课程思政融入普通生物学课程的探索与实践

普通生物学是生物工程等专业的重要基础必修课程。将思政课程融入生物工程专业课程的教学过程中,是培养具有理想信念、科学精神和敬业精神的生命科学工作者的重要保障。首先,探讨普通生物学开展课程思政的可行性;然后,分析课程思政有机融入专业课程的要求;最后,以遗传的基本规律为例,展示思政融入课程教学的过程。课程思政有机融入普通生物学课程,以润物无声的方式引导学生,让课程思政更具生命力。

大片段两步同源重组敲除节杆菌肌酐酸脱氢酶基因质粒的构建

构建一种新型的含有大片段同源臂的重组质粒用来对节杆菌进行代谢工程的改造。使用PCR扩增线性化载体片段,并通过酶切获取同源重组大片段,利用一步克隆技术将上述两片段连接起来;通过PCR-targeting将目标基因替换,并利用酶切自连将插入的片段删除,最后成功得到目标质粒p UK-d IMP。构建的质粒通过2次同源重组将目的基因肌酐酸脱氢酶(IMPDH)成功敲除,且最后菌株不含有任何抗性,开辟了一种针对节杆菌而言新型的基因改造方法。其中IMPDH基因缺失的菌株积累目标产物环磷酸腺苷的能力比对照菌株高49.7%,达到了(9.01±0.20)g/L。

硫胺素对Arthrobacter sp.A302环磷酸腺苷发酵的影响

研究在培养基中加入硫胺素(V B1)对cAMP发酵的影响。结果表明:V B1的最适添加量为0.5 g/L,与对照组相比,环磷酸腺苷(cAMP)产量和细胞干质量分别提高了36.4%和41.8%,达到7.5和7.8 g/L。琥珀酸和α-酮戊二酸的含量有明显的提高,平均提高了43.59%和40.77%;同时,主要副产物乙酸的含量没有明显变化。在发酵过程中,V B1的加入对ATP的含量及与cAMP合成密切相关的几种酶的活性也有显著的影响。

正十六烷对节杆菌发酵产环磷酸腺苷的影响

溶氧在节杆菌发酵产环磷酸腺苷(c AMP)过程中起着重要作用。本研究中,笔者首先对4种氧载体(正癸烷、正十二烷、正十四烷和正十六烷)的最佳添加浓度和添加时间进行筛选。结果表明:在0 h添加2%(体积分数)正十六烷促进c AMP生产效果最佳。在5 L发酵罐中添加2%(体积分数)正十六烷后,细胞干质量(DCW)和c AMP产量分别达到10. 85 g/L和8. 87 g/L,比对照分别提高了19. 4%和23. 2%。氧载体的加入提高了发酵液中的氧传递系数(K_La),降低了胞内NADH/NAD^+比率以及胞内三磷酸腺苷(ATP)水平,而对关键酶的酶活影响不显著。