯化疗药物治疗组 72例作为对照 ,比较二组疗效。结果 化疗配合虫草抗痨胶囊治疗 2 4月后 ,咳嗽减轻 ,病灶好转 70 % ,CD+ 3、CD+ 4、CD+ 8、CD+ 4/ CD+ 8显著升高 ,与对照组相比有显著性差异 (P<0 .0 1)。痰菌阴转率 5 6 .4 % ,也显著高于对照组 (P<0 .0 5 )。

83例艾滋病感染者抗病毒治疗的疗效分析

探讨艾滋病感染者抗病毒治疗的疗效。对本院2012年3月~2016年9月因艾滋病感染而住院的83例患者进行抗病毒治疗,比较不同治疗时间CD4+T淋巴细胞计数、病毒载量、临床症状改善情况、生活质量变化。患者经治疗体内CD4+T淋巴细胞计数均呈上升趋势,且上升均数较高(P<0.05),相关疾病临床症状均得到有效的控制和改善,且生活质量有所提高。艾滋病感染者抗病毒治疗能有效提高患者机体免疫功能,改善患者临床症状,提高生活质量,达到较好的治疗效果。