枯草杆菌蛋白酶的纯化及酶学性质

本文利用实验室保存的枯草杆菌发酵产生枯草杆菌蛋白酶,并经(NH4)2SO4盐析和CM-sepharose Fast Flow对枯草杆菌蛋白酶进行纯化,用SDSPAGE检测纯化效果,显示该酶分子量低于14kDa,并对蛋白酶的酶学性质、体外溶栓特性及溶栓机理进行初步探讨,其最适反应温度为60-70℃,但50℃以下稳定性良好,最适反应pH为7,pH6-8稳定。

产硫酸软骨素酶菌株的筛选、鉴定及发酵条件优化

目的从土壤中分离筛选产硫酸软骨素酶活性较高的菌株,对目标菌株进行鉴定及发酵条件优化,分析其酶解产物。方法通过初筛及复筛筛选出1株高产硫酸软骨素酶菌株LHYM225,经形态学观察及16SrDNA序列测定并进行系统发育分析对其进行鉴定。利用单因素实验及正交实验对发酵培养基组分及发酵条件进行了优化。通过质谱法检测该酶的酶解产物。结论 16SrDNA序列分析表明菌株LHYM225与节杆菌属菌株(Arthrobacter)亲缘关系最近,将其初步鉴定为节杆菌属菌株(Arthrobacter sp.),该菌株的最佳发酵培养基:硫酸软骨素0.8%,KH2PO40.02%,酵母浸粉0.6%,MgSO4·7H2O 0.8%;最佳发酵条件:25℃,初始pH为6,接种量1.5%,搅拌转速150r/min,通气培养72h,酶活力单位达3.981U/mL,该酶水解硫酸软骨素产生二糖和单糖。

甲壳寡糖对腺嘌呤诱导的慢性肾衰竭大鼠的治疗作用

目的探讨甲壳寡糖对腺嘌呤诱导的慢性肾衰竭大鼠的治疗效果。方法采用灌胃腺嘌呤诱导SD大鼠慢性肾功能衰竭模型,在甲壳寡糖灌胃后14d和28d观察比较正常对照组,模型对照组,尿毒清颗粒组,甲壳寡糖高(H)、中(M)、低(L)组大鼠血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)含量,肾组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、谷胱甘肽氧化酶(GSH-Px)活力,计算各组肾脏重量系数及观察肾组织病理学。结果治疗28d后,甲壳寡糖H、M、L组均可降低慢性肾衰竭大鼠的血清SCr、BUN水平,升高肾组织中T-SOD、GSH-Px水平。其中甲壳寡糖H组相对与模型对照组,血清SCr、BUN含量分别降低87.13%、52.93%,肾组织中T-SOD、GSH-Px活力分别升高62.41%、55.90%,在降低血清SCr和提高肾组织中T-SOD、GSH-Px水平方面效果极显著(P<0.01),且比尿毒清颗粒组效果好。结论甲壳寡糖对慢性肾衰竭大鼠有一定程度的改善作用,对肾组织有一定的保护作用。